• 제목/요약/키워드: Semliki forest virus

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Induction of Demyelination by Infection of Semliki Forest Virus

  • Kim, Hyun Joo;Choi, Chang-Shik;Hong, Seong-Karp
    • Rapid Communication in Photoscience
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    • 제5권1호
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    • pp.11-12
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    • 2016
  • Schwann cells and neuronal cells from dorsal root ganglion (DRG) in embryos of rat were cultured in vitro respectively. The purified neuronal cells with anti-mitotic agents and purified Schwann cells were co-cultured and then accomplished myelination processing. Infection of Semliki forest virus into this myelinated co-culture system was performed and then accomplished demyelination. We identified myelination and demyelination processing using antibody of neuropeptide Y.

Semliki Forest Virus 감염은 뉴런의 탈수초를 유발한다 (Infection of Semliki Forest Virus Induces Demyelination of Neuron)

  • 김현주;사영희;홍성갑
    • 한국정보통신학회:학술대회논문집
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    • 한국정보통신학회 2017년도 춘계학술대회
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    • pp.714-717
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    • 2017
  • 슈반세포와 뉴런 세포가 쥐의 배아의 척수신경절로 부터 각각 in vitro에서 분리되었다. 배양된 슈반세포와 뉴런 세포는 동일한 평판접시에서 공동배양 되었다. 이들 세포들은 때 수초화가 진행되었다. 이렇게 수초화된 공동 배양은 Semliki forest virus에 의해 감염되었고 그 때 탈수초화 과정을 유발시켰다. 우리는 수초화된 뉴런에 존재하는 peripheral myelin protein 22의 항체를 이용하여 수초화 과정과 탈수초화 과정을 확인하였다.

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Semliki forest virus 감염에 의한 뉴우런의 탈수초 (Demyelination of Neuron by Infection of Semliki Forest Virus)

  • 김현주;김지영;사영희;홍성갑
    • 한국정보통신학회:학술대회논문집
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    • 한국정보통신학회 2016년도 춘계학술대회
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    • pp.718-721
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    • 2016
  • 쥐의 배아의 척수신경절로 부터 슈반세포와 뉴런 세포가 각각 배양되었다. in vitro 시스템에서 배양되었다. 항 유사분열제로 처리한 정제 뉴런 세포와 정제 슈반세포들이 공동배양 되었고 그 때 수초화 과정이 진행되었다. 수초화된 공동 배양에 Semliki forest virus를 감염시켜 탈수초화를 진행 시켰다. 우리는 수초화의 형성을 의미하는 neuropeptide Y의 항체를 이용하여 수초화와 탈수초화를 확인하였다.

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Semliki Forest Virus 감염은 뉴우런의 탈수초를 유발한다 (Infection of Semliki Forest Virus Induces Demyelination of Neuron)

  • 김현주;사영희;홍성갑
    • 한국정보통신학회논문지
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    • 제21권6호
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    • pp.1212-1217
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    • 2017
  • 척수신경절의 신경 세포와 슈반세포의 공동 배양으로 수초화 형성 세포 집단이 제조되었다. 슈반세포와 뉴런 세포가 쥐의 배아의 척수신경절로 부터 각각 in vitro에서 분리되었다. 배양된 슈반세포와 뉴런 세포는 동일한 평판접시에서 공동배양 되었다. 본 실험과정은 다음과 같은 4 단계로 구성되어 있다 : 첫 번째 단계는 배아의 척수 신경절 세포의 현탁 과정, 두 번째 단계는 안티 mitotic cocktail의 추가 과정, 세 번째 단계는 척수신경절 세포의 정제 과정, 및 네 번째 단계는 척추 신경절 세포에 슈반 세포의 추가 과정이다. 이들 세포들은 때 수초화가 진행되었다. 이렇게 수초화된 공동 배양은 Semliki forest virus에 의해 감염되었고 그 때 탈수초화 과정을 유발시켰다. 우리는 수초화된 뉴런에 존재하는 peripheral myelin protein 22의 항체를 이용하여 수초화 과정과 탈수초화 과정을 확인하였다.

Mature HIV-like Particles Produced from Single Semliki Forest Virus-Derived Expression Vector

  • KIM EUN;POO HAR-YOUNG;SUNG MOON-HEE;KIM CHUL-JOONG
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제15권6호
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    • pp.1229-1239
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    • 2005
  • Human immunodeficiency virus-like particles (HIVVLPs) with native conformations similar to that of the wild-type virion could be valid candidates for vaccine development. To this end, we used a Semliki Forest Virus (SFV) expression system to produce HIV- VLPs containing high quantities of native envelope proteins. Here, we described a single SFV replicon containing the HIV gagpol and env genes under the control of separate subgenomic promoters. Mature VLPs incorporating the Gag and Env proteins were detected in the supernatant of replicon-expressing cells by Western blot analysis. The HIV-VLPs showed the expected molecular density (1.14-1.18 g/ml) on a $20-60\%$ sucrose gradient; the particles were 100-120 nm in diameter and Env proteins were observed on their surfaces by immunogold electron microscopy. RT-PCR analysis of VLP-associated RNAs in mature HIV-VLPs revealed two SF V-derived RNA species (full-length and subgenomic). Immunization studies in Balb/c mice showed that these HIV-VLPs were capable of inducing both HIV-specific antibodies and cell-mediated immune responses. Taken together, our results indicate that the SFV replicon system is useful for the production of HIV-VLPs, which may be valuable candidates for an HIV vaccine.

