Inducing genetic and morphological variation through conventional method is very difficult. Therefore, mutation induction through in vitro technology brings numerous advantages over the conventional breeding. Thus, the individual shoots (1 ~ 2 cm) were irradiated with gamma rays (10 ~ 70 Gy). The result revealed that the explants treated with higher doses (40, 50, 60, and 70 Gy) showed deleterious effects of ionizing radiation. The highest survival rate among ${\gamma}$ treated explants recorded was 71% in 10 Gy treatments while the lowest survivality was 15% in 70 Gy. Lethal dose 50% ($LD_{50}$) dose was found to be 33 Gy. In the in vitro condition, rooting reponse showed that increase in gamma irradiation dose resulted in the inhibition of root growth. Meanwhile, non-treated explants had the best rooting ability with the maximum number of root per explant (20) within a short period of time (6 days), with the highest root length of (15.1 cm). The longer period in rooting (12 days) and lowest number of root per explant (8) with shortest root length (10.1 cm) were recorded at 30 Gy treatment. The highest shoot length (13.6 cm) was observed at control treatment and the shortest shoot length (10.4 cm) was observed at 30 Gy. In the nursery, lowest leaf number (5) was observed at 30 Gy compared with other treatments. The highest chlorophyll content (49.8) was recorded at 10 Gy treated seedling. Irradiated explants with 10 Gy found to be superior over the control treatment and had positive effects in main growth parameters such as chlorophyll content.
Robinson, George R.;Handel, Steven-N.l;Mattei, Jennifer
The Korean Journal of Ecology
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제25권1호
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pp.1-7
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2002
The ecological background of a restoration project is complex and difficult to betermine without experimentation. A useful context for experiments is the well-studied process of natural succession, because the factors that drive or inhibit succession are also at work during reclamation (a form of primary succession) and restoration (which often resembles secondary succession). Using experimental studies on urban wasteland reclamation, we have tested for factors that stimulate or inhibit succession during early phases of woodland development in the Northeastern United states. The emphasis has been on mutualisms (seed dispersal, pollination, and mycorrhizae) and microsite limitations in the recruitment, growth, and reproduction of woody plants. Using plantings of seeds, seedlings, and clusters of reproductively mature plants on abandoned landfills, we have observed that (1) soil microsite deficiencies lead to very poor germination (<0.1$\%$) and seedling survival (<0.01$\%$) of most native species; (2) seed dispersal by birds is a significant and reliable source of woody plant recruitment; however (3) proximity effects are strong, with most (up to 95$\%$) of seed rain falling in the vicinity of planted clusters that are closest to putative seed sources; and (4) remnant natural woodlands are critical components of the recruitment process. To emphasize the last point, in one case, we found that the destruction of approximately 50$\%$ of nearby natural woodland vegetation led to a commensurate decline in seed rain. In another case, we found that the species richness of recruits was strictly limited by the species composition of nearby source plant communities, with no evidence of community enrichment by long distance dispersal over 5 years. We conclude from these results that the size and proximity of remnant natural populations are critical considerations when planning reclamation and restoration programs that rely on natural successional processes.
Development of efficient plant regeneration and genetic transformation protocols (using the Particle Inflow micro-projectile Gun and the shoot-tips as target tissue) of Sorghum bicolor (L.) Moench in terms of expression of the reporter gene, $\beta$-glucuronidase(uidA) is reported here. Two Indian cultivars of sorghum were used in the study, viz. M-35-1 and CSV-15. Plant regeneration was achieved from one-week-old seedling shoot-tip explants via multiple-shoot-clumps and also somatic embryos. The multiple-shoot-clumps were produced on MS medium containing BA (0.5, 1.0 or 2.0 mg/$L^{-1}$), with biweekly subculture. Somatic embryos were directly produced on the enlarged dome shaped expansive structures that developed from shoot-tip explants (without any callus formation) when cultured on MS medium supplemented both with BA (0.5, 1.0 or 2.0 mg/$L^{-1}$) and 2,4-D (0.5 mg/$L^{-1}$). Whereas each multiple-shoot-clump was capable of regenerating more than 80 shoots via an intensive differentiation of both axillary and adventitious shoot buds, the somatic embryos were capable of 90% germination, plant conversion and regeneration. The regenerated shoots could be efficiently rooted on MS medium containing 1.0mg/$L^{-1}$ IBA and successfully transplanted to the glasshouse and grown to maturity with a survival rate of 92%. The plant regeneration efficiency of both the genotypes were similar. After the micro-projectile bombardment, expression of uidA gene was determined by scoring blue transformed cell sectors in the bombarded tissue by an in situ enzyme assay. The optimal conditions comprising a helium pressure of 2200 K Pa, the target distance of 11 cm with helium inlet fully opened and the use of osmoticum have been defined to aid our future strategies of genetic engineering in sorghum with genes for tolerance to biotic and abiotic stresses.
