An antifungal antibiotic was produced from Bacillus sp. YJ-63, and antibiotic was purified to a homogeneity by butanol extraction, Silica-gel column chromatography, Sephadex LH-20 gel filtration column chromatography and HPLC. The purified antibiotic showed one spot on Thin Layer Chromatography, which was negative to ninhydrin and positive to iodine. This finding indicated that the antibiotic was a cyclopeptide structure. UV absorption spectrum of the antibiotic in methanol was maximal at 277 nm, which corresponded to the spectrum for all of the Iturin antibiotic. The antibiotic was stable up to $121^{cdot}C$ and in the range of pH $3.O{\sim}l2.0$ with a stable of ${\alpha}-amino$ acid and ${beta}-amino$ acid, and showed high activity for fungi and yeasts,
The surface tension-decreasing biosurfactant was purified from Rhodotorula muciloginosa G-1. The purification procedure was the solvent extraction of culture broth. To ensure complete extraction, the sample was extracted twice with equal volume of ethylacetate. The crude solution was washed with n-hexane to remove unconsumed soybean oil. The crude sample of biosurfactant was applied to Silica gel column chromatography equilibrated with chloroform, and eluted with chloroform : methanol gradient. Serveral solvent system was used to developed the thin layer chromatography (TLC). The purified biosurfactant sample gave one spot (Rf 0.78). It was estimated that biosurfactant was glycolipid about having M.W.1,500 with standard of polyethyleneglycol by Sephadex LH-20 column chromatography.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.29
no.4
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pp.719-725
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2000
This study focused on the purification and characterization of ACE inhibitor from Porphyra yezoensis. The dried Porphyra yezoensis was ground and hydrolyzed with 2.5 N HCl, followed by neutralization and centrifugation. Then, the subsequential purification of ACE inhibitor was carried out by Amberlite XAD 8, DEAE-Toyopearl 650C, Sephadex LH-20 column chromatography and reverse phase HPLC with C18 column. The purified ACE inhibitor was peptide which consisted of glycine (24.5%), arginine (56.8%) and proline (18.8%). Also, it showed the competitive inhibition pattern to ACE. The apparent molecular mass of purified peptide was 580 dalton, and an IC50 value of ACE inhibitor was 10.6 $\mu\textrm{g}$.
Pinus koraiensis inner bark was collected and extracted with 95% ethanol. The extracts were concentrated and then sequentially fractionated using n-hexane, $CH_2Cl_2$, EtOAc, and $H_2O$ to be freeze dried. A portion of EtOAc fraction (6.6 g) was chromatographed on a Sephadex LH-20 column using aqueous methanol to isolate (+)-catechin (1), (-)-epicatechin (2), and trans-pinostilbenoside (3). Resveratrol (4) and trans-pinostilbene (5) were isolated by column chromatography using EtOH-hexane mixture after purification with aqueous methanol. The structures of these stilbenosides and flavans were characterized by spectroscopic tools using NMR and MS.
During the screening of inhibitors of melanin biosynthesis from microbial secondary metabolites, a fungal strain MR-93 which was capable of producing high level of an inhibitor was selected from plant leaf. Based on taxonomic studies, the fungus could be classified as a strain of Trichoderma sp.. The active compound (MR-93D) was purified from the culture broth by Diaion HP-20 column chromatography, ethylacetate extraction, Sephadex LH-20 column chromatography and HPLC. The inhibitor was identified as 4-hydroxy-8-isocyano-l-oxaspiro[4-4]cyclonon-8-en-2- one by spectroscopic methods of UV, $^{1}$H-NMR, ESIMS and IR. MR-93D showed a strong tyrosinase inhibitory activity with 0.03 $\mu$g/m of IC$_{50}$ value. It also inhibited melanin biosynthesis with 35 mm inhibition zone at 30 $\mu$g/paper disc in Streptomyces bikiniensis, a bacterium used as an indicator organism in this work.
