• 미생물학회지
• /
• 제26권3호
• /
• pp.162-166
• /
• 1988

Bacteriophage M13 DNAs carrying the wild type or base substituted SV40 DNA replication origins were used for replication assay. In vivo and in vitro assay with African green monkey cell line COS-1 showed that the replication of M13-SV40 recombinant DNAs was restricted like a pBR322 SV40 recombinant DNA(Lusky and Botchan, 1981). Furthermore, recombinant phage DNAs isolated from the transfected siminan cells subsequently show a reduced ability to retransform E. coli. But pATSV-W(Kim et al., 1988) was replicated in COS-1 cells normally. We think that a poison sequence may exist on bacteriophage M13 DNA like pBR322.

• 약학회지
• /
• 제43권5호
• /
• pp.623-628
• /
• 1999

DA-125, a new antitumor agent, was compared with adriamycin, a known DNA intercalator, in terms of inhibitory mechanism of DNA replication by using replicating simian virus 40 (SV40) genome in vivo. In analyzing the SV40 DNA replication intermediates present in cells treated with DA-125, it was not observed to accumulate B-dimers of SV40 DNA which are prominent in adriamycin-treated cells. However, treatment with DA-125 induced dose-dependent formation of DNA-topoisomerase complex which is characteristic of topoisomerase poisons. In addition, DA-125 showed more efficient in inhibiting SV40 DNA replication than adriamycin. Therefore, on the basis of this observation, we suggest that DA-125, a derivative of adriamycin, inhibits DNA replication by blocking topoisomerase activity as a toposomerase poison although adriamycin blocks topoisomerase activity as a DNA intercalator.

• 한국동물학회지
• /
• 제28권3호
• /
• pp.166-178
• /
• 1985

한국형 B형 간염바이러스(HBV) DNA의 표면항원 유전자를 포유동물 세포에서 발현시켜 항원의 검출과 유전자의 분자유전학적인 연구를 하기 위하여 pre-surface antigen 지역과 표면항원 유전자 그리고 poly(A) addition site가 포함된 DNA 조각을 simian virus 40(SV 40)의 DNA 복제 원점과 promoter가 포함된 유전자 운반체에 재조함 시켰다. 우선, HBV DNA가 들어있는 pHBV 107을 Bam HI으로 부분절단한뒤 self-ligation시켜 두 HBV DNA가 같은 방향으로 들어간 pHBVD 107을 만들었다. 이 plasmid를 Bgl II로 절단하였을때 pre-surface지역과 표면항원 유전자 그리고 poly(A) addition site가 함께 포함된 2.7 kb의 insert DNA 조각을 얻었다. 유전자 운반체로는 포유동물세포에서 복제할 수 있도록 하기 위하여 SV40의 DNA 복제 원점부위와 72 bp repeats(enhancer)가 포함된 pSVOE를 만든다음 이 vector의 Pvu II 절단자리에 Bam HI linker를 붙여 insert DNA가 vector의 SV40 late promoter지역 가까이에 들어갈 수 있도록 변형시킨 pSVOB를 만들었다. 이상과 같이 만들어진 pre-surface 지역-표면항원유전자-poly(A)-addition site가 포함된 2.7 kb DNA 절편을 pSVOB promoter 뒤의 Bam HI site에 삽입하여 재조합된 plasmid pSVBS를 얻었다. 예비실험으로 pSVBS를 T-antigen이 생산되는 COS cell에 이주시켰더니 $HB_sAg$가 발현됨을 보았다.

• 생명과학회지
• /
• 제11권4호
• /
• pp.371-378
• /
• 2001

The effects of the RM 60 series on DNA replication systems were examined by using simian virus 40 (SV40) DNA replication system in vitro. The RM 60 series inhibited the DNA replication in the initiation step rather than in the elongation step. Polymerase$\alpha$-primase activity and toposiomerase I activity study were performed subsequently, the RM 60 seies increased the polymerase $\alpha$-primase activity in a low dose, but decreased the activity in a higher dose. The topoisomerase I activity was inhibited by the RM 60 series. This result suggests that the RM 60 series might inhibit some molecules which are required to establish replication forks during the initiation step of the DNA replication.

• 대한화학회지
• /
• 제46권2호
• /
• pp.151-156
• /
• 2002

Fucoidan은 갈조류에 다량 함유되어있는 다당류로서 항암작용, 항혈응고작용, 항혈전작용, 항염증작용, 항virus작용과 같은 생리활성작용력을 가지고 있어 최근 많은 연구가 수행되어지고 있다. 본 논문은 갈조류에서 fucoidan을 추출 하여 그 항암활성을 SV40 DNA replication assay, RPA-ssDNA binding assay, 그리고 MCF7 cell growth inhibition assay를 이용하여 알아보았으며 이 항암활성은 fucoidan의 황산기가 중요한 역할을 하고 있음을 알아내었다. 화학적으로 황산기의 함유량을 증가시킨 fucoidan이 황산기의 함유량을 제거시킨 fucoidan보다 항암활성이 뛰어났고, 이는 RPA의 ssDNA 결함력을 떨어 EM리기 때문이라 예측되어 진다. 본 연구는 한국산 갈조류에서 추출한 황산기를 함유한 fucoidan의 항암활성능력을 보여주었다.

• 미생물학회지
• /
• 제35권3호
• /
• pp.218-225
• /
• 1999

Aspergillus nidulans 의 DNA 로부터 Saccharomyces cerevisiae에서 스스로 복제가능하고, 형질전환율도 삽입벡터에 비해 10\sup 4\ 배정도 높여주는 절편을 분리한 바 있다. A. nidulans에서 ANRI 의 일부를 포함한 pILJ16-4.5는 삽입벡터인 pILJ16보다 170배 정도 높은 형질전환 효율을 보였으며, S.cerevisiae와 마찬가지로 plasmid 상태로 회수가능했다. A.nidulans 페소내에서 2-3 copy 정도로 염색체와는 별개로 존재하는 것으로 나타났으며, 재형질전환능력도 있었다. ANRI은 미토콘드리아의 DNA에서 유래한 절편으로 밝고, ARS 공통절편과 유사한 절편도 11곳에 존재한다. $\Phi$X174와 SV40 DNA에서 gyrase 가 결합하는 부위의 공통편인 YRTGNYNNY도 6곳에 존재하며, ColE1에서 gyrase가 결합하는 b site와 일치하는 절편도 하나 포함하고 있으며, ABF1 결합 부위이 공통절편과 유사한 절푠$TCN_7ACG$ 도 하나 포함하고 있다. 이를 토대로 ANRI은 A.nidulans의 형질전환 후 회수가 가능한 replicating vector 개발에 이용할 수 있다.