백두산에 자생하는 홍경천의 종자를 기내에서 발아시켜 잎 절편으로부터 캘러스를 유도 할 수 있었으며, 식물생장조절제의 처리로 기관분화도 시킬 수 있었다. 토양순화는 약 8주후면 멸균되지 않은 토양에서도 홍경천의 뿌리활착이 활발함을 알 수 있었다. 캘러스의 유도율은 Kinetin 1 mg/L와 NAA 2 mg/L를 첨가한 배지에서 가장 높은 $98\%$의 캘러스 형성률을 보였다. 캘러스에서 부정아의 유도는 BA가 1 mg/L 첨가된 MS배지에서 $96.6\%$의 높은 부정아형성률을 보였으며 뿌리와 신초의 신장은 옥신은 첨가되지 않은 배지에서 다량으로 유도됨을 관찰할 수 있었다. 토양순화는 $100\%$ 성공적 이었다.
참가자미의 종묘생산을 위한 생물학적 기초자료를 얻기 위하여 난발생에 미치는 수온과 염분의 영향을 조사하였다. 수정란의 정상적인 부화는 9-$15^\circC$에서 가능하였으며 생존율은 $12^\circC$에서 가장 높게 나타났다. 난발생의 각 단계에 이르기까지의 수온 (T : \circC$)에 따른 발생속도 (t : hour)는 수온이 높을수록 빨랐으며, 그 관계식은 다음과 같았다. 8세포기 1/t=0.0284T-0.0554 (r=0.9999) 상실기 : 1/t=0.0137T-0.0527 (r=0.9998) Kupffer씨포 출현기 : 1/t=0.0035T-0.0133 (r=0.9762) 부화자어기 : 1/t=0.0012T-0.0007 (r=0.9981) 참가자미의 난발생이 개시되는 생물학적 영도는 평균 $2.6^\circC$로 나타났다. 설정 수온별로 수정에서 부화에 이르기까지의 평균 소요시간은 $9^\circC$에서 95.5시간, 12$12^\circC$에서 72.5시간 및 $15^\circC$에서 56.0시간이었다. 염분별 부화까지의 생존율은 35-$38\textperthousand$에서 높게 나타났다.
Rahman, Afroja;Meng, Loth;Han, Si Ho;Seo, Gi Chun;Jung, Mun Ho;Park, Byung Bae
농업과학연구
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제45권2호
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pp.143-153
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2018
Soil characteristics along with various container lengths have an important role in the early survival rate and growth of seedlings by influencing the seedling quality. This experiment was conducted to investigate the effect of container length and different soil mixtures on the growth of poplar in a greenhouse. Two types of soil, homogeneous vs. heterogeneous, were used along with two container lengths (30 vs. 60 cm). The heterogeneous soil was made by dividing 50% vermiculite from a mixture of 25% vermicompost and 25% nursery soil in volume. For the homogeneous soil, the above three soil types were mixed together. Populus euramericana clone cuttings were planted in late April, and then, the growth height, root collar diameter (RCD) and biomass were measured in August. The height of the poplar was not significantly affected by container length and soil type, but the RCD was significantly affected by soil type. Leaf and root biomass was higher at the long container than at the short container for both soil treatments, but stem biomass was lower at the heterogeneous soil than at the homogeneous soil treatment. Root to shoot biomass ratio was higher at the heterogeneous soil treatment than at the homogeneous soil treatment by 12%. In conclusion, heterogeneous soil along with a long container is suitable to increase the carbon allocation into the root.
기내배양을 이용하여 Pteris cretica 'Wilsonii'의 효율적인 대량번식법을 개발하기 위한 목적으로 근경, 엽신 및 엽병조직으로부터 식물체 재분화를 유도하였다. 그 결과, 균질화된 근경의 절편에서만 신초가 재생되었다. 식물체 재분화를 유도하는데 적합한 배지는 1%의 sucrose와 $50\;mg{\cdot}mL^{-1}$의 $NaH_2PO_4$를 첨가한 1/8MS배지였다. 근경 절편으로부터 식물체의 재생을 촉진하기 위하여 생장조절물질이 첨가된 배지에서 2달 동안 절편을 배양한 후, 생장조절물질을 첨가하지 않은 배지로 이식한 결과, $1{\mu}M$의 kinetin과 $5{\mu}M$의 NAA를 혼용첨가한 처리구에서 신초의 재생이 가장 왕성하였다. BA 첨가구에서는 분열조직의 일종인 GGB가 다량 유도되었으나, 형성된 GGB에서 신초 재생율은 낮은 것으로 나타났다. MS배지의 적정 무기물 및 비타민의 농도를 구명하는 실험을 마친 뒤, 형성된 유묘를 이용하여 기외순화 시킨 결과, 1/8MS배지에서 형성된 유묘가 생존율이 가장 높았으며, 생육 또한 왕성하였다.
