A sisomicin-producing strain, Micromonospora inyoensis, was treated with various mutagens. The optimal death rates to obtain the high-producers of sisomicin were 90% for ultraviolet light, 99% for nitrosoguanidine, and 99.3% for nitrous acid, respectively. In place of the method of liquid culture, an agar plug method, which is easy and convenient, was used to measure the antibiotic-producing abilities of the strains isolated from mutagen-treated cells. On the other hand, as the selection method of overproducing mutants after mutagenesis, gradient agar plates which included various antibiotics and salts were used. Among the antibiotics and salts tested, gentamicin and kanamycin as antibiotics, and CuCl$_2$ and HgCl$_2$ as salts, were effective to select the high-producers of sisomicin.
High producers or blocked mutants of aminoglycoside antibiotic-producing Streptomyces spp. were selected by application of an agar plug method and by culturing individual colonies in broth. The productivities of aminoglycoside antibiotic producing organisms were increased by selection of a high producer from colonies obtained by spreading spores of wild strain, or survived from treatment of a mutagen or from the colonies regenerated from protoplast-formation and cell-wall regenerations. Some mutagen treated colonies lost the ability to produce antibiotics (5-8%). Some A-factor negative and deostreptamine or streptidine negative mutants were obtained by N-methyl-N'-nitro-N-nitrosomethylguanidine (MNNG) treatment. Many of the survivors from the MNNG treatment lost the ability to produce antibiotics. Major colonies produced less amount of antibiotics ; only few survived colonies produced more antibiotics than the parent. Resistance of Streptomyces spp. against the antibiotics produced by itself was also markedly affected by mutagen treatment.
An improved method for the selection of high tobramycin-producing mutants of Streptomyces tenebrarius ATCC 17920 was investigated. By the use of apramycin-containing media, low nebramycin-producing mutants were eliminated. Strain No. 23, resistant to apramycin and kanamycin B and sensitive to tobramycin, was isolated from soils, identified as Pseudomonas paucimobilis and used as a test organism for overlaying the mutants on agar plate. While inhibition zones were not shown when the parent strains were overlaid with soft agar containing the strain No. 23, clear zones were shown when high tobramycin-producing mutants were overlaid. Using this screening strategy, 58 mutants showing clear zones had been isolated. antibiotic activities of which were incresed to 3~8 fold compared to that of parent strain.
Effects of the inoculum size of testing organism and pH of the plate and the concentration of agar were investigated for the selection of high kasugamycin producing mutants of Streptomyces kasugaensis ATCC 15114. For the detection of high kasugamycin-producing mutants, both concentrations of agar and test organism were optimized at the concentrations of 2% and 0.35 (A$_{550}$), respectively. The pH 7 was optimum for both growing the testing organism, Pseudomonas fluorescens IFO 12180, and for obtaining more promising mutant strains of S. kasugaensis. Under these conditions, mutants had been isolated which, tested later in liquid cultures, gave higher kasugamycin yields than that of the parent strain.
A high-throughput screening strategy was developed to simplify the selection process for improved mannitol producing strain after chemical mutagenesis. Ethylmethyl sulfonate (EMS) was used as a chemical mutagen to alter the fructokinase-I gene which is an essential enzyme to metabolize fructose for growth. Leuconostoc mesenteroides treated with EMS were plated on the modified MRS solid medium containing fructose as a sole carbon source. Strains showing inhibited growth were primarily selected to evaluate the mannitol producing ability. By applying this strategy, L. mesenteroides ATCC 8293 M1, L. mesenteroides ATCC 9135 M3 and L. mesenteroides D1 M3 showed improvement in mannitol production.
The study was carried out to investigate for the property of Bacillus strains, on the native growthed microflora in Korean native soybean paste, and Bacillus strains of the high enzyme producing, were selected and identificated, from the microflora, that is, identificated Bacillus strains beared resemblance to B. subtills, on the colony, appearance was pellicle, surface's spreading, color creamy-thin browned, colony elevation flated, and edge lobated, the identfficated B. subtills strain named for the B. subtilis SCF. For the protease activity of B. subtilis SCF, according to the variation with pH, the pH stability was pH 7~8, and on the its protease activity, optimum temperature was 40$\circ$C, on the other hand, temperature of the highest stability of the protease was 50$\circ$C.
