Neurofascin은 L1CAM의 하나로 신경섬유의 발달과정에서 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 있다. 말초신경의 수초형성과 관련된 neurofascin의 역할을 알아볼 목적으로 면역형광염색과 면역전자현미경기법을 이용하여 랫드의 수초좌골신경섬유에서 neurofascin의 분포를 추구하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1.수초형성이 진행됨에 따라 좌골신경섬유에서 neurofascin 분포는 매우 심하게 변화되었다. 2. 수초신경섬유에서 neurofascin은 Ranvier마디에서 약하게 국재하였다. 3. Neurofascin은 수초신경섬유의 paranodal loop, Schmidt-Lantermann incisure, 속축삭사이막, 바깥축삭사이막처럼 Schwann세포의 막이 밀착되지 않은 부위에서도 뚜렷하게 국재하였다. 이상의 연구결과로 neurofascin은 Schwann세포의 마주보는 막사이에 이상적인 간격을 유지하는데 어떤 역할을 하는 것으로 생각되며, 수초층에서 물질이동이 가능하게 하는 것으로 보인다.
Granular cell tumor or also called Abrikossoff's tumor, is a rare benign tumor that can occur anywhere in the body. Granular cell tumor may single or multiple (synchronous or metachronous). Approximately half of all granular cell tumors occur in the head and neck. most commonly in the tongue. But granular cell tumors of the larynx are rare, accounting for only 7 to 10% of all reported cases. Laryngeal tumors are usually small and men are more frequently affected than women. The exact histogenesis is still not known but most recent data support the neurogenic Schwann cell origin. The preferred treatment is local excision using cold knife or laser. Radiation therapy is of little benefit. We report a case of granular cell tumor of the larynx which was confirmed by histopathology.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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제31권3호
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pp.239-247
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2005
This study demonstrated that xenogenic human marrow mesenchymal stem cells (hMSCs) could elicit the regeneration of the sensory nerve after axotomy in the adult rats infraorbital nerves without immunosuppression. For this, we evaluated the behavioral testing for functional recovery of the nerve and histological findings at weeks 3 and 5 compared to controls. Xenogenic hMSCs did not evoke any significant inflammatory or immunologic reaction after systemic and local administrations. HMSCs-treated rats exhibited significant improvement on sensory recovery tested with von Frey monofilaments. At 5 postoperative weeks, in the hMSCs treated nerve, expression of myelin basic protein (MBP), neurofilament (NF) at the site of axotomy was higher than control. And mRNA expression of neurotropin receptor Trk precursor (TrkPre), nerve growth factor receptor (NGFR) and neuropeptide (NPY) in trigeminal ganglion were also higher. The number of myelinated nerve at distal stump and cells in trigeminal ganglion were higher in hMSC treated rats. So it was supposed that transplanted MSCs contributed to reducing post-traumatic degeneration and production of neurotrophic factors. Immunofluorescence labeling showed small portion of hMSCs (<10%) expressed a phenotypic marker of Schwann cell (S-100). Xenogenic or allogenic mesenchymal stem cells might have immune privileged characteristics and useful tool for cell based nerve repair.
마우스 간염 바이러스, 코로나, 홍역 및 sindbis 바이러스와 같은 많은 바이러스가 쥐의 신경계에서 수초 형성의 파괴를 의미하는 탈수 초 유도의 원인 바이러스로 알려져 있다. 본 연구의 목적은 슈반 세포와 신경 세포의 공동 배양에 의한 수초화와 쥐의 sindbis 바이러스 감염에 의한 탈수초화에 의한 수초화 과정을 연구하는 데 있다. 쥐의 배아의 (Dorsal root ganglion, DRG)에서 슈반 (Schwann) 세포와 신경 세포 (neuronal cell)를 in vitro에서 배양 하였다. 유사 분열 억제인자로 처리한 신경세포와 정제 된 Schwann 세포를 갖는 공동 배양을 하였다. 그 후,이 수초화 된 공동 배양 시스템에 sindbis 바이러스 감염이 수행되었다. 수초 형성의 존재를 의미하는 peripheral myelin protein 22 (PMP 22) 항체를 사용하여 수초 형성 및 탈수초화 과정을 관찰 하였다. 우리는 수초화 된 뉴런의 존재를 의미하는 말초 myelin 단백질 22 (PMP 22)의 항체를 사용하여 수초화 및 탈수초 과정을 확인하였다. 이 연구는 과학 기술부, ICT 및 미래 계획 (NRF-2015R1C1A1A01053484 및 2017R1A2B3005753)이 자금을 지원하는 국립 연구 재단 (NRF)을 통한 기초 연구 프로그램의 지원을 받았다.
