Jae Ho Han;Si Won Jang;Ye Rim Kim;Hoon Jang;Kwan Seob Shim;Hyun Woo Choi
Animal Bioscience
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제36권12호
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pp.1889-1897
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2023
Objective: 'Cultured meat' has been suggested as means of solving the problems associated with overpopulation and gas emissions. Satellite cells are a major component in the production of cultured meat; however, these cells cannot be maintained in vitro over long periods. Fibronectin is a glycoprotein that affects biological processes such as cell adhesion, differentiation, and migration. Unfortunately, the characteristics of porcine satellite cells grown in a long-term culture when exposed to fibronectin-coated dishes are unknown. The objective of this study was to investigate the appropriate concentration of fibronectin coated dishes for proliferation and maintenance of porcine satellite cells at long-term culture. Methods: In this study, we isolated the satellite cells and fibroblast cells with pre-plating method. We next analyzed the cell doubling time, cell cycle, and rate of expressed paired box 7 (Pax7) and myogenic differentiation 1 (MyoD1) in porcine satellite cells cultured with 20 ㎍/mL of fibronectin-, gelatin-, and non-coated dishes at early and late passage. We then analyzed the proliferation of porcine satellite cells with various concentrations of mixed gelatin/fibronectin. We next determined the optimal concentration of fibronectin that would encourage proliferation and maintenance of porcine satellite cells in a long-term culture. Results: Doubling time was lowest when 20 ㎍/mL of fibronectin was used (as tested during an early and late passage). Levels of expressed Pax7 and MyoD1, assessed using immunocytochemistry, were highest in cells grown using fibronectin-coated dishes. The proliferation of gelatin/fibronectin mixed coatings had no significant effect on porcine satellite cells. The concentration of 5 ㎍/mL fibronectin coated dishes showed the lowest doubling time and maintained expression of Pax7. Conclusion: Fibronectin with 5㎍/mL effectively maintains porcine satellite cells, a discovery that will be of interest to those developing the next generation of artificial meats.
This study was conducted to determine the difference between satellite cells (porcine) and myoblasts (C2C12) in their differentiation under the influence of 2, 4-thiazolidindion. C2C12 myoblast cells and porcine satellite cells (isolated from 10 d old $Landrace{\times}Duroc$ piglets) were grown to absolute confluency. Post confluent cells (day 0) were further exposed to adipogenic induction medium along with 2, 4-thiazolidindion ($8{\mu}M$) for 2 d. Thereafter, cells were exposed to 2, 4-thiazolidindion alone every 2 d till day 10 and analysed. The control was cultured in differentiation medium without any treatment. Increased (p<0.05) expression of transcriptional factors i.e. C/EBP-${\alpha}$ and PPAR-${\gamma}$ and transition of cells to adipocyte morphology was noticed from 2 d and 4 d onwards in satellite cells (Porcine) and myoblasts (C2C12) respectively. Myogenesis was observed to be suppressed completely in case of satellite cells compared to myoblasts in response to 2, 4-thiazolidindion. Pax-7 (transcriptional factor) appeared as a sole entity to satellite cells only, as it was not identified in case of myoblasts. Although both the cells were converting to adipoblasts, the degree of their conversion was different in response to 2, 4-thiazolidindion. Therefore, the hypothesis that satellite cells contribute various domains to the growing myoblasts appeared obscured and found to be dependent on the proliferative energy/or degree of fusion. However, it revealed satellite cells as currency to myoblasts/muscle.
The objective of this study was to establish the optimum protocol for the isolation and culture of porcine muscle satellite cells. Mononuclear muscle satellite cells are a kind of adult stem cell, which is located between the basal lamina and sarcolemma of muscle fibers and is the primary source of myogenic precursor cells in postnatal muscle. Muscle satellite cells are a useful model to investigate the mechanisms of muscle growth and development. Although the isolation and culture protocols of muscle satellite cells in some species (e.g. mouse) have been established successfully, the culture system for porcine muscle satellite cells is very limited. In this study, we optimized the isolation procedure of porcine muscle satellite cells and elaborated the isolation and culture process in detail. Furthermore, we characterized the porcine muscle satellite cells using the immunofluorecence. Our study provides a reference for the isolation of porcine muscle satellite cells and will be useful for studying the molecular mechanisms in these cells.
Myogenic satellite cells have been isolated and identified by several recently elucidated molecular markers. Furthermore, knowledge about the precise function of these markers has provided insight into the early and terminal events of satellite cells during proliferation, differentiation, transdifferentiation, specification and activation. Recently, quiescent myogenic satellite cells have been associated with possession of Pax 3 and 7 that represent pluripotent stem cells capable of differentiating into other lineages. However, the mechanism by which myogenic satellite cells attain pluripotent potential remain elusive. Later, transdifferentiating ability of these cells to another lineage in the absence or presence of certain growth factor/ or agents has revolutionized the scope of these pluripotent myogenic satellite cells for manipulation of animal production (in terms of quality and quantity of muscle protein) and health (in terms of repair of skeletal muscle, cartilage or bone).
