• 제목/요약/키워드: Sephadex LH-20 column chromatography

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Isolation and Identification of Antimicrobial Substance from Canavalia gladiata

  • Lee, Hang-Young;Jeong, Heon-Sang
    • Food Science and Biotechnology
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    • 제14권2호
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    • pp.268-274
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    • 2005
  • Novel antimicrobial substance was isolated from seed coat of Canavalia gladiata by extraction with 75% methanol. Isolation and purification were conducted with solvent fractionation and chromatography on silica gel and sephadex LH-20 columns. Each fraction of antimicrobial activity was tested by paper disc method. Single compound was obtained from the 4th fraction of sephadex LH-20 column chromatography using chloroform/methanol (1:4, v/v), and identified as 3,4,5-trihydroxybenzoic acid methyl ester (methyl gallate) based on HPLC, GC/MS, FT-IR, $^1H$ NMR, and $^{13}C$ NMR analyses. This is the first report describing the presence of methyl gallate in C. gladiata.

울금(Curcuma longa)으로부터 분리한 squalene synthase 저해물질의 특성 (Characterization of Squalene Synthase Inhibitor Isolated from Curcuma longa)

  • 최성원;양재성;이한승;김동섭;배동훈;유주현
    • 한국식품과학회지
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    • 제35권2호
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    • pp.297-301
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    • 2003
  • 동맥경화증과 같은 심혈관 질환을 야기시키는 주요 위험요인인 혈중 콜레스테롤의 수준을 낮추기 위하여 콜레스테롤 생합성 과정의 속도조절단계 효소의 하나인 squalene synthase의 활성을 저해하는 물질을 분리 정제하여, 물질의 이화학적 특성과 생물학적 특성을 검토하였다. Squalene synthase 저해물질은 acetone extraction, ethyl acetate extraction, silica gel column chromatography, sephadex LH-20 column chromatography, 결정화 등을 이용하여 분리 정제하여 YUF-01을 얻었다. 기기분석을 통하여 구조분석을 행한 결과 YUF-01은 분자량 368, 분자식 $C_{20}H_{21}O_6$으로 분석되었으며 243과 421 nm 에서 UV-VIS 흡광을 나타내었고 $^{13}C$ NMR spectrum과 $^1H$ NMR spectrum을 검토하였을 때 aromatic ketone 구조인 curcuminoid 계통의 curcumin과 일치하였다. Squalene synthase에 대한 curcumin의 $IC_{50}$ 값은 $100{\mu}M$이었으며, non-competitive inhibitor로 작용하였다.

두릅수피에서 항미생물 활성을 갖는 3,4-Dihydroxycinnamic Acid의 분리 (Isolation of 3,4-Dihydroxycinnamic Acid with Antimicrobial Activity from Bark of Aralia elata)

  • 마승진;국주희;고병섭;박근형
    • 한국식품과학회지
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    • 제28권3호
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    • pp.600-603
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    • 1996
  • 두릅나무(Aralia elata $S_{EEMANN}$) 껍질의 MeOH추출물이 세균과 호모, 곰팡이 등에 대한 항미생물 활성을 보여 solvent fractionation, Silica gel adsorption chromatography, Sephadex LH-20 column chromatography, silica gel partition chromatography, HPLC 등의 기법으로 활성물질을 순차 정제하여 얻어진 활성물질을 1% acetic acid-MeOH (60 : 40, v/v)용매계의 HPLC에 의해 분리하였다. 분리된 성분($t_r$ 17.1 min)의 활성본체를 구명하기 위하여 $MS,\;^1H-NMR\;and\;^13C-NMR$. 등을 이용하여 기기분석한 결과, trans-3,4-dihydroxycinnamic acid로 동정되었다. 3,4-dihydroxycinnamic acid가 두릅에서 항미생물 활성물질로서 분리, 동정된 것은 처음으로 생각된다.