Four-leaf white clover is not found easily in nature due to its low appearance rate (1 in 10,000). Because people believe that it brings good luck and like to either keep it or present it to a loved one, it has commercial and ornamental value. To breed four-leaf clover, we exposed its flowers to ${\gamma}-rays$ at the pollination stage. The $M_1$ seeds produced following doses at 25-100 Gy showed an approximately 74% germination rate, with seedling survival at 46%. In the $M_1$ generation of plants irradiated within that dose range, we found an increased frequency of four leaflets. One of them, Jeju Lucky-1 (JL-1), had a frequency of about 60%. To see whether that mutation was somaclonal or genetic, we observed its $M_2$ generation and found that such a phenotype reappeared. Although our results demonstrated that the irradiation of fully mature flowers led to a higher frequency of 4-leaflets, we could not clearly explain the genetic mechanism involved. We suggest that JL-1 is valuable as a new variety, without further genetic fixation, because white clover can be propagated vegetatively by stolons.
This study was aimed to select useful mutants of rapeseed (Brassica napus L.) and leaf mustard (Brassica juncea L.), the seeds of three lines S-14, S-27, and S-28 were treated with gamma-ray and EMS. The optimum ranges of gamma-ray dose and EMS concentration to enlarge the characteristic morphological variations were also separately investigated. The survival rates of S-28 only linearly decreased with increasing the gamma-ray dose. The overall growth parameters decreased of gamma-ray dose in all three lines of S-14, S-27, and S-28. The reduction dosage 50 of gamma-ray was identified as 1,200 Gy for S-14 leaf mustard, while those of S-27 and S-28 rapeseed lines were appeared as same 1,000 Gy. The emergence rates of S-14 and S-27 showed no significant differences by EMS treatment, while the growth of all three lines were significantly decreased. The reduction concentration 50 in S-14 could not be determined, demonstrating that this leaf mustard line is presumably insensitive to mutagenic EMS, while those in S-27 and S-28 were identified as 3.0 and 2.5%, respectively, showing that these rapeseed lines possess higher sensitivity to EMS than S-14. Various morphological characteristics of $M_1$ generation obtained from mutagen treatment were elaborately investigated for further maintenance of $M_2$ generation. In $M_2$ generation variants showing short stem, yellow color in seed coat, chlorophyll deficiencies in leaf or pod, abnormal flower color were selected as potentially useful mutants for breeding.
This study describes the successful establishment of a cryopreservation protocol for Citrus limon cultivars: 'Frost Eureka limon' and 'Cook Eureka limon', using a droplet-vitrification method. The shoot tips that were excised from in vitro grown seedlings of the two cultivars were preserved in liquid nitrogen (LN) and successfully regenerated into whole plants. Excised shoot tips were pre-cultured for 1 or 2 days in 0.3 M and 0.5 M sucrose solutions at $25^{\circ}C$ and incubated in a loading solution (LS) composed of 17.5% glycerol + 17.5% sucrose in Murashige and Skoog (MS) medium for 40 min at $25^{\circ}C$. Prior to direct immersion in LN for 1 h, the shoot tips were dehydrated with plant vitrification solution 2 (PVS2) at $0^{\circ}C$ or PVS3 at $25^{\circ}C$. The frozen shoot tips were re-warmed and unloaded with 1.2 M sucrose in $\text\tiny{^1/_2}$ MS for 30 min at $25^{\circ}C$. Shoot tips were post-cultured overnight on survival medium and then micrografted onto 'trifoliate orange' (Poncirus trifoliate (L.) Raf. seedling rootstocks for recovery and to produce whole plants. The highest regrowth rates were 53.5% and 50.3% for cryopreserved shoot tips of 'Frost Eureka limon' and 'Cook Eureka limon', respectively, when pre-cultured in 0.3 M and 0.5 M sucrose concentrations in a sequencing manner, with LS and treated with PVS2 for 60 min at $0^{\circ}C$. We also investigated whether the ammonium ion concentration on post-culture medium affected the viability of the cryopreserved Citrus shoot tips. The viability of cooled samples, following culturing on woody plant media (WPM) containing $\text\tiny{^1/_4}$ ammonium nitrate overnight before micrografting, was the highest (70.3%) in 'Frost Eureka limon'. The study described here is a cost-effective and safe method to conserve Citrus fruit cultivars, for the improvement and large-scale multiplication of fruit plants and for breeding disease resistance.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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