• Biomolecules & Therapeutics
• /
• 제27권6호
• /
• pp.530-539
• /
• 2019

Brain aging is an inevitable process characterized by structural and functional changes and is a major risk factor for neurodegenerative diseases. Most brain aging studies are focused on neurons and less on astrocytes which are the most abundant cells in the brain known to be in charge of various functions including the maintenance of brain physical formation, ion homeostasis, and secretion of various extracellular matrix proteins. Altered mitochondrial dynamics, defective mitophagy or mitochondrial damages are causative factors of mitochondrial dysfunction, which is linked to age-related disorders. Etoposide is an anti-cancer reagent which can induce DNA stress and cellular senescence of cancer cell lines. In this study, we investigated whether etoposide induces senescence and functional alterations in cultured rat astrocytes. Senescence-associated ${\beta}$-galactosidase (SA-${\beta}$-gal) activity was used as a cellular senescence marker. The results indicated that etoposide-treated astrocytes showed cellular senescence phenotypes including increased SA-${\beta}$-gal-positive cells number, increased nuclear size and increased senescence-associated secretory phenotypes (SASP) such as IL-6. We also observed a decreased expression of cell cycle markers, including PhosphoHistone H3/Histone H3 and CDK2, and dysregulation of cellular functions based on wound-healing, neuronal protection, and phagocytosis assays. Finally, mitochondrial dysfunction was noted through the determination of mitochondrial membrane potential using tetramethylrhodamine methyl ester (TMRM) and the measurement of mitochondrial oxygen consumption rate (OCR). These data suggest that etoposide can induce cellular senescence and mitochondrial dysfunction in astrocytes which may have implications in brain aging and neurodegenerative conditions.

• Tuberculosis and Respiratory Diseases
• /
• 제53권2호
• /
• pp.127-135
• /
• 2002

배 경 :특발성 간질성 폐렴은 만성적 염증과 폐 섬유화가 특징적인 병이다. clara cell 10 kD protein(CC10)은 기관지 상피세포에서 만들어지는 강력한 항염 작용을 가진 것으로 알려진 단백질이다. 따라서, CC-10은 특발성 간질성 폐렴 환자의 염증 조절자로서의 역할을 기대할 수 있다. 본 연구에서는 폐 섬유화의 정도와 기관지 폐포 세척액 내의 CC-10 발현 사이의 연관성을 알아 보고자 하였다. 방 법 : 29명의 환자와 10명의 대조군에서 기관지 폐포 세척이 시행되었으며, 세척액을 이용하여, 정량적 Western blot 분석을 시행하였다. 각각의 band의 RI (relative intensity)를 산출하여, 환자의 진단, 기관지 폐포 세척액 내의 염증 세포 분율, 방사선학적 폐 섬유화의 정도와 비교하였다. 결과 : 환자군 ($77.5{\pm}75.8%$)과 대조군 ($70.7{\pm}39.8%$)의 RI 값에는 유의한 차이가 없었다 (p>0.05). 그리고, 통상형 간질성 폐렴 환자의 폐섬유화의 정도 및 기관지 폐포 세척 액 내의 염증 세포 분율에 따라서도 RI 값에 유의한 차이가 없었다 (p>0.05). 결 론: 통상형 간질성 폐렴 환자의 폐 섬유화 정도와 기관지 폐포 세척 액내의 CC-10 농도는 관련이 없다.

• Applied Microscopy
• /
• 제23권1호
• /
• pp.1-14
• /
• 1993

본 연구는 세포질 액포의 수와 기능적으로 상호작용하는 정단세포막(丁端細胞膜)의 역동적(力動的) 변화로 인한 세포수송의 조절과 세포막의 재순환(再循環) 과정의 증거를 분석(分析)하였다. 주사전자현미경(走査電子顯微鏡) 관찰에 의하면 Turtle bladder 점막(粘膜)에는 다음 세 증류의 주요세포가 있다. 과립성세포(顆粒性細胞)는 방광점막(膀胱粘膜) 세포의 대다수를 차지하는 것으로서 총 세포수의 80%에 해당하며, 나머지 20%의 세포는 탄산탈수효소가 풍부한 A 및 B형으로 분류되는 상피세포(上皮細胞)가 특징이다. 탄산탈수효소가 풍부한 두 종류의 세포내의 관상액포(管狀液胞)나 대부분의 액포에서 horseradish peroxidase의 흡수를 조사한 결과, 세포막부분이 정단세포질(丁端細胞質) 액포에 내화(內化)되어 있었다. 마치 탄산탈수효소를 함유한 세포가 세포내(細胞內) 액포(液胞)를 소유하고 있는것 같으며 이 세포내 액포는 정단세포막으로 재순환(再循環)하는 proton 펌프를 지니는 것으로 생각된다. Turtle bladder에서 과립상세포는 두렷한 세포외분필(細胞外分泌) 기작에 의하여 다량의 mucin과 기타 단백질을 능동적으로 분비하는 constitutive pathway로서 믿어지며. 조절된 분비경로를 통해 방광상피세포(膀胱上皮細胞)가 mucin을 분비하는 가능성에 대해서는 엄밀하게 규명되어있지 않으므로 이러한 vesicular transport 상당부분이 미결상태로 남아있다.