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Cacao Bean Husk 추출물로부터 Glucosyltransferase 저해 활성 물질의 분리 및 구조 동정 (Purification and Structure Determination of the GTase Inhibitor from Cacao Bean Husk Extract)

  • 권익부;안봉전이신영
    • KSBB Journal
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    • 제11권5호
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    • pp.536-542
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    • 1996
  • 충치 예방 물질의 탐색 연구 일환으로, Cacao bean husk(CBH) 추출물로부터 얻어진, gluco-syltransferase(Gtase) 저해 활성 분획을 분리하였 다. 이를 다시 MCI-gel CHP-20와 Sephadex LH 20의 column chromatography법으로 분리, 정제하였으며, 이로부터 얻어진 2개의 GTase 활성 저해 물질에 대한 구조 해석을 행하였다. 분리.정제된 2개의 GTase 저해 활성 물질은 anisaldehyde-$H_2SO_4$ 및 FeCb에서 각각 갈색 및 청색 반응을 하며, 또 TLC상에서 dimer의 flavan-3-ol $R_r$값을 나타내는 단일 물질이었다. NMR(PMR, C CMR) 빛 mass spectrum으로 두 정제 분획에 대 한 화학 구조를 분석한 결과, G Tase 저해능을 나타 내는 단물질은 (-)-epicatechin-($\beta\rightarrow8$)-catechin 으로 결합된 procyanidin B-1 ($C_{30}H_{26}O_{12}$) 및 cate chin의 2량체인 procyanidin B一3($C_{30}H_{26}O_{12}$)이었다.

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부추의 항미생물 활성물질 (Antimicrobial Substances in Leek (Allium tuberosum))

  • 김선재;박근형
    • 한국식품과학회지
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    • 제28권3호
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    • pp.604-608
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    • 1996
  • 부추에 존재하는 항미생물 활성물질에 관한 정보를 얻고자 항미생물 활성의 검색 및 항미생물 활성물질의 탐색을 시도하였다. 부추 MeOH추출물의 항미생물 활성을 17종의 미생물을 대상으로 검색한 결과 Gram 양성의 세균, Gram 음성의 세균 그리고 효모에 대해서 광범위한 미생물 증식 억제능을 나타냈다. 부추를 MeOH로 추출, 용매분획하여 얻어진 활성을 silica gel adsorption chromatography, Sephadex LH-20 chromatography, TLC, silica gel partition chromatography, HPLC 등의 방법으로 분석한 결과 부추에 존재하는 항비생물 활성물질은 약간의 극성을 띠는 중성물질로 200-400정도 분자량을 갖는 6종의 항미생물 활성물질의 존재가 확인되었다.

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밤나무 잎의 항미생물 효과 및 활성물질 (Active Compounds and Antimicrobial Effects from Castanea crenata Leaf)

  • 최옥범
    • 한국식품영양학회지
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    • 제18권4호
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    • pp.367-372
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    • 2005
  • 밤나무 잎에 함유된 기능성 물질 검색의 일환으로 항미생물 효과를 검정하고 활성물질의 분석을 시도하였다. 예비실험을 통해 추출물의 활성을 확인한 후 시료를 n-hexane, EtOAc, MeOH로 순차 추출하여 정제한 다음 활성이 강한 MeOH 분획의 0.2 g, 0.5 g에 해당하는 추출물로 13종의 미생물에 대해 활성을 측정한 결과, Cram 양성 세균 중에서 S. aureus와 S. epidermidis는 대조구로 사용한 benzoic acid보다 강한 활성이 나타났고, M. luteus와 L. mesenteroides, B. subtilis에서도 활성이 인정되었으며, Gram 음성 세균인 E. coli, S. typhimurium, P. aeruginosa에서도 강한 활성이 나타나 밤나무 잎 추출물은 비교적 넓은 항균 spectra와 활성이 있음이 확인되었다. 이에 활성물질을 규명하고자 시료를 solvent fractionation, silica gel adsorption column chromatography, Sephadex LH-20 column chromatography, HPLC 등으로 정제하고 활성이 나타난 산성 획분과 페놀성 획분의 물질을 분리한 후 MS, $^1H-NMR,\;^{13}C-NMR$ 등으로 분석한 결과, 산성 획분에서는 stigmast- 5-en-3-ol($\beta$-sitosterol)이 활성을 갖는 물질로 나타났다.

