An epidemiological study was performed to evaluate the state of fish diseases between aquaculture fishes in the area of southern Kyeongnam, especially Tongyeong-si, Geoje-si, and Goseong-gun. Examination for a total of 91 cases was carried out for a variety of fishes, including Japanese flounder(Paralichthys olivaceus), rock fish (Sebastes schlegeli), sea bass (Lateolabrax japonicus), sea breams(Pagrus major), and red drum (Sciaenops ocellatus) from November, 1999 to October, 2001. The investigation resulted in exploring 155 infectious diseases, including 62 Vibriosis, 16 Edwasiella infection, 11 Streptococcosis, 7 Pseudotuberculosis, 15 Scuticociliatida infection, 20 Gill flukes, and 9 Trichodiniasis. When the infections were classified according to fish species, Japanese flounder was infected by 30 Vibrio spp., 16 Edwardsiella tarda, 6 Streptococcus spp., 12 Scuticociliatida infection. In case of sea bass, 10 Vibrio spp. was able to isolate out of 10 outbreaks, on the other hand, rock fish was dominantly infected by gill flukes since it was observed 12 out of a total of 20 cases. With reference to seasonal fluctuation, Vibrio spp. infection was continually observed through all seasons but Edwardsiella septicaemia, Streptococcosis and Pseudotuberculosis was mainly isolated in summer and autumn when the water temperature was raised high. Scuticociliatida infection was frequently occurred from late autumn to early spring but gill flukes were watched all the year regardless of temperature. As regards, multiple infection, 47 out of 91 cases was Identified to have involved in more than 2 pathogens, especially Vibrio spp. was highly mixed with other pathogens since 42 out of 47 cases was mixed with Vibrio spp.
Miamiensis avidus는 넙치에 폐사를 일으키는 스쿠티카 섬모충이다. M. avidus에 대한 넙치의 면역반응을 측정하기 위하여 FKC (formalin killed cell)를 마리당 2.6 × 106 cells을 복강주사하고, FKC를 초음파처리한 것을 2.4 × 106 cells/㎖로 14.9 cm (26.8 g)의 넙치에 2주 간격으로 두 번 면역하였다. 면역한 넙치의 항체는 충체의 운동성둔화 (immobilization)와 응집 (agglutination)을 유발하였다. 면역한 그룹은 면역하지 않은 그룹보다 높은 ELISA항체가를 나타내었다. 또한, 복강주사로 면역한 넙치에서 유의적으로 높은 phagocytic ratio, phagocytic index와 주화활성을 나타내었다. FKC의 면역방어효과를 검증하기 위하여 8.6 cm (6.3 g)의 넙치에 마리당 1.43 × 105 cells을 복강주사면역하고 2.2 ×105 cells/㎖의 농도로 침지면역했다. 2주 간격으로 두 번 면역하고 2.0 × 104과 2.0 × 103 cells/㎖ 농도로 침지 공격 감염시킨 후 폐사율을 관찰하였다. 감염시킨 3주 후 폐사율은 복강주사구에서 감소하였고 침지면역구는 폐사가 지연되었다. 위의 결과로부터 M. avidus의 불활화백신을 넙치에 면역하면 충에 대한 특이면역이 증강되며 증강된 면역반응이 방어력을 제공했을 것으로 생각되었다.
본 연구는 양식넙치에 높은 폐사율과 성장저하를 일으키는 스쿠티카섬모충 Miamiensis avidus (syn. Philasterides dicentrarchi)의 성장과 병원성에 미치는 온도의 영향을 알아보았다. in vitro 배양조건에서 이분열에 걸리는 시간은 $5{^{\circ}C}$에서 61.82시간, $10{^{\circ}C}$에서 26.32시간, $15{^{\circ}C}$에서 21.14시간, $20{^{\circ}C}$에서 16.86시간 그리고 25℃에서 는 16.21시간이었다. 최고로 배양 가능한 충수는 $1.54-1.75{\times}10^{5}$/ ml의 범위로 $10{^{\circ}C}$이상의 모든 온도범위에서 유사했다. 넙치(평균 8.34 cm, 4.33g)마리당 $1{\times}10^{2}$/ ul, $1{\times}10^{6}$/ ul, $1{\times}10^{4}$/ ul 과 $1{\times}10^{5}$/ ul 으로 스쿠티카충을 복강에 감염시킨 후 $10{^{\circ}C}$, $15{^{\circ}C}$와 $20{^{\circ}C}$에서 사육하면서 폐사를 관찰하는 실험을 2회 실시한 결과, 수온 $10{^{\circ}C}$에서는 폐사가 현저히 낮았고 온도가 높아질수록 폐사가 증가하였다. 또한 감염농도가 높아질수록 폐사는 증가하였다. 그러므로 스쿠티카섬모충 M. avidus는 온도가 높을수록 증식이 잘 되며 또한 수온이 높아질수록 온도의존적으로 폐사가 증가하므로 폐사를 경감시키기 위해서는 고수온기의 수온관리가 중요한 것으로 사료된다.