• 대한의생명과학회지
• /
• 제5권1호
• /
• pp.85-93
• /
• 1999

마우스 간 세포주인 BNL CL.2의 시험관내 배양에서 혈청과 IFN-$\gamma$가 세포주의 nitric oxide (NO)생성과 세포 손상에 미치는 영향을 알아보기 위한 실험을 하였다. 혈청이 공급된 배양에서 IFN-$\gamma$에 의한 세포 생존율은 거의 변동이 없었으나, 혈청을 제거한 배양에서는 약 65%의 생존율이 유지되었으며, NO생성 억제제인 N$^{G}$-monomethy-L-arginine (NMA)의 첨가는 농도 의존적으로 세포의 생존율을 감소시켰다. 혈청이 제거된 BNL CL.2 세포주는 IFN-$\gamma$ 단독 처리에서도 NO를 생성할수 있었으며, IFN-$\gamma$와 lipopolysaccharide (LPS)의 복합 처리는 세포주의 NO 생성을 상승적으로 증가시 켰다. 또한 protein tyrosine kinase (PTK) inhibitor인 herbimycin A와 genistein에 의해서 NO 생성이 억제되어 PTK의 활성이 혈청이 고갈된 BNL CL.2세포에서 NO의 생성에 중요한 역할을 담당하고 있기 때문으로 판단된다. IFN-$\gamma$의 독성은 혈청을 제거시킬 때 NO 생성 억제제에 상승적으로 간세포를 손상시키며, 이때 NO가 IFN-$\gamma$에 의해 유도된 손상을 어느 정도 억제시키는 것을 알 수 있었다.

• The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
• /
• 제9권1호
• /
• pp.45-53
• /
• 2005

The present study was designed to examine the effect of d-amphetamine on CA release from the isolated perfused model of the rat adrenal gland, and to establish its mechanism of action. Damphetamine $(10{\sim}100{\mu}M$), when perfused into an adrenal vein of the rat adrenal gland for 60 min, enhanced the CA secretory responses evoked by ACh ($5.32{\times}10^{-3}$ M), excess $K^+$ ($5.6{\times}10^{-2}$ M, a membrane depolarizer), DMPP ($10^{-4}$ M, a selective neuronal nicotinic $N_n-receptor$ agonist) and McN-A-343 ($10^{-4}$ M, a selective $M_1-muscarinic$ agonist) only for the first period (4 min), although it alone has weak effect on CA secretion. Moreover, d-amphetamine ($30{\mu}M$) in to an adrenal vein for 60 min also augmented the CA release evoked by BAY-K-8644, an activator of the dihydropyridine L-type $Ca^{2+}$ channels, and cyclopiazonic acid, an inhibitor of cytoplasmic $Ca^{2+}$ ATPase only for the first period (4 min). However, in the presence of high concentration ($500{\mu}M$), d-amphetamine rather inhibited the CA secretory responses evoked by the above all of secretagogues. Collectively, these experimental results suggest that d-amphetamine at low concentrations enhances the CA secretion from the rat adrenal medulla evoked by cholinergic stimulation (both nicotininc and muscarinic receptors) as well as by membrane depolarization, but at high concentration it rather inhibits them. It seems that d-amphetamine has dual effects as both agonist and antagonist at nicotinic receptors of the isolated perfused rat adrenal medulla, which might be dependent on the concentration. It is also thought that these actions of d-amphetamine are probably relevant to the $Ca^{2+}$ mobilization through the dihydropyridine L-type $Ca^{2+}$ cha$N_n$els located on the rat adrenomedullary chromaffin cell membrane and the release of $Ca^{2+}$ from the cytoplasmic store.

