청주의 주질을 향상시키기 위한 전보의 연구에서, 유용효모로서 분리된 균주에 대하여 균학적 성질을 조사하고, 일부의 사항에 대하여는 일본청주효모와 그 특성을 비교하였다. 분리효모 KP-16, KP-21 및 KP-54 균주는 모두 saccharomyces cerevisae로 동정되었고, TTC 염색성이 pink계이었다. 맥아즙 배지에서의 피막(被膜) 형성능은 KP-16 및 KP-21 균주는 약하였으나, KP-54균주는 강하였다. 당의 발효성과 탄소원의 자화성은 KP-16과 KP-21 균주는 동일하였고, KP-54 균주는 다소 달랐다. 분리효모는 모두 ${\alpha}-methyl-D-glucoside$를 발효도 자화도 하지 못하였으며, 이는 현재 사용되고 있는 일본청주효모와 다른 점 중의 하나였다. 비타민 요구성에 있어서 분리균주는 모두 biotin과 pantothenate를 요구하였으며, biotin을 요구하는 점은 일본청주효모와는 다른 특성이었다. 내알코올성은 분리균주 모두 일본청주효모 K-7및 K-9균주보다 강하였다.
비가열 살균 기술 중 본격적인 상업적 실용화를 눈앞에 두고 있는 고전압 펄스 전기장에 의한 미생물의 사멸 기작에 대해 살펴보았다. 세포 현탁액을 고전압 펄스 전기장 처리하였을 경우 처리 시간이나 전기장의 세기가 증가할수록 세포 외액으로 세포내 물질의 유출이 증가하였으며, 세포막 투과성의 변화로 인하여 $K^+$, $Na^+$등이 이온 성분의 유출도 나타났다. 염색시약에 의한 세포의 염색에서 처리시간이 증가함에 따라 염색되는 세포의 수가 증가하였으며, 전자현미경에 의한 세포의 관찰 결과 고전압 펄스 전기장 처리를 받은 세포의 경우 처리 받지 않은 것에 비해 표면이 거칠고 굴곡이 있었으며, 세포막이 터져 세포내 물질이 외부로 유출되고 형태가 일그러진 것이 관찰되었다. 항생물질 첨가에 따른 회복 실험에서 고전압 펄스 전기장 처리에 의해 세포의 단백질 합성 체계에 손상을 입었으며, chromosomal DNA의 분리를 통한 DNA의 손상여부 관찰 결과 약 27.3%의 DNA의 손상이 발생했음을 알 수 있었다. 따라서 고전압 펄스 전기장 처리가 세포벽이나 세포막의 손상뿐만 아니라 대사 체계와 DNA에도 손상을 주는 것을 확인할 수 있었다.
본 연구에서는 가장 대중적인 한국의 전통주 막걸리의 제조과정이 기능성 분획에 미치는 영향을 확인하고자 하였다. Saccharomyces cerevisae 균주별, 발효온도별, 발효기간별로 다르게 만든 막걸리로부터 ethanol 침전법을 이용해 crude polysaccharides(CP-M)를 분리하여 peritoneal macrophage 활성화 효과와 세포 배양액 중의 interleukin(IL)-6와 -12 농도에 미치는 영향을 조사하였다. S. cerevisae 89-1-1, 98-2, 268-3, 113-4의 4가지 효모 중 S. cerevisae 113-4로 발효한 CP-M을 peritoneal macrophage에 $10{\mu}g/mL$ 처리했을 때 세포 배양액 중 nitric oxide(NO) 농도 $33.3{\mu}M$로 가장 높았으며, IL-6와 -12의 농도 역시 116.3 pg/mL와 59.8 pg/mL로 가장 높게 나타났다. S. cerevisae 113-4를 접종하여 온도별로 발효한 발효물에서 분리한 CP-M 중 $25^{\circ}C$에서 발효 후 얻은 CP-M을 peritoneal macrophage 세포에 처리했을 때, NO 농도가 Control 대비 2.7~3.3배, IL-6 농도는 5.7배까지 증가하였다. 그러나 15, 20, $30^{\circ}C$에서 발효하여 얻은 CP-M의 경우 peritoneal macrophage의 NO와 IL-6 생성량에는 Control(무처리구)과 비교하여 영향이 없었다. 발효기간별 영향을 관찰한 결과 5일째 술덧에서 분리한 CP-M에 의한 NO 생성량이 가장 높아 0일째 MCP에 비해 2.2배 증가하였다. 그러나 급격하게 IL-6와 -12의 농도가 감소한 10일째 MCP를 제외하고는 발효기간에 따른 IL-6와 -12의 유의적인 농도 차이는 없었다. 이상의 결과에서 가장 활성이 좋은 발효 조건은 S. cerevisae 113-4를 접종하여 $25^{\circ}C$에서 5일간 발효시킨 술덧의 CP-M이었다. 이때 CP-M의 조성은 neutral sugar 함량 78.6%, acidic polysaccharide 11.6%, 단백질 9.8%였다. 특히 neutral sugar의 구성당 비율은 mannose 47.8 mole%, glucose 29.6 mole%, galactose 12.7 mole%였다. 이상의 결과에서 면역증강 활성이 있는 기능성 조다당 CP-M은 mannose 함량이 높은 yeast 유래의 extracellular polysaccharide로 추정하였다.