슈반세포는 강력한 말초신경 재생 효과를 가지고 있다. 그리고 신경 유도관으로 사용된 소장점막하조직(small intestinal submucosa, SIS)은 세포활성을 촉진하는 여러 가지 성장인자를 다량 함유하고 있고 이종이식의 면역 거부반응이 없는 생체물질로서 널리 사용되고 있다. 슈반세포는 Fischer 쥐의 좌골신경으로부터 분리하였고, 순수 배양된 슈반세포를 $2{\times}10^6$ 세포로 계산하여 SIS 스폰지에 파종하였다. 그리고 Fischer 쥐의 좌골신경 5 mm를 제거하여 신경과 제조된 스폰지를 연결하는 신경 외막 봉합을 실시하였다. 그런 후 1, 2주 및 4주 후 재생된 신경을 적출 한 후, H &E 염색과 S-100, GFAP 및 NF 면역조직화학염색을 실시하였다. 그 결과, SIS 스폰지와 슈반세포를 함께 이식한 군(Group II)은 아무것도 이식하지 않은 군(Control II)과 SIS 스폰지만 이식한 군(Group I) 보다 뚜렷한 양성반응을 보였고 손상을 받지 않은 군(Control I)과 별차이가 없는 양상을 보여주었다. 이는 SIS 스폰지와 슈반세포를 함께 이식했을 때 손상된 조직공학적 말초 신경 재생에 중요한 역할을 한 것으로 사료된다.
Granular cell tumor is mostly benign and thought to be of Schwann ceil origin. The head and neck, particularly tongue, breast, and upper respiratory tract are frequently involved. Recently, we have experienced a case of granular cell tumor of the right thigh in a 30-year old male, diagnosed by fine needle aspiration cytology which revealed distinct cytologic features The smear revealed cellular aspirates with clear back-ground. The tumor cells showed uniform small nuclei and abundant eosinophilic, granular cytoplasm with hazy cell border. Mitoses were not found.
Extracellular vesicles (EVs) are nano-sized lipid bilayer vesicles released by cells. EVs act as messengers for cell-to-cell communication. Inside, it contains various substances that show biological activity, such as proteins, lipids, nucleic acids, and metabolites. The study of EVs extracted from terrestrial organisms and stem cells on inflammatory environments and tissue regeneration have been actively conducted. However, marine organisms-derived EVs are limited. Therefore, we have extracted EVs from sea urchins belonging to the Echinoderm group with their excellent regenerative ability. First, we extracted extracellular matrix (ECM) from sea urchin gonads treated with hypotonic buffer, followed by collagenase treatment, and filtration to collect ECM-bounded EVs. The size of sea urchin gonad-derived EVs (UGEVs) is about 20-100 nm and has a round shape. The protein content was higher after EVs burst than before, which is evidence that proteins are contained inside. In addition, proteins of various sizes are distributed inside. PKH-26 was combined with UGEVs, which means that UGEVs have a lipid membrane. PHK-26-labeled UGEVs were successfully uptaken by cells. UGEVs can be confirmed to have the same characteristics as traditional EVs. Finally, it was confirmed that Schwann cells were not toxic by increasing proliferation after treatment.
