Park, Jin-Chul;Ok, Min;Cha, Jae-Young;Cho, Young-Su
Applied Biological Chemistry
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v.46
no.4
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pp.348-352
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2003
In this study, strain of high-producing intracellular glutathione was isolated from Korean traditional rice wine. The isolated strain was identified as Saccharomyces cerevisiae based on the morphological, physiological and biochemical characteristics, and was designated as FF-8. The optimal condition for glutathione production by Saccharomyces cerevisiae FF-8 was obtained after cultivation with shaking for 72 hours in the YM medium. The optimal temperature, shaking rate and initial pH for the glutathione production were $30^{\circ}C$, 100 rpm and pH 6.0, respectively. The dry cell weight and glutathione concentration produced by Saccharomyces cerevisiae FF-8 were 5.2 g/l and 72.0 mg/l, respectively, under the optimal culture condition.
Glutathione is a well-known chemotherapeutic agent and a popular nutritional supplement for liver disease and oxidative stress. Our previous studies reported the suppressive effects of the glutathione-enriched Saccharomyces cerevisiae FF-8 (FF-8) strain on carbon tetrachloride- and alcohol-induced oxidative stress in rats. The purpose of the current study was to investigate the effect of the FF-8 strain on lipid peroxidation in tissues of rats with orotic acid (OA)-induced fatty liver. OA treatment showed a significant decrease in body weight gain compared to the normal diet, and simultaneous addition of FF-8 and OA had the same effect. OA treatment produced an increase in liver weight, however, this also increased with simultaneous addition of FF-8 and OA. Liver lipid peroxidation was significantly increased by OA, but was significantly decreased by FF-8 strain treatment. This same tendency was found in the kidney and heart. Concentration levels of hepatic glutathione and zinc are known to be closely associated with the antioxidant system, and OA treatment led to reductions in liver glutathione and zinc concentrations, whereas these were significantly increased by FF-8 strain treatment in OA feeding rats. These results suggest that the glutathione-enriched S. cerevisiae FF-8 strain may positively mediate orotic acid-induced oxidative stress by enhancing glutathione and zinc levels in rat livers.
Lee Chi-Hyeoung;Cha Jae-Young;Jun Bang-Sil;Lee Ho-Jun;Lee Young-Chun;Cho Yong-Lark;Cho Young-Su
Journal of Life Science
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v.15
no.5
s.72
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pp.819-825
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2005
The Antioxidative accvities of the cell free extracts containing high glutathione by Saccharomyces cerevisiae FF-8 were tested in vitro experimental models : DPPH method for radical scavenging activity, ferric TBA method and ferric thiocyanate method using linoleic acid and tissue microsome for lipid peroxidation inhibitions. The concentration of intercellular glutathione by cultivating S. cerevisiae FF-8 in the YM optimal medium obtained $204\mug/ml$, which was increased by 2.76-fold from $74\mug/ml$ in the YM basal medium. A comparition between the YM basal medium and the YM optimal medium on antioxidative substance produced by S. cerevisiae FF-8 was investigated. In DPPH ($\alpha, \alpha-diphenyl-\beta-picrylhydrazyl$) method, the electron donating activity of the glutathione produced by S. cerevisiae FF-8 cultured in the YM optimal medium was as high as that of BHT ($ 0.05\%w/v $). The antioxidative a.tivity was measured by inhibition against lipid peroxidation of rat tissues' microsomes. The results of anti-oxidant activity of the cell free extracts by S. rerevisiae FF-8 cultured in the YM optimal medium was shown in the following order . $ liver 60.98\% > kidney 56.43\% > heart 52.91\% > brain 52.13\% > testis 45.57\% > spleen 42.95\% $. In antioxidative activities determined by ferric thiocyanate method and TBA methods against lipid peroxidation, the lipid peroxidation in the control mixture increased more rapidly than the typical peroxidation curve of linoleic acid from one day. The antioxidative activity of the cell free extracts by cultivating S. cerevisine FF-8 in the YM optimal medium were higher than that of the YM basal medium. These data indicate that the cell free extracts containing a high intercellular glutathione of S. cerevisiae FF-8 cultured in YM optimal medium showed strong antioxidative capacities by DPPH radical scavenging activity and ferric thiocyanate and TBARS measurements.
Zinc is an essential trace element in Human Being. Highly zinc containing yeast strain isolated from the tropical fruit, rambutan and the zinc concentration in this yeast strain was 306 ppm (30.6 mg%)per dry matter basis. This strain was found to be a rounded type, normal size, and multi-polar budding. Phylogenetic analysis using the ITS1-5.85 rDNA sequences from isolated strain is most similar to yeast Saccharomyces cerevisiae at the level of nucleotide sequence identity at 99%. This strain was produced alcohol by about 12% using fully colonized koji-rice with Aspergillus oryzae. In conclusion, the isolated strain was found to be closely related to the S. cerevisiae based on its morphological and physiological properties, and alcohol fermentation. The phylogenetic analysis of strain FF-10 using ITS 5.8S rDNA sequence data also supported the closely related to the S. cerevisiae. Accordingly, the isolated yeast was named as S. cerevisiae FF-10. Further studies on the best culture conditions for zinc production from zinc-enriched S. cerevisiae FF-10 are under investigation.