In order to develop a pumpkin wine, the brewing conditions and sensory evalution of the wine were studied. The pumpkin can be made into wine by ethanol fermentation with Saccharomyces cerevisae. When the mash was adjusted 15aA pumpkin and 25% sugar and fermented for 15 days, the product was highly evaluted in color, flavor and taste. Contents of the refined pumpkin wine were 80mg/ml of total sugar, 70mg/ml of reducing sugar, 2.1 of acidity and 12% of ethanol, and it's pH was 3.6.
본 연구는 종이 다른 여러 가지 미생물을 사용하여 음식물쓰레기 침출수의 악취저감 효과를 가지는 균주를 선별하고자 실시하였다. 침출수에 전배양한 해수미세조류인 Spirulina plantensis 와 Chlorella vulgaris, 효모 Saccharomyces cerevisae와 세균인 Bacillus cereus를 각각 10% 주입하여 총 10일간 배양하였다. 72시간 주기로 pH와 염도, 관능검사를 시행한 결과, pH는 초기에 3.5~4.0 값을 보였으나 시일이 경과함에 따라 4.9~7.4 수준까지 증가하였고, 염도는 Chlorella vulgaris와 Spirulina platensis는 급격히 낮아졌다. 관능평가를 통한 악취시험 결과 광합성 미세조류인 Chlorella vulgaris가 발효 종료일인 10일째 거의 취기를 느낄 수 없는 악취도 1을 나타내어 악취제어에 효과가 있는 것으로 나타났다.
The ohmic heating of foods for sterilization provides a shorter come-up time compared to conventional thermal processes. The electric fields as well as the heat generated by ohmic heating facilitate germicidal effects. In the present study, the effect of ohmic heating on the structure and permeability of the cell membrane of yeast cells, Saccharomyces cerevisae, isolated from Takju (a traditional Korean rice-beer), was investigated. The ohmic heating was found to translocate intracellular protein materials out of the cell wall, and the amount of exuded protein increased significantly as the electric field increased from 10 to 20 V/cm. As higher frequencies were applied, more materials were exuded. Compared to conventional heating, more amounts of proteins and nucleic acids were exuded when these cells were treated with ohmic heating. The molecular weights of the major exuded proteins ranged from 14 kDa to 18 kDa, as analyzed by Tricine-SDS PAGE. A TEM study also confirmed the leakage of cellular materials, thus indicating irreversible damage to the cell wall by ohmic heating. It was, therefore, concluded that the electric fields generated by ohmic heating induced electroporation, causing irreversible damage to the yeast cell wall and promoting the translocation of intracellular materials.
In order to maximize the secretory expression of human serum albumin (HSA) in the yeast Saccharomyces cerevisiae, a series of HSA expression vectors were constructed with a combination of different promoters, 5' untranslated regions (5'UTR), and secretion signal sequences. The expression vector composed of the galactose-inducible promoter GALl0, the natural 5'UTR, and the natural signal sequence of HSA directed the most efficient expression and secretion of HSA among the constructed vectors when introduced into several S. cerevisiae strains. Although the major form of HSA expressed and secreted in the yeast transformants was the mature form of 66 kDa, the truncated form of 45 kDa was also detected both in the cell extract and in the culture supernatant. The level of the intact HSA protein in the culture supernatant reached up to 30 mg/l at 24 h of cultivation in a shake-flask culture but began to decrease afterwards, indicating that the secreted HSA protein was unstable in a prolonged culture of yeast.
Optimization of initial total sugar concentration of sweet sorghum juice, aeration time and aeration rate on ethanol production was performed by response surface methodology (RSM). The optimum conditions for ethanol production from concentrated sweet sorghum juice were determined as follows: initial total sugar concentration, 21.2 Brix; aeration time, 7.66h; aeration rate, 1.22 vvm. At the optimum conditions, the maximum ethanol yield was predicted to be 91.65% by model prediction. Similarly, 92.98% of ethanol yield was obtained by verification experiment using optimum conditions after 48 h of fermentation. This result was in agreement with the model prediction.
멥쌀식혜에 Saccharomyces cerevisae를 가해 28$^{\circ}C$에서 10일간 발효시켜서 식혜주를 제조하였다. TLC 및 HPLC 분석 결과 발효에 따라 글루코오스는 하루, 말토오스는 4일, 말토트리오스는 6일까지만 존재하였다. 그러나, 분자량이 큰 말토올리고당과 한계덱스트린은 발효되지 않았다. 에탄올은 6.5%를 나타냈다. 식혜주의 아미노산 함량은 2.9$\mu$mol/ml, 단백질 함량은 457$\mu\textrm{g}$/ml를 나타냈다. pH는 3.67, 산도는 3.1ml를 나타냈다. 한계덱스트린은 1H-NMR로 분석 결과 식혜에 존재하는 것과 구조상 변화가 없었다. $\alpha$-1,4-결합에 대한 $\alpha$-1,6-결합의 비율도 5.6:1을 나타냈다. 관능검사 결과, 맛은 와인과 비슷하였다.
Swimming enhancing effects of ssanghwatang fermented with Saccharomyces cerevisae in mice were investigated, and then the blood biochemical parameters related to fatigue were measured. Compared to the control group, the swimming time was significantly increased in fermented ssanghwatang (FST) group from day 4 ($29.27{\pm}4.73$ vs. $50.27{\pm}9.05\;min$, p<0.05). The lactate level, an important indicator of fatigue, was drastically lower in FST group than in control group ($2.13{\pm}0.13$ vs. $1.40{\pm}0.12\;mmole/L$, p<0.01). These results suggest that FST possesses stimulatory effects which can enhance exercise performance and reduce fatigue.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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