왕불류행의 Ecdysteroid성분 (Ecdysteroids from Melandrii Herba)

  • 김호경;전원경;고병섭
    • 약학회지
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    • 제45권5호
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    • pp.455-459
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    • 2001
  • Melandrii Herba has been used for tympanitis, sore throat, dysentery and dehumidifying diuretic. From the BuOH fraction of methanol extracts, three ecdysteroids (ecdysterone, ecdysterone 22-acetate and inokosterone) were isolated by column chromatography using Amberlite XAD-4, ODS and Sephadex LH-20 gel and by HPLC method. The structures of these compounds were identified on the basis of spectroscopic methods.

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밤 귀피의 용매분획별 항산화 활성과 항산화 물질의 분리 (Antioxidative Activity of Solvent Fraction and Isolation of ANtioxidative Compound from Chestnut Husk)

  • 권은정;김영찬;권미선;김창섭;강우원
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제30권4호
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    • pp.726-731
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    • 2001
  • 밤 가공공장에서 폐기되고 있는 밤의 귀피를 항산화 기능성 자원으로 활용하고자 밤 귀치의 methanol 추출물 및 용매획분을 benzoic acid 수산화법으로 hydroxyl radical 소거능과 ferric thiocyanate법으로 과산화물생성 억제능을 시험하였다. 대부분의 획분에서 항산화성을 보였으며 특히 ethyl acetate 획분에서 BHA나 $\alpha$-tocopherol과 거의 유사한 rkdgkshydroxyl radical 소거능과 지질과산화물생성 억제능을 보였다. Ethyl acetate 획분으로부터 항산화성 물질을 분리하기 위하여 Sephadex LH-20 column chromatography 및 prep HPLC를 행하여 단일 물질로 정제하였다. 분리 정제된 물질을 $^{1}$H-NMR과 $^{13}$C-NMR로 구조 분석한 결과 gallic acid로 동정하였다. 페놀산을 GC로 분석한 결과 밤 귀피의 주요 페놀산으로 ellagic acid(172.22 mg%) 와 gallic acid(107.39 mg%)가 확인되었다.

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결명자의 brassinosteroid 활성물질 (Brassinosteroid substances in immature Cassia tora seeds)

  • 박근형;김선재;현규환
    • Applied Biological Chemistry
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    • 제36권2호
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    • pp.99-104
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    • 1993
  • 결명자에 존재하는 brassinosteroid 활성물질을 탐색하기 위하여 미숙종자를 MeOH로 추출하고, 이 추출물을 rice inclination test를 지표로, 용매분획, silica gel adsorption chromatography, Sephadex LH-20 chromatography, charcoal adsorption chromatography, Bondesil chromatography 등의 수법으로 brassinosteroid 활성물질을 정제한 다음, silica gel 흡착 chromatography로 활성성분을 분리하고, 각 활성획분에 대해 TLC 및 $C_{18}$ column과 ODS column을 사용한 HPLC에 의해 활성본체를 구명한 결과, 결명자의 brassinosteroid 활성물질로 최초로 teasterone, castasterone, brassinolide 가 동정되었다. 결명자에 함유된 brassinosteroid의 함량은 brassinolide로 환산하여 생체중량g당 $3.5{\sim}5.5\;ng$ 정도였으며, 동정된 3종의 brassinosteroid는teasterone, castasterone, brassinolide순으로 존재하였다.

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애엽의 혈액 응고 억제 성분에 관한 연구 (Studies on the Anti-coagulant Component of Artemisiae Herba)

  • 한용남;양현옥;한병훈
    • 약학회지
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    • 제28권2호
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    • pp.69-77
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    • 1984
  • Anti-coagulant activities of 25 species of medicinal plants which have been related to "blood" in ethnobotany, were evaluated by plasma recalcification time test. Among these, Artemisiae Herba showed the strongest activity. Its anti-clotting component was purified by using DEAE-cellulose, Sephadex G-75, and Sephadex LH-20 column chromatography. Its active compound has an average molecular weight of approximately $10^{4}$ and it was turned to be an acidic polysaccharide composed of galacturonic acid and rhamnose (7 : 2) by chemical analysis and spectral data.

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