Purpose: Lingual nerve (LN) damage may be caused by either tumor resection or injury such as wisdom tooth extraction, Although autologous nerve graft is sometimes used to repair the damaged nerve, it has the disadvantage of necessity of another operation for nerve harvesting. Moreover, the results of nerve grafting is not satisfactory. The nerve growth factor (NGF) is well-known to play a critical role in peripheral nerve regeneration and its local delivery to the injured nerve has been continuously tried to enhance nerve regeneration. However, its application has limitations like repeated administration due to short half life of 30 minutes and an in vivo delivery model must allow for direct and local delivery. The aim of this study was to construct a well-functioning $rhNGF-{\beta}$ adenovirus for the ultimate development of improved method to promote peripheral nerve regeneration with enhanced and extended secretion of hNGF from the injured nerve by injecting $rhNGF-{\beta}$ gene directly into crush-injured LN in rat model. Materials and Methods: $hNGF-{\beta}$ gene was prepared from fetal brain cDNA library and cloned into E1/E3 deleted adenoviral vector which contains green fluorescence protein (GFP) gene as a reporter. After large scale production and purification of $rhNGF-{\beta}$ adenovirus, transfection efficiency and its expression at various cells (primary cultured Schwann cells, HEK293 cells, Schwann cell lines, NIH3T3 and CRH cells) were evaluated by fluorescent microscopy, RT-PCR, ELISA, immunocytochemistry. Furthermore, the function of rhNGF-beta, which was secreted from various cells infected with $rhNGF-{\beta}$ adenovirus, was evaluated using neuritogenesis of PC-12 cells. For in vivo evaluation of efficacy of $rhNGF-{\beta}$ adenovirus, the LNs of 8-week old rats were exposed and crush-injured with a small hemostat for 10 seconds. After the injury, $rhNGF-{\beta}$ adenovirus($2{\mu}l,\;1.5{\times}10^{11}pfu$) or saline was administered into the crushed site in the experimental (n=24) and the control group (n=24), respectively. Sham operation of another group of rats (n=9) was performed without administration of either saline or adenovirus. The taste recovery and the change of fungiform papilla were studied at 1, 2, 3 and 4 weeks. Each of the 6 animals was tested with different solutions (0.1M NaCl, 0.1M sucrose, 0.01M QHCl, or 0.01M HCl) by two-bottle test paradigm and the number of papilla was counted using SEM picture of tongue dorsum. LN was explored at the same interval as taste study and evaluated electro-physiologically (peak voltage and nerve conduction velocity) and histomorphometrically (axon count, myelin thickness). Results: The recombinant adenovirus vector carrying $rhNGF-{\beta}$ was constructed and confirmed by restriction endonuclease analysis and DNA sequence analysis. GFP expression was observed in 90% of $rhNGF-{\beta}$ adenovirus infected cells compared with uninfected cells. Total mRNA isolated from $rhNGF-{\beta}$ adenovirus infected cells showed strong RT-PCR band, however uninfected or LacZ recombinant adenovirus infected cells did not. NGF quantification by ELISA showed a maximal release of $18865.4{\pm}310.9pg/ml$ NGF at the 4th day and stably continued till 14 days by $rhNGF-{\beta}$ adenovirus infected Schwann cells. PC-12 cells exposed to media with $rhNGF-{\beta}$ adenovirus infected Schwann cell revealed at the same level of neurite-extension as the commercial NGF did. $rhNGF-{\beta}$ adenovirus injected experimental groups in comparison to the control group exhibited different taste preference ratio. Salty, sweet and sour taste preference ratio were significantly different after 2 weeks from the beginning of the experiment, which were similar to the sham group, but not to the control group.
Objectives: Previous reports have shown that Bogijetong-Tang (BJT) is effective in peripheral neuropathy induced by taxol and crush injury. In this study, we researched the effects of BJT on diabetic neuropathy induced by STZ in the mouse. Methods: We performed both in vitro and in vivo experiments to verify the effects of BJT on diabetic neuropathy induced by STZ in mice. Changes in axonal recovery were observed with immunofluorescence staining using NF-200, Hoechst33258, $S100{\beta}$, caspase 3 and anti-cdc2. Proliferation and degeneration of Schwann cells were investigated by immunofluorescence staining and western blot analyses. Results: BJT showed considerable effects on neurite outgrowth and axonal regeneration in diabetic neuropathy. BJT contributed to the creation of NF-200, GAP-43, Cdc2, phospho-vimentin, ${\beta}1$, active ${\beta}1$, ${\beta}3$ integrin, phospho-Erk1/2 protein. Conclusions: Through this study, we found that BJT is effective for enhanced axonal regeneration via dynamic regulation of regeneration-associated proteins. Therefore, BJT had a pharmaceutical property enhancing recovery of peripheral nerves induced by diabetic neuropathy and could be a candidate for drug development after more research.
현재 일반적으로 Neurilemmoma 또는 Schwannoma라고 부르는 일련의 종양들은 1908年 Verocay에 의해 처음으로 기술되었으며, 1910년 그는 이것을 "Neurinoma"라고 명명하였다. Neurilemmoma라는 명칭은 1935년 Stoutdp 의하여 처음으로 소개되었다. Neurilemmoma는 신경초(Newe Sheath)를 소유하고 있는 어떤 신경에서나 발생할 수 있는 종양으로서 비교적 희유한 양성종양이며 연령, 성병, 그리고 발생장소에 따른 어떤 우월성은 없었으나 이 종양의 약 25% 이상이 두경부에 발생한다. 다른 부위로 전이를 일으키지 않으며 완전 제거 후에는 재발되지 않으며 방사선에 대한 감수성은 거의 없었다. 저자들은 과거 5년간 본 병원 이비인후과령역에서 수술제거한 5예의 Neurilemmoma를 문헌고찰과 함께 보고하는 바이다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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