Jun Ren;Junhao Shen;Thi Duc Thai;Min-gyun Kim;Seung Ho Lee;Wonseop Lim;Dokyun Na
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.33
no.7
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pp.973-979
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2023
Lycopene is a carotenoid widely used as a food and feed supplement due to its antioxidant, anti-inflammatory, and anti-cancer functions. Various metabolic engineering strategies have been implemented for high lycopene production in Escherichia coli, and for this purpose it was essential to select and develop an E. coli strain with the highest potency. In this study, we evaluated 16 E. coli strains to determine the best lycopene production host by introducing a lycopene biosynthetic pathway (crtE, crtB, and crtI genes cloned from Deinococcus wulumuqiensis R12 and dxs, dxr, ispA, and idi genes cloned from E. coli). The 16 lycopene strain titers diverged from 0 to 0.141 g/l, with MG1655 demonstrating the highest titer (0.141 g/l), while the SURE and W strains expressed the lowest (0 g/l) in an LB medium. When a 2 × YTg medium replaced the MG1655 culture medium, the titer further escalated to 1.595 g/l. These results substantiate that strain selection is vital in metabolic engineering, and further, that MG1655 is a potent host for producing lycopene and other carotenoids with the same lycopene biosynthetic pathway.
In this study, to select suitable shiitake strains in Jangheung region for domestic strains of Lentinula edodes for log cultivation, a total of five different Korean strains(Chunbaegko, Sanjo 303ho, Poongnyunko, Baekhwahyang, Soohyangko) and two Japanese strains (Mori 290, Moriyujiro) were selected and a cultivation test was conducted to select suitable strains. As a result of the yield, Sanjo 303ho produced 40.9 kg, which was superior to 39.2 kg for Mori 290 and 37.7 kg for Moriyujiro. As for the quality characteristics, it was confirmed that Baekhwahyang had a hemispherical shape, and high quality fruit bodies. In conclusion, Sanjo 303ho, which has excellent production, and Baekhwahyang, which is advantageous for producing high-quality shiitake, were selected in Jangheung region for domestic strains.
Berthold, David Erwin;Rosa, Nina de la;Engene, Niclas;Jayachandran, Krish;Gantar, Miroslav;Laughinghouse, Haywood Dail IV;Shetty, Kateel G.
ALGAE
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v.35
no.1
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pp.91-106
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2020
Incorporating renewable fuel into practice, especially from algae, is a promising approach in reducing fossil fuel dependency. Algae are an exceptional feedstock since they produce abundant biomass and oils in short timeframes. Algae also produce high-valued lipid products suitable for human nutrition and supplement. Achieving goals of producing algae fuels and high-valued lipids at competitive prices involves further improvement of technology, especially better control over cultivation. Manipulating microalgae cultivation conditions to prevent contamination is essential in addition to promoting optimal growth and lipid yields. Contamination of algal cultures is a major impediment to algae cultivation that can however be mitigated by choosing extremophile microalgae. This work describes the isolation of alkali-tolerant / alkaliphilic microalgae native to South Florida with ideal characteristics for cultivation. For that purpose, water samples from Lake Okeechobee were inoculated into Zarrouk's medium (pH 9-12) and incubated for 35 days. Selection resulted in isolation of three strains that were screened for biomass and lipid accumulation. Two alkali-tolerant algae Chloroidium sp. 154-1 and Chlorella sp. 154-2 were poor lipid accumulators. One of the isolates, the diatom Fistulifera sp. 154-3, was identified as a lipid accumulating, alkaliphilic organism capable of producing 0.233 g L-1 d-1 dry biomass and a lipid content of 20-30% dry weight. Lipid analysis indicated the most abundant fatty acid within Fistulifera sp. was palmitoleic acid (52%), or omega-7, followed by palmitic acid (17%), and then eicosapentanoic acid (15%). 18S rRNA phylogenetic analysis formed a well-supported clade with Fistulifera species.
Leuconostoc mesenteroides, the major bacterium in the initial phase of lactate-fermentation in kimchi, produces lactic acid, acetic acid, mannitol, and $CO_2$. It also secrets dextransucrase, which catalyzes the transfer reaction of glucose from sucrose to maltose, synthesizing mainly panose ($6^_2-{\alpha}-D-glucopyranosylmaltose)$, a probiotic oligosaccharide. To use the strain as a starer culture to produce high amount of panose during kimchi fermentation, we screened psychrotrophic strains showing fast growth rate at low temperature among the isolates of Leuconostoc sp. and selected two strains showing high dextransucrase activity. The strains were identified as Leuconostoc mesenteroides, which can be used as function added-starters for lactate-fermented foods.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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