Miamensis avidus에 대한 alginate Microsphere (Alginate MS) 경구백신의 넙치에 대한 효능을 침지와 주사경로의 공격감염으로 확인하였다. Trial 1에서는 불활화 M. avidus (IMa)와 IMa를 alginate로 코팅한 IMa+Alginate MS 를 사료와 혼합하였으며 총 5일 동안 3.75 × 106 cells/fish의 농도로 먹였다. 경구백신 투여 5주 후 침지로 공격감염했을 때, IMa+Alginate MS 그룹의 상대생존율 (RPS)은 50% (50% 해수 침지감염)와 37.5% (100% 해수 침지감염)였다. IMa 단독투여 그룹은 낮은 생존율을 보였다. Trial 2에서는 항원을 2.38 × 106 cells/fish의 농도로 5일간 나누어 먹였다. 경구백신 투여 2주 후에는 복강주사로 효능을 평가하였고, IMa+Alginate MS 투여구의 상대생존율은 30.8%였으며 IMa 단독투여 그룹은 백신의 투여효과가 전혀 없었다. 경구백신 투여 종료 5주 후 50% 해수에서 침지감염으로 공격감염 한 경우 IMa+Alginate MS 투여구의 상대생존율은 42.9%, IMa 단독투여 그룹의 상대생존율은 14.3%를 기록하였다. 본 연구의 결과는 Alginate로 M. avidus항원을 코팅함으로써 M. avidus항원을 단독으로 투여하는 것보다 넙치에 높은 방어력을 제공할 수 있음을 나타낸다.
With the rapid progress in seed production techniques, aquaculture production of economically important species of marine fish has been accelerated in Japan. Howecer, mass mortalities due to viral infections as well as other microbial infections have often occurred during the seed production and grow-out stages. Among these diseases, four viral diseases have been known in cultured Japanese flounder (Paralichthys olivaceus) since around 1980. In this paper, viral diseases of cultured flounder in Japan are briefly reviewed, with special attention to two viral diseases. viral epidermal hyperplasia and rhabdovirus infection which are relatively important because of their frequent occurrence. Viral epidermal hyperplasia is characterized by fin opacity and associated with high mortality in larval flounder Electron microscopy of affected epidermal cells and transmission experiments with tissue filtrates demonstrated that the disease was caused by a herpesvirus but the agent has not been isolated in fish cell lines. On the other hand, rhabdovires infection occurrs in juvenile and production size fish with hemorrhage in the skeltal muscle and fins, congestion of the gonads, and ascites. A rhabdovirys was isolated in RTG-2 cells from the diseased flounder as a causative agent, which was designated hirame rhabdovirus (HRV) or Rahbdovirus olivaceus. HRV is serologically distinguishable from other known fish rhabdoviruses. Intensive researches on these viral diseases started in 1980th. but properties of the causative agents and infection mechanisms have not been fully investigated. This results in difficulty in controlling these diseases.
Lee Eun Hye;Kwon Se Ryun;Kim Chun Soo;Chung Joon Ki;Lee Hyung Ho;Kim Ki Hong
Fisheries and Aquatic Sciences
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제5권4호
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pp.311-313
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2002
Proteolytic activity of live Uronema manum was analyzed by fluorescence polarization (FP) technique. Protease activity was measured by a decrease in FP value using fluorescein isothiocynate (FITC)-casein as a protein substrate. The results demonstrated an inverse linear relationship between fluorescence polarization (FP) values and live ciliate concentration over the range $1\times10^4\;to\;2\times10^5$ cells/well. However, the FP values of $10-10^3$ live parasites were not different significantly from that of control. Time-dependent decrease in FP value was shown in the wells containing live U. marinum. In the present study, FP assay had the benefit to provide measurements of substrate hydrolysis by live parasites in real-time, and did not require separations, precipitations, or transfers of reaction mixture.