인삼추출물의 면역조절 및 항바이러스 활성 연구 (IMMUNOMODULATORY ACTIVITY OF PANAX GINSENG EXTRACT)

  • Singh V.K.;Agarwal S.S.;Gupta B.M.
    • 고려인삼학회:학술대회논문집
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    • 고려인삼학회 1984년도 학술대회지
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    • pp.225-232
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    • 1984
  • 인삼은 외적 유해인자에 대한 비특이적 생체 저항력을 증진시켜주며 물리적, 화학적, 생물학적인 외적 변화에 대해 adaptogen으로서 작용한다. 인삼은 말초혈액 림파구에 의한 면역 인터페론 합성을 촉진시키며, 바이러스에 감염된 흰쥐에 대해 치료효과가 뚜렷하다. 인삼을 Semliki forest virus(SFV) 감염전후 계속 경구투여하면 $34{\~}40\%$의 보호 효과가 있었다. 인삼투여로 세포의 항체생성능이 증가되었으며, sheep의 적혈구 세포에 대한 혈행항체의 역가가 증진되었다. 또한 SFV 항원에 대한 면역성도 높아졌으며, N.K. 세포의 활성도도 크게 증가되었다. Aspergillus Ochraceus ATCC 28706 균주에서 추출한 6-MFA는 인터페론 유도물질 (inducer)로서 잘 알려져 있으며 두 종류의 인터페론, 즉 산성 용액에서 안정한 인터페론과 불안정한 인터페론을 유도시킨다. 인삼은 이들 두 종류의 인터페론 생성을 모두 증진시킨다. 동물실험 결과 6-MFA를 단독 처리하면 SFV 감염에 의해 낮은 보호작용을 보이나, 인삼투여를 병용하면 SFV 감염을 $100{\%}$ 완전히 방지할 수 있었다.

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포유동물 세포에서 Human Immunodeficiency Virus-1의 Oligomeric gp140 단백의 발현 및 특성 (Expression and Characterization of Human Immunodeficiency Virus-1 Oligomerized gp140 Protein in Mammalian Cells)

  • 김은옥;김은;김현수;신광순;김철중
    • 대한수의학회지
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    • 제42권1호
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    • pp.55-64
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    • 2002
  • HIV-1의 envelope glycoprotein은 중화항체에 의한 체액성 면역반응의 중요한 target으로 surface glycoprotein인 gp120과 transmembrane glycoprotein인 gp41로 이루어져 있다. gp120과 gp41의 ectodomain으로 이루어진 gp140 유전자를 PCR의 방법으로 증폭하고 Semliki Forest virus(SFV) 유래 expression system을 이용하여 mammalian 세포에서 발현하였다. 발현된 gp140은 natural HIV-1에서와 같이 oligomer를 형성하였다. 발현된 gp140을 정제하여 BALB/c 마우스에 접종하여 항체가 형성되었음을 확인하였다.

Expression of Rotavirus Capsid Proteins VP6 and VP7 in Mammalian Cells Using Semliki Forest Virus-Based Expression System

  • Choi, Eun-Ah;Kim, Eun;Oh, Yoon-I;Shin, Kwang-Soon;Kim, Hyun-Soo;Kim, Chul-Joong
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제12권3호
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    • pp.463-469
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    • 2002
  • Rotaviruses are the world-wide leading causative agents of severe dehydrating gastroenteritis in young children and animals. The outer capsid glycoprotein VP7 and inner capsid glycoprotein VP6 of rotaviruses are highly antigenic and immunogenic. An SFV-based expression system has recently emerged as a useful tool for heterologous protein production in mammalian cells, exhibiting a much more efficient performance compared to other gene expression systems. Accordingly, the current study adopted an SFV-based expression system to express the VP7 of a group A human rotavirus from a Korean isolate, and the VP6 of a group B bovine rotavirus from a Korean isolate, in mammalian cells. The genes of the VP6 and VP7 were inserted into the SFV expression vector pSFV-1. The RNA was transcribed in vitro from pSFV-VP6 and pSFV-VP7 using SP6 polymerase. Each RNA was then electroporated into BHK-21 cells along with pSFV-helper RNA containing the structural protein gene without the packaging signal. The expression of VP6 and VP7 in the cytoplasm was then detected by immunocytochemistry. The recombinant virus was harvested by ultracentrifugation and examined under electron microscopy. After infecting BHK-21 cells with the defective viruses, the expressed proteins were separated by SDS-PAGE and analyzed by a Western blot. The results indicate that an SFV-based expression system fur the VP6 and VP7 of rotaviruses is an efficient tool for developing a diagnostic kit and/or preventive vaccine.