Background: The grading of Hanwoo (Korean native cattle) is based on four economic traits, and efforts have been continuously made to improve the genetic traits associated with these traits. There is a technology to predict the expected grade based on the 4 economic genetic SNP characteristics of Korean cattle calves using single nucleotide polymorphism (SNP) technology. Selection of highly proliferative, self-renewing, and differentiating satellite cells from cattle is a key technology in the cultured meat industry. Methods: We selected the Hanwoo with high and low-scored of genomic estimated breeding value (GEBV) by using the Hanwoo 50K SNP bead chip. We then isolated the bovine satellite cells from the chuck mass. We then conducted comparative analyses of cell proliferation, immunocytochemistry, qRT-PCR at short- and long-term culture. We also analyzed the differentiation capability at short term culture. Results: Our result showed that the proliferation was significantly high at High scored GEBV (Hs-GEBV) compared to Low scored GEBV (Ls-GEBV) at short- and long-term culture. The expression levels of Pax3 were significantly higher in Hs-GEBV bovine satellite cells at long-term culture. However, there were no significant differences in the expression levels of Pax7 between Hs- and Ls-GEBV bovine satellite cells at short- and long- term culture. The expression levels of MyoG and MyHC were significantly high at Ls-GEBV bovine satellite cells. Conclusions: Our results indicated that selection of bovine satellite cells by Hanwoo 50K SNP bead chip could be effective selection methods for massive producing of satellite cells.
Solar cells have widely been utilized for a satellite to convert sunlight energy into electricity in space. Many different types of solar cells appropriate for each satellite program are available in current markets, which enables us to construct a solar array light and small often required from a low Earth orbit (LEO) synthetic aperture radar (SAR) satellite. Thus, it is important to choose a proper solar cell satisfying the requirements of mass and size for the solar array. In this article, we have surveyed typical suppliers and have discussed some characteristics of solar cells. Conceptual design examples of the solar array for LEO SAR satellites using several types of solar cells have been performed to show the pros and cons of solar cells by comparison of the total mass and size necessary for the solar array.
Glial fibrillary acidic protein(GFAP) are a group of intermediate filaments that are distributed in the cytoplasm of many type of glial cells. The purpose of this study was to determine change of GFAP immunoreactivity(GFAP-IR) in rat trigeminal ganglion satellite cells in response to pulp exposure. The immunohistochemistry was carried out using the avidinbiotin-peroxidase complex(ABC) method and subsequently stained with AEC(3-aminoethyl-9-carbasol). 1. Contol group; Central root astrocytes had strong GFAP-IR, but ganglion satellite cells occasionlly had GFAP-IR. This reaction patterns of ganglion satellite cells was not concenturated in any specific region of trigeminal ganglion. 2. Three day pulp exposure group; There was a highly GFAP-IR in satellite cells of trigeminal ganglion in maxillary region. GFAP-IR in neighboring mandibular and ophthalmic regions was less intense compared to maxillary region. 3. Seven day pulp exposure group; In this group, GFAP-IR that was increased compared to control group was seen in the maxillary region. But GFAP-IR was less intense compared to three day pulp exposure group. These results suggest that GFAP in satellite cell increase in specific region of trigeminal ganglion after pulp exposure and offer useful tool in trigeminal pain research.
Satellite cells are skeletal muscle progenitor/stem cells that reside between the basal lamina and plasma membranes of skeletal fibers in vivo. These cells can give rise to both myogenic and adipogenic cells. Given the possible role for differentiation of satellite cells into adipocytes in marbling and in some pathological disorders like sarcopenia, knowledge of the proteins involved in such process remains obscure. Using two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis coupled with mass spectrometry, we investigated the proteins that are differentially expressed during adipogenic differentiation of satellite cells from bovine longissimus muscle. Our proteome mapping strategy to identify the differentially expressed intracellular proteins during adipogenic differentiation revealed a total of 25 different proteins. The proteins up-regulated during adipogenic differentiation of satellite cells like Cathepsin H precursor, Retinal dehydrogenase 1, Enoyl-CoA hydratase, Ubiquinol-cytochrome-c reductase, T-complex protein 1 subunit beta and ATP synthase D chain were found to be associated with lipid metabolism. The down-regulated proteins like LIM protein, annexin proteins, cofilin-1, Rho GDP-dissociation inhibitor 1 and septin-2, identified in the present study were found to be associated with myogenesis. These results clearly demonstrate that the adipogenic conversion of muscle satellite cells is associated with the up-regulated and down-regulated proteins involved in adipogenesis and myogenesis respectively.
This study examined whether adult bovine muscle satellite cells from 30-month-old Hanwoo cattle are multipotential. The satellite cells were found to have the potential to proliferate and differentiate into myoblasts with the formation of multinucleated cells. In addition, treatment with the peroxisome proliferator activating receptor-${\gamma}$ ($PPAR{\gamma}$) agonist, rosiglitazone, promoted their trans-differentiation into adipocytes with significant increases in glycerol accumulation and glycerol-3-phosphate dehydrogenase activity. Western blot analysis revealed that increased levels of the adipocyte fatty acid-binding protein, $PPAR{\gamma}$ and of CCAAT/enhancerbinding protein were closely related to rosiglitazoneinduced differentiation of the cells. These findings demonstrate that satellite cells from adult Hanwoo cattle are multipotent, and that their trans-differentiation into adipocytes can be induced by rosiglitazone.
Avian and mammalian skeletal muscles exhibit a remarkable ability to adjust to physiological stressors induced by growth, exercise, injury and disease. The process of muscle recovery following injury and myonuclear accretion during growth is attributed to a small population of satellite cells located beneath the basal lamina of the myofiber. Several metabolic factors contribute to the activation of satellite cells in response to stress mediated by illness, injury or aging. This review will describe the regenerative properties of satellite cells, the processes of satellite cell activation and highlight the potential role of satellite cells in skeletal muscle growth, tissue engineering and meat production.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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