Selection of High Tobramycin-Producing Mutants

Tobramycin 고생산성 변이주의 분리

An improved method for the selection of high tobramycin-producing mutants of Streptomyces tenebrarius ATCC 17920 was investigated. By the use of apramycin-containing media, low nebramycin-producing mutants were eliminated. Strain No. 23, resistant to apramycin and kanamycin B and sensitive to tobramycin, was isolated from soils, identified as Pseudomonas paucimobilis and used as a test organism for overlaying the mutants on agar plate. While inhibition zones were not shown when the parent strains were overlaid with soft agar containing the strain No. 23, clear zones were shown when high tobramycin-producing mutants were overlaid. Using this screening strategy, 58 mutants showing clear zones had been isolated. antibiotic activities of which were incresed to 3~8 fold compared to that of parent strain.

Tobramycin 고생산성 변이주를 쉽고 신속하게 선별하 수 있는 screening 방법을 개발하였다. 고농도의 apramycin이 포함된 배지를 사용함으로서 nebramycin 생산성이 낮은 변이주들은 1차적으로 제거할 수 있었다. 모균주인 S. tenerbarius ATCC 17920에는 저지환을 나타내지 못하고 생산성이 향상된 변이주의 경우에만 저지환을 형성하는 strain No.23을 토양으로부터 분리하여 Ps. paucimobilis로 동정하였고 1차 선별된 변이주들 중 tobramycin 생산성이 높은 균주들을 선별하기 위한 피검균으로 사용하였다. 이러한 screening 전략으로 strain No.23에 명확히 저지환을 나타내는 변이주 58주를 얻었고, HPLC를 이용하여 각 변이주의 tobramycin 생산성을 비교 측정한 결과 모균주에 비해 3-8배 생산성이 향상되었음을 확인하였다.