Pseudomonas aeruginosa strain B5 with antagonistic activity against Phytophthora capsici and Magnaporthe grisea, was isolated from pepper-growing soil. From the culture of P. aeruginosa strain B5 grown on King's medium B, antibiotic substances were purified using XAD-2 column chromatography. XAD-2 eluates inhibited not only the mycelial growth of P. capsid and M. grisea, but also the development of Phytophthora blight on pepper plants. The crude antibiotic substances were further purified by using silica gel column chromatography, Sephadex LH-20 column chromatography, thin layer chromatography on silica gel plates, and high performance liquid chromatography. Silica gel column chromatogrphy gave good separation of the four antibiotic substances. The pure antibiotics P1, P2, and P3 finally purified by preparative HPLC inhibited the mycelial growth of P. capsici, at concentrations from 7 to 10 $\mu g/ml$. Only P1 and P2 had antifungal activity against M. grisea at 8 $\mu g/ml$. P1 and P3 were highly inhibitory to the mycelial growth of Botryosphaeria dothidea and Botrytis cinerea at relatively low concentrations. However, the three antibiotics had no antifungal activity against Rhizoctonia solani. The chemical structures of these antibiotics are being identified.
A strain of Actinomycetes producing cathepis B inhibitor was isolated from soil and identified as Streptomyces misakiensis. The product of S. misakiensis inhibited effectively cathepsis B proteinases as well as trypsin and papain. The cathepsin B inhibitor were largely produced with incubation for 4 days. The S. misakiensis was the most growth with incubation for 5 days. The cathepsin B inhibitor was isolated from the extraction of both with ethanol, ethanol and chlorofrom, and following several column chromatography such as sephadex G-15, silica gel 60 and sephadex LH-20 chromatography. The moleculer weight of purfied inhibitor was 138 dalton.
n-Butanol extracts from Phellodendron amurense have about 50% inhibitory activity against hyaluronidase. The anti-inflammatory compound was isolated from P. amurense by Sephadex LH-20 and MCI-gel CHP-20 column chromatography with gradient elution. As a the result, its structure was identified as Jatrorrhizine by the interpretation of spectroscopic analyses including $^1H$- and $^{13}C$-NMR. In anti-inflammatory activity, the expression of nitric oxide (NO) was inhibited as above 60% at 100 ${\mu}g/mL$ concentration of extracts and then purified Jatrorrhizine from P. amurense. The inhibitory activities against the expression of inducible NO syntase (iNOS) and cyclooxygenase-2 (COX-2) were 45% and 29%. It seems that the extracts and purified Jatrorrhizine from P. amurense were expected anti-inflammatory effect in lipopolysaccharide (LPS)-stimulated Raw264.7 cells.
Kim Dae Keun;Lim Jong Pil;Kim Jin Wook;Park Hee Wook;Eun Jae Soon
Archives of Pharmacal Research
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v.28
no.1
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pp.39-43
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2005
Eight compounds were isolated from the methanolic extract of the twigs of Celtis sinensis through repeated silica gel and Sephadex LH-20 column chromatography. Their chemical structures were elucidated as two triterpenoids, germanicol and epifriedelanol, two amide compounds, trans-N-caffeoyltyramine and cis-N-coumaroyltyramine, two lignan glycoside, pinoresinol glycoside and pinoresinol rutinoside, and two steroids by spectroscopic analysis.
The antioxidant activity of Lactuca scariola (Compositae) was investigated by measuring the radical scavenging effect on DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) radical. The methanolic extract of the aerial parts of Lactuca scariola showed strong radical scavenging activity. The EtOAc soluble fraction exhibited a stronger activity than the others, and was purified by silica gel and Sephadex LH-20 column chromatography. Quercetin-3-O-$\beta$-D-glucopyranoside, luteolin-7-O-$\beta$-D-glucopyranoside, luteolin, quercetin and kaempferol, together with 11$\beta$,13-dihydrolactucin were isolated from the EtOAc soluble fraction as active ingredients.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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