• Applied Microscopy
• /
• 제29권1호
• /
• pp.57-66
• /
• 1999

한국산 플라나리아 뇌신경절을 실험에 사용할 수 있도록 적당한 크기로 적출하여 부위별로 잘라낸 후 2.5% paraformaldehyde-3% glutaraldehyde로 1시간 30분 전고정을 하고 이러서 $OsO_4$로 2시간 후 고정을 한 다음 전자현미경 관찰방법에 따라 실험한 후 다음과 같은 결론을 얻었다. 뇌신경절을 구성하고 있는 세포는 신경세포와 신경분비세포, 신경아교세포 그리고 신경섬유들로 이루어진 신경망 등이었다. 신경세포는 직경이 $5{\mu}m$ 정도인 원형 또는 타원형의 작은 세포로서, 핵은 타원형체로 세포질에 비해 크고 이질염색질이 고르게 발달해 있었으나, 세포질은 세포 소기관의 발달이 미진하여 비교적 단순하게 보였다. 신경분비세포는 그 모양이 긴 타원형이거나 방추형세포로서 타원형의 큰 핵을 소지하였다. 또한 이들의 세포질속에는 직경 60nm 정도의 분비성과립들로 가득차 있었다. 신경아교세포는 매우 드물게 나타나는 방추형의 세포로서 (크기, $6\times0.8{\mu}m$) 이들은 신경섬유 사이에서 주로 관찰되었다. 신경망을 구성하고 있는 신경섬유와 신경종말 속에는 사립체와 신경소관 그리고 4종류의 분비성소포(직경, 75nm, 50nm, 그리고 37nm 정도의 전자밀도가 높은 과립소포 3종과 30nm 크기의 전자밀도가 낮은 투명과 립소포 1종) 등이 존재하였는데, 이들은 단일소포 형태와 혼합소포형태로 존재하였다. 또한 이들의 신경연접 형태는 축삭-수상돌기연접과 축삭-축삭돌기연접 등의 신경 연합만이 주로 관찰되는 특징을 보였다.

• 한국수산과학회지
• /
• 제32권5호
• /
• pp.642-648
• /
• 1999

감성돔, Acanthopagrus schlegeli의 소화관은 식도, 위, 장, 항문 그리고 위의 유문부 말단에서 유래한 4$\~$5개의 맹낭 형태인 유문수로 이루어져 있었다 어체 체장에 대한 식도에서 항문까지의 소화관 길이의 비 (RLG: relative length of gut)는 1.04(n=10)였다. 소화관의 조직층은 장막, 근육층, 점막하층, 점막층으로 구성되는데, 점막하층의 발달은 전체적으로 매우 미약했다. 식도 점막주름의 형태는 규칙적인 분지형이었으며, 점막근층은 아주 잘 발달되어 있었다. 점막상피층은 입방형 또는 원주형 상피세포와 점액분비세포로 구성되며, 상피세포의 자유면에서 미세융모의 관찰은 어렵다. 위점막주름의 형태는 규칙적인 미분지형이며, 위의 근육충과 점막근층은 잘 발달되어 있었다. 점막충의 표면상피에서는 미세융모가 관찰되며, 위선과 분비과립은 체부에서 가장 잘 발달되어 있었다 유문수와 장의 점막주름은 불규칙한 분지형이다 장은 점막주름의 길이와 조직학적인 특징에 의해 전장부, 중장부, 후장부의 구분이 가능하였다. 유문수와 장의 선조연과 배상세포는 후장부에서, 영양분흡수세포는 중장부에서 가장 발달된 양상을 보였다.

• 치위생과학회지
• /
• 제23권4호
• /
• pp.282-295
• /
• 2023

Background: Secretory leukocyte protease inhibitor (SLPI) protects tissues from proteases and promotes cell proliferation and healing. SLPI also reduces periodontal inflammation and alveolar bone resorption by inhibiting proinflammatory cytokine expression in rat periodontal tissues and osteoblasts. However, little is known of the role of SLPI in the expression of osteoclast regulatory factors from osteoblasts, which are crucial for the interaction between osteoblasts and osteoclasts. Therefore, we aimed to determine the effects of SLPI on the regulation of osteoclasts and osteoblasts in LPS-treated alveolar bone and osteoblasts. Methods: Periodontitis was induced in rats using LPS. After each LPS injection, SLPI was injected into the same area. Immunohistochemical analysis was performed with antibodies against SLPI, RANKL, OPG, and Runx2 in the periodontal tissue. RT-PCR and western blotting were performed to determine the expression levels of SLPI, RANKL, OPG, and Runx2 in LPS- and SLPI/LPS-treated MC3T3-E1 cells. SLPI/LPS-treated MC3T3-E1 cells were also stained with Alizarin Red S. Results: Immunohistochemical analysis showed that the expression levels of SLPI, OPG, and Runx2 were higher while that of RANKL was lower in the LPS/SLPI group relative to those in the LPS group. The mRNA and protein expression of SLPI, OPG, and Runx2 was higher in SLPI/LPS/MC3T3-E1 cells than in LPS/MC3T3-E1 cells, and RANKL expression was lower. During differentiation, OPG and Runx2 protein levels were higher whereas RANKL levels were lower in SLPI/LPS/MC3T3-E1 than in LPS/MC3T3-E1 cells on days 0, 4, 7, and 10. In addition, mineralization and matrix deposition were higher in SLPI/LPS/MC3T3-E1 than in LPS/MC3T3-E1 on days 7 and 10. SLPI decreased RANKL expression in LPS-treated alveolar bone and osteoblasts but increased the expression of OPG and Runx2. Conclusion: SLPI can be considered as a regulatory molecule that indirectly regulates osteoclast activation via osteoblasts and promotes osteoblast differentiation.

