This experiment was conducted to introduce phosphinothricin acetyl -transferase(PAT) gene, resistant to basta and non-selective herbidide, into tobacco(Nicotiana tabacum cv.BY4). For shoot formation,tobacco leaf disks were placed on the MS medium supplemented with 2.0mg/L BA and 0.1mg/L NAA. In this medium condition, tobacco leaf disces were cocultivated with A. tumefaciens MP90 containing NPT IIand PAT resistant to kanamycin and Basta, respectively. Shoots were obtained in the medium containing antibiotics, and those were transferred to rooting medium supplemented with 0.1mg/L NAA and antibiotics. The plants obtaining roots were transplanted into soil. Phenotype of transgenic tobacco plant was mostly as normal plant. However, about 5% was abnormal plant, which did not set seeds. PCR analysis and southern blot were performed to determine transformation. As the results, it was confirmed that PAT gene was stably integrated into tobacco genome.When herbicide, basta, was sprayed to the plants confirmed by PCR, the transgenic plants showed normal growth, whereas normal plants died. Therefore, the result of this experiment show that tobacco transformation for the resistance to basta, non-selective herbicide, was successful because PAT gene was stably integrated into tobacco.
The aim of this study was to identify the non-Aggregatibacter actinomycetemcomitans bacteria grown on the tryptic soy-serum-bacitracin-vancomycin (TSBV) medium, an A. actinomycetemcomitans selective medium. A total of 82 unidentified bacterial isolates from the oral cavities of a Korean population were kindly provide by the Korean Collection for Oral Microbiology. All the clinical isolates were grown on TSBV medium and bacterial DNA purified from each isolate was subjected to PCR with universal primers specific for bacterial 16S rRNA genes (16S rDNAs) sequence. The each bacterial 16S rDNA was amplified by PCR and the nucleotide sequences of it was determined by the dideoxynucleotide chain termination method. They were identified by 16S rDNA sequence comparison method at the specie-level. The data showed that Neisseria spp. (42 strains), Fusobacterium spp. (10 strains), Capnocytophaga spp. (8 strains), Propionibacterium acnes (5 strains), Aggregatibacter aprophilus (4 strains), Campylobacter spp. (5 strains), Veillonella dispar (3 strains), Streptococcus sp. (1 strain), Haemophilus parainfluenzae (1 strain), Leptotrichia wadei (1 strain), Morococcus sp./Neisseria sp. (1 strain), and Staphylococcus sp. (1 strain) were identified. These results could be used to develop a new A. actinomycetemcomitans-selective medium which is more effective than the TSBV medium in future studies.
Lee, Da Yeon;Kim, Hee-eon;Seo, Dong Won;Cho, Yong Sun
Korean Journal of Food Science and Technology
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v.48
no.4
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pp.323-328
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2016
In this study, specific and rapid enrichment and growth conditions for the most important, classic non-O157 enterohemorrhagic Escherichia coli (EHEC) serogroups were assessed. Three enrichment broth types, namely, EC medium with MUG broth, BRILA broth, and mTSB broth with novobiocin, were compared to identify the optimum enrichment broth for EHEC isolation. Four kinds of selective media, namely, ENDO agar, Chromocult agar, TBX agar, and CHROMagar$^{TM}$ STEC medium, were compared to identify the optimum one for non-O157 EHEC isolation. The results suggested that incubation in EC medium with MUG broth at $42^{\circ}C$ for 20 h is optimum for the enrichment of non-O157 EHEC. TBX agar was identified to have the highest specificity among the tested media. Consequently, a combination of complementary selective media according to serotype must be considered for comprehensive isolation of specific EHEC.
Dark brown Alpaca fiber was reduced in shade via selective bleaching with peroxide. Two selective oxidative bleaching methods were tested on alpaca top to assess their effectiveness for color removal and fiber quality properties. Color change, bundle strength, weight loss, fiber diameter, surface modification, dye-ability and dye wash fastness were assessed for both methods and compared with the original brown top. Bleach method 1 (BL-I) showed little surface modification, 5.8% weight loss and 2.4% strength loss. D1925 yellowness index was reduced to 74.3 from 83.1 and provided a good base for the dyeing of medium to deep shades. Bleach method 2 (BL-II) displayed considerable surface modification, 7.8% weight loss and 18% strength loss. BL-II also resulted in a mean diameter reduction of 1.9 micron during bleaching. Yellowness was reduced to 64.5 from 83.1 and provided a very good base for the dyeing of medium to deep shades. BL-I showed better exhaustion of the premetallised dye Lanaset Violet B than BL-II. Wash fastness for BL-II was 1 grey scale unit poorer than BL-I. BL-II showed far better color clarity at pale depths however the wash fastness of the finished product was not good enough to maintain the depth or clarity of the color. BL-I showed poorer clarity of color but exhibited better wash fastness results.