Kwon Se Ryun;Kim Chun Soo;Ahn Kyoung Jin;Cho Jae Bum;Chung Joon Ki;Lee Hyung Ho;Kim Ki Hong
Fisheries and Aquatic Sciences
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제5권3호
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pp.145-149
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2002
The effects of pH, temperature and various inhibitors on the proteolytic activity of the cell lysate of Uronema marium were investigated using colorimetric and substrate gel electrophoretic methods. The cell lysate of U. marinum showed proteolytic activity over a wide range of pH, and pH optima ranged from pH 5 to 7. The proteolytic activity was increased according to a rise of temperature but decreased at $40^{\circ}$. The proteolytic activity of the parasite lysate was significantly inhibited by protease inhibitors including trans-epoxysuccinyl -L-leucylamido-(4-guanidino) butane (E-64), pepstatin A, phenyl-methanesulfonyl fluoride(PMSF), and ethylenediamine-tetraacetic acid (EDTA). Preincubation of the lysate with E-64 showed the maximum inhibition of the caseionolytic activity. Four protease bands (152, 97, 67 and 40 kDa) were detected by gelatin SDS-PAGE. Significant inhibition of caseinolytic activity and complete abolition of a 152 kDa band in gelatin SDS-PAGE by EDTA indicated that the cell lysate of U. marinum had a metalloprotease Another three proteolytic bands were inhibited by E64, a cysteine protease inhibitor. Preincubation of the cell lysate with pepstatin or PMSF had no effects on the protease bands.
수산 양식장에서 어류 질병을 초기에 발견하지 못하는 경우 밀폐된 공간 안에서 확산하기 때문에 집단 폐사로 이어질 확률이 매우 높다. 이런 이유로 질병의 조기 발견은 양식업에서 매우 중요하다. 양식장에서 질병의 확산을 막기 위해서는 초기에 병이 든 어류를 자동식별이 가능한 방법이 필요하다. 최근 딥러닝 기반의 어류 질병 자동식별 방법이 많이 사용되고 있는데, 어류의 질병 이미지가 충분하지 않아 객체 식별에 많은 어려움이 있다. 본 논문은 질병 자동식별 예측을 위한 질병 이미지의 부족 문제를 해결하기 위해서 SinGAN 딥러닝 모델을 이용하여 정상 이미지와 질병 이미지를 합성해 다양한 어류 질병 이미지를 자동 생성하는 방법을 제안한다. 넙치에서 가장 빈번히 발생하는 3가지 질병 스쿠티카병, 비브리오증, 림포시스티스에 대해서 SinGAN 기반으로 질병 이미지를 증강한다. 본 연구에서는 넙치 정상 이미지 11장에 각 질병 패턴 10가지를 합성하여서 스쿠티카병 110장, 비브리오증 110장, 림포시스티스 110장으로 총 330장을 만들었고 이를 통해 생성된 이미지는 4배수 하여 1,320장의 이미지를 생성할 수 있었다.
스쿠티카섬모충이 사육중인 자주복에 침입하였을 때 감염어의 외부증상, 행동특성 및 피부, 아가미 그리고 혈관내 충체의 분포 양상을 조사하였다. 스쿠티카섬모충에 감염된 개체는 초기에 체색 변화나 유영행동 등의 외부증상을 인지할 수 없었으나, 몸체에 감염부위가 병리적인 진행에 따라 표피와 지느러미에 발적과 부식, 그리고 궤양증상을 보였다. 또한 감염어는 정상개체와 달리 무리에서 이탈하여 선회 또는 저면에 멈춰 있거나 수면 위로 입올림 하였으며, 일부 개체에서는 돌발적인 유영도 보였다. 사육중인 자주복에 침입한 스쿠티카섬모충은 타원형으로 크기가 20-40 ${\mu}m$ 범위였고, 몸체의 미부에 수축포와 10-12 ${\mu}m$되는 하나의 긴 섬모가 개재되어 있으며, 생식방법은 이분열로 증식하여 형태분류학적인 측면에서 막구충아강 채찍섬모충목의 특색을 나타내었다. 아가미에 스쿠티카섬모충이 감염된 경우에는 아가미 새판상피의 비대로 새엽이 곤봉화 되는 병리적 현상이 있었다. 혈관 속에 침입한 스쿠티카섬모충들은 혈관의 직경 크기에 따라 1-2마리에서 많게는 9-10마리씩 산재하였고, 그들 중 일부 개체에서 적혈구 세포를 섭취한 스쿠티카섬모충이 관찰되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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