• International Journal of Oral Biology
• /
• 제33권3호
• /
• pp.105-111
• /
• 2008

Thrombospondins (TSP-1, TSP-2) are secretory extracellular glycoproteins that are involved in a variety of physiological processes such as tumor cell adhesion, invasion, and metastasis. The present study was undertaken to elucidate the involvement of thrombospondins in the adhesion of osteoblast-like cells using the TSP-1 or TSP-2 antisense MG63 and MC3T3-E1 cell lines. For downregulation of TSPs expression, we prepared antisense constructs for TSP-1 and TSP-2 using the pREP4 an episomal mammalian expression vector, which be able to produce the specific antisense oligonucleotides around chromosome. MG63 and MC3T3-E1 osteoblast-like cells were transfected with the antisense constructs and nonliposomal Fugene 6, and then selected under hygromycin B (50 ${\mu}g/ml$) treatment for 2 weeks. Western blot analysis revealed that expression of the TSP proteins was downregulated in the antisense cell lines. The cell adhesion assay showed that adhesive properties of TSP-1 and TSP-2 antisense MG63 cells on the polystyrene culture plate were reduced to 17% and 21% of the control cells, respectively, and those of the TSP-1 and TSP-2 antisense MC3T3-E1 cells also decreased to 19% and 27% of control, respectively. Adhesion of TSP-1 and TSP-2 antisense MC3T3-E1 cells on Type I collagen-coated culture plate decreased to 27% and 76%, respectively. These results indicate that TSP-1 and TSP-2 proteins may have an important role in adhesion of osteoblast-like cells to extracellular matrix.

• Parasites, Hosts and Diseases
• /
• 제35권4호
• /
• pp.259-264
• /
• 1997

폐흡충 감염시 일어나는 비만세포 (mastcell)의 반응이 감염경로에 따라 어떠한 영향을 미치는지 알아보고자 비호적숙주인 마우스에 폐흡충의 피낭유충 10개를 피하 또는 경구 감염시킨 후 감염 시기별로 진피 내에 동원되는 비만세포의 숫적 변동 및 탈과립률 (%)을 경시적으로 관찰하였다. 피하로 감염시킨 마우스는 감염 1주 ($38.3/\textrm{mm}^2$)부터 진피 내 비만세포의 수가 PBS주입군 (대조군) (범위: $19.4-25.1/\textrm{mm}^2$)에 비해 유의한 수준 (P<0.05)으로 증가하기 시작하여 전 실험기간 동안 증가하였다. 이때 비만세포는 충체의 낭 (cyst)주위의 피하층에도 집중적으로 침윤되어 있었다. 경구로 감염시킨 마우스 는 감염 2주 ($33.5/\textrm{mm}^2$)부터 진피 내 비만세포의 수가 비감염군 (대조군)(범위: $17.4-22.3/\textrm{mm}^2$)에 비 해 유의 한 수준 (p<0.05)으로 증가하기 시작하여 전 실험 기간인 감염 6주 ($38.4/\textrm{mm}^2$)까지 높게 운지 되었다. 진피 내에 동원된 비만세포의 평균 탈과림률 (%)은 피하 감염 및 경구 감염군 모두 감염 2주부 터 6주까지 60%이상을 보인 반면 PBS주입군 (대조군)및 비감염군 (대조군)에 있어서는 전 실험기간 동안 10%정도의 탈과립률이 관찰되었다. 이상의 결과로 보아 폐흡충을 마우스에 감염시켰을 때 일어 나는 진피 내 비만세포 반응은 감염경로와는 상관없이 충체에서 분비되는 배설-분비 항원의 자극과 깊은 관계가 있음을 알 수 있었다.