Problems encountered in IEEE 802.11 medium access control (MAC) design are interferences from neighboring or hidden nodes and collision from simultaneous transmissions within the same contention floors. This paper presents the selective decoding schemes in MAC protocol for multiple input multiple output ad-hoc networks. It is able to mitigate interferences by using a developed minimum mean-squared error technique. This interference mitigation combined with the maximum likelihood decoding schemes for the Alamouti coding enables the receiver to decode and differentiate the desired data streams from co-channel data streams. As a result, it allows a pair of simultaneous transmissions to the same or different nodes which yields the network utilization increase. Moreover, the presented three decoding schemes and time line operations are optimally selected corresponding to the transmission demand of neighboring nodes to avoid collision. The selection is determined by the number of request to send (RTS) packets and the type of clear to send packets. Both theoretical channel capacity and simulation results show that the proposed selective decoding scheme MAC protocol outperforms the mitigation interference using multiple antennas and the parallel RTS processing protocols for the cases of (1) single data stream and (2) two independent data streams which are simultaneously transmitted by two independent transmitters.
To evaluate the recovery rates to increase toxigenic C. difficile, the selective enrichment broth culture methods were compared with commonly used cytotoxin assays and toxigenic culture. First, the enrichment culture, using the selective medium broth for 2 to 5 days, was performed and then, toxigenic C. difficile was confirmed by C. difficile toxin gene-specific PCR after being cultured on C. difficile selective agar. The sensitivity of C. difficile from the enrichment culture (100%) was higher than that of C. difficile selective agar culture (93.8%), while positive predictive values (PPV) were low; 72.7% (16/22) and 88.2% (15/17). PPV of the enrichment culture are not high. Recently, combinations of C. difficile selective agar culture, C. difficile A & B assays, glutamate dehydrogenase, and nucleic acid amplification method are widely used. The enrichment culture was disadvantageous in PPV, turn-around time, and cost. So, what we performed is not considered as a common method of diagnosis of C. difficile-associated diarrhea.
Selective oxidation of olefins has been carried out in water medium with tert-butylhydroperoxide (TBHP, 70% aqueous) as an oxidant using polymer-anchored Ni(II) complex as a catalyst. Several parameters were varied to optimize the reaction conditions. Under the optimized reaction conditions olefins gave selectively allylic oxidation products. The present polymer anchored Ni(II) complex can be recycled five times without any appreciable loss in catalytic activity.
When ingredients of Kimchi were mixed and stored in $18^{\circ}C$, lactic acid bacteria, such as Leuconostoc mesenteroides and Lactobacillus plantarum, were selectively grown up. Herefore, to understand why lactic acid bacteria were selectively cultured in Kimchi, antibacterial activities of Kimchi ingredients against some pathogens and Kinlchi lactic acid bacteria were investigated. Kimchi mixed with all ingredients significantly inhibited the growth of all tested pathogens: S. typhimurium, S. sonnei, and E. coli. Kimchi without green onion, garlic or ginger inhibited the growth of S. typhimurium, but did not E. coli and S. sonnei. However, Kimchi without red pepper powder did not inhibit the growth of all tested pathogens. All ingredients of Kimchi did not inhibit the growth of L. plantarum and L. mesenteroides. These results suggest that Kimchi ingredients can synergistically inhibit the growth of pathogens and Kimchi may be a selective medium for lactic acid bacteria.
Park, Gyu-Nam;Kim, Hye-Ran;An, Dong-Jun;Chae, Hee-Sun;Chang, Kyung-Soo
Biomedical Science Letters
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v.23
no.2
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pp.64-72
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2017
The formation of brown colonies due to phenol oxidase activity on classic agar media containing natural material extracts of Helianthus annuus or on medium containing L-3,4-dihydroxyphenylalanine has been used to identify Cryptococcus species complex. In this study, various natural materials were used to develop a modified medium and to identify five major serotypes of Cryptococcus species complex. Serotypes A, D, and A/D were pigmented on medium using Perilla frutescens var. japonica Hara (PerJ agar) after a three-day incubation. Serotypes B and C were pigmented on PerJ agar after four- and five-day incubations, respectively. Growth time and pigmentation of the five serotypes occurred more rapidly on PerJ agar than on the other media. In addition, colony morphology, size, and pigmentation were specific by serotype. In conclusion, PerJ agar should be used in clinic settings to identify Cryptococcus species complex and its serotypes rapidly.
Human Erythropoietin (EPO) gene is cloned in quail fibrosarcoma cell, QT35. Because molecular weight of EPO is similar to that of serum albumin, cell culture with serum containing medium makes purification of EPO very difficult. Using fractional factorial study, we have developed serum free medium for the recombinant QT35 cell lines, QT N4D4 and QT SY-IMP, which have cloned EPO with glutamine synthetase (GS) gene amplification system and with puromycin selective marker, respectively. Among the seven frequently used medium components, fibronectin, BSA, and EGF were the most important for EPO production. However, sufficient fibronectin supplement to the medium did not make any good attachment of QT35 to culture plate over 3 days. Therefore, to maximize EPO production, we attempted a medium-shift at confluence from serum containing medium to serum free medium(QT SFM6). Using the medium-shift protocol with QT SFM6, nearly the same productivity of EPO was achieved comparing with that without medium-shift. This result was true in both QT35 cell lines in three types of culture, i.e. T flask, microcarrier and roller bottle cultures.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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