The present work is aimed to evaluate the protective effect of glutathione-enriched Saccharomyces cerevisiae FF-8 strain on carbon tetrachloride ($CCl_4$)-induced hepatotoxicity and oxidative stress in rats. The activities of liver markers (alanine aminotransferase, aspartate aminotransferase, alkaline phosphatase, lactate dehydrogenase), lipid peroxidative index (thiobarbituric acid-reactive substances), and the antioxidant status (reduced glutathione) were used to monitor those protective roles of FF-8 strain. The liver marker enzymes in plasma and the lipid peroxidation in the liver were increased when $CCl_4$ was treated but these were significantly decreased by FF-8 strain treatment. The hepatic concentration of glutathione in the current glutathione-enriched FF-8 strain fed animal was approximately twice as high as the normal, but this was slightly increased in response to $CCl_4$ plus glutathione-enriched FF-8 strain. The increased liver triglyceride concentration due to the $CCl_4$ treatment was significantly decreased by FF-8 strain and the reduced level reached to that of normal group. Administration of FF-8 strain in normal rat did not show any signs of harmful effects. Therefore, the current findings suggest that FF-8 strain could be an effective antioxidant with no or negligible side-effects and it might be useful for the purpose of protection treatment of hepatotoxicity and oxidative stress in $CCl_4$-treatment in rat.
Glutathione is a well known chemotherapeutic agent for liver disease and is a popular nutritional supplement in the United States. Previous our studies reported the suppressive effects of glutathione-enriched Saccharomyces cerevisiae FF-8 strain (FF-8GY) on carbon tetrachloride- and alcohol-induced hepatotoxicity. The primary objective of this study was to investigate the comparative effects of FF-8GY and commercially available glutathione-enriched yeast extract (GYE) against the oxidative stress in alcohol-induced fatty liver of rats. The lipid peroxidative index (thiobarbituric acid-reactive substances, TBARS) and antioxidant status (reduced glutathione level) were used to monitor those protective roles of FF-8GY or GYE treatment. When the rat was treated alcohol, the TBARS levels in the whole liver and the subfractions of microsomal and mitochondria were significantly increased but these were significantly decreased by FF-8GY treatment and tended to be lowered by GYE treatment. The concentration of hepatic glutathione is known to be closely associated with antioxidant system and this was slightly deplete in the alcohol-induced rats, but this was recovered by treating with FF-8GY. However, the glutathione concentration was more significantly decreased in the GYE supplementation in alcohol feeding rats. Alcohol treatment also negatively affected the serum total protein and albumin, but these were significantly increased near normal levels in FF-8GY coadministered rats. These results suggest that glutathione-enriched Saccharomyces cerevisiae FF-8 strain may have positively mediate the alcohol-induced oxidative stress, and this effect was more pronounced in FF-8GY compared to GYE.
The suppressive effects of glutathione-enriched Saccharomyces cerevisiae FF-8 strain (FF-8 GY) on alcoholinduced hepatotoxicity have been studied. FF-8 GY (256 mg/L) from the fermentation at a large scale bioreactor was used. Either of 5% FF-8 GY or 5% commercial glutathione-enriched yeast extract (GYE) with or without 30% alcohol was tested with rats for 4 weeks. FF-8 GY and GYE were found to reduce those alcohol-elevated serum alanine aminotransferase (ALT), alkaline phosphatase (ALP), and lactate dehydrogenase (LDH) activities. Blood alcohol and acetaldehyde were also decreased by FF-8 GY and GYE. Interestingly, FF-8 GY drastically increased both hepatic alcohol dehydrogenase (ADH) and acetaldehyde dehydrogenase (ALDH) activities in comparison to GYE group, thus FF-8 GY would be more effective in blood alcohol and acetaldehyde reduction. Attenuated lipid droplet accumulation in hepatocytes was observed in both FF-8 GY and GYE when alcohol stimulated the accumulation. Therefore, FF-8 GY may be useful to protect liver from alcohol-induced hepatotoxicity.
The influence of feedstock amino acids, salt, carbon and nitrogen sources on glutathione production by Saccharomyces cerevisiae FF -8 was investigated. Glucose, yeast extract, KH$_2$PO$_4$, and L-cysteine were found to be suitable feedstock. Highest glutathione production was obtained after cultivation with shaking for 72 h in a medium containing glucose 3.0% (w/v), yeast extract 3.0%, KH$_2$PO$_4$ 0.06% and L-cysteine 0.06%. The glutathione concentration achieved using this medium increased 2.27-fold to 204 mg/l compared to YM basal medium.
Park, Jin-Chul;Ok, Min;Cha, Jae-Young;Cho, Young-Soo
Proceedings of the Korean Society of Postharvest Science and Technology of Agricultural Products Conference
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2003.10a
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pp.201.2-202
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2003
생체조직에 있어서 환원형 Glutathione(${\gamma}$-L-glutamyl-cysteinyl-glycine, GSH)은 항산화 작용, 간기능 회복 및 해독작용등의 생체 내에서 중요한 생리활성기능을 가지고 있다. 본 연구에서는 glutathione을 다량으로 함유하는 효모균주를 전통 발효주로부터 분리하여 최적 생산을 검토하였다. 분리된 균주는 형태학적, 생리학적 및 생화학적 특성을 검토한 결과 Saccharomyces cerevisiae로 동정되어 FF-8로 명명하였다. Glutathione 생산을 위한 Saccharomyces cerevisiae FF-8의 최적 생산조건은 YM(glucose 1.0%, acid peptone 0.5%, yeast extract 0.3%, malt extract 0.3%) 배지를 기본으로 하여 72시간 동안 진탕배양하면서 검토하였다. Glutathione 생산을 위한 최적 온도, 교반속도 및 pH는 각각 3$0^{\circ}C$, 100 rpm, 그리고 pH 6.0으로 나타났다. Glutathione 최대 생산배지조건은 탄소원으로 3%의 glucose, 질소원으로 3%의 yeast extract, 무기질원으로 0.06%의 KH$_2$PO$_4$및 전구체로 0.06%의 L-Cysteine으로 하였을 때 최대 생산량을 나타내었고, 최적 배지상에서 204$\mu\textrm{g}$/$m\ell$을 생산하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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