• 제목/요약/키워드: SSCP

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PCR-SSCP 분석법에 의한 뽕나무 오갈병 파이토플라스마의 유전변이 검출기법 (Detection method of Genetic Variation of Mulberry Dwarf Phytoplasma by PCR-SSCP Analysis)

  • 한상섭;차병진;성규병
    • 한국산림과학회지
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    • 제95권6호
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    • pp.631-635
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    • 2006
  • 파이토플라스마 증폭 primer, R16F2n/R2를 이용하여 뽕나무 오갈병 파이토플라스마와 대추나무 빗자루병 파이토플라스마에 대하여 SSCP분석법을 이용하여 염기변이 분석을 하였다. 그 결과 뽕나무 및 대추나무 파이토플라스마는 약 1.2 kb PCR 산물을 이용하더라도 뚜렷한 밴드차이를 나타내었다. 유사한 SSCP밴드 패턴을 보이는 두 시료 간의 밴드형태를 뚜렷하게 구별하는 방법을 찾기 위하여 뽕나무 오갈병 파이토플라스마와 대추나무 빗자루병 파이토플라스마의 PCR산물을 혼합한 후 SSCP분석 결과, 전기영동상에서 대추나무 파이토플라스마와 뽕나무 파이토플라스마의 SSCP 밴드패턴 모두를 관찰할 수 있었다. 본 연구 결과, 기존에 약 600bp 크기로 한정된 것으로 알려진 SSCP 분석을 PCR 산물 1.2 kb을 이용하여 유사한 SSCP 밴드패턴을 보이는 두 시료간의 밴드형태를 두 시료의 PCR 산물을 혼합하여 SSCP분석함으로써 뚜렷하게 구별할 수 있었다.

SSCP기법에 의한 뽕나무오갈병 파이토플라스의 유전적 다형성 분석 (Genetic Diversity of Mulberry Dwarf Phytoplasma(MD) by SSCP Technique)

  • 한상섭
    • 한국산림과학회지
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    • 제102권2호
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    • pp.223-228
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    • 2013
  • 파이토플라스마 증폭 프라이머, P1/P7 및 R16F2n/R2를 이용하여 뽕나무 품종 42개체에 대하여 뽕나무오갈병 파이토플라스마의 전염여부를 조사한 결과 공시 모두에서 파이토플라스마가 검출되었다. 뽕나무오갈병 파이토플라스마 단일염기변이를 SSCP분석기법을 응용하여 분석조건을 조사한 결과 P1/P7(약 1.8 kb) 및 R16F2n/R2(약 1.2kb)로 증폭한 PCR산물에서는 6% polyacrylamide gel 농도, 150V, $10^{\circ}C$의 전기영동 조건에서 SSCP밴드패턴이 나타났다. 유사한 SSCP밴드 패턴을 보이는 두 시료간의 밴드형태를 뚜렷하게 구별하는 방법을 찾기 위하여 뽕나무 오갈병파이토플라스마와 대추나무 빗자루병 파이토플라스마의 P1/P7 및 R16F2n/R2 프라이머로 증폭한 PCR산물을 혼합한 후 SSCP분석 결과, 전기영동상에서 대추나무 파이토플라스마와 뽕나무 파이토플라스마의 SSCP 밴드패턴 모두를 관찰할 수 있었다. 본 연구 결과, 기존에 약 600 bp 크기로 한정된 것으로 알려진 SSCP 분석법을 응용하여 파이토플라스마 PCR 산물 1.8 kb 또는 1.2 kb 크기에서도 유사한 SSCP 밴드패턴에 의하여 단일염기변이를 검출할 수 있었다.

PCR-SSCP 분석에 의한 Phytophthora katsurae의 분자생물학적 특성 (Molecular Characteristics of Phytophthora katsurae Using PCR-SSCP Analysis)

  • 이선근;장하나;이동현;이상현;이상용;이종규
    • 식물병연구
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    • 제17권2호
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    • pp.169-176
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    • 2011
  • 우리나라에서 분리한 P. katsurae의 유전적 특성을 구명하기 위하여 국내에서 분리한 P. katsurae를 대상으로 nuclear DNA(nDNA)의 ${\beta}$-tubulin (BTU)과 Elongation facter 1 alpha (EF1A) 그리고 rDNA ITS 부위의 PCR-SSCP 분석을 실시하여, P. katsurae와 Phytophthora 속에 속하는 다양한 종들의 각 부위를 대상으로 유전적 유연관계를 비교분석 하고 동정에 이용하고자 하였다. 각각의 Phytophthora 속에서 변이가 가장 많이 발생하는 부위를 포함하여 증폭 시킬 수 있도록 각 부위의 공통 염기배열로부터 제작된 primer는 Phytophthora 종에 특이적인 반응을 나타냄으로서 동정 및 진단에도 유용하게 활용될 수 있을 것으로 판단되었다. SSCP 분석 결과는 국내 P. katsurae 균주와 공시한 다른 Phytophthora 속 균주들과의 구분이 가능하였으며, Phytophthora 종 간의 구분도 가능하였다. 그러나 한 가지 부위만을 이용한 PCR-SSCP 분석은 Phytophthora 종 간의 구분이 어려운 경우도 있었다. 따라서 보다 정확하고 명확한 Phytophthora 종의 유전적 다양성 분석 및 동정을 위하여서는 단일 부위에 의한 PCR-SSCP보다는 복수 부위에 의한 PCR-SSCP를 실시하는 것이 바람직한 것으로 확인되었다.

SSCP와 DHPLC에 의한 β2-교감신경수용체 유전자의 돌연변이 분석 (Mutation Analysis in β2-Adrenergic Receptor Gene by Single Strand Conformation Polymorphism (SSCP) and Denaturing High Performance Liquid Chromatography (DHPLC))

  • 박상범;한상만;남윤형;장원철
    • 분석과학
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    • 제17권1호
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    • pp.53-59
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    • 2004
  • 현재 일반적으로 많이 사용되는 single strand conformation polymorphism (SSCP)나 denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE)같은 돌연변이 검출법은 많은 시간과 비용, 그리고 노동력이 소모된다는 단점과 실험자의 실험에 대한 숙련도에 의해 실험 결과가 달라지는 한계점을 가지고 있다. 이런 단점들을 보완하기 위하여 ion-pair reversed phase chromatography (IP-RPC)방식을 이용한 denaturing high performance liquid chromatography (DHPLC)방법을 사용하여 기관지 천식 (bronchial asthma)을 조절하는 베타2-교감신경수용체 유전자의 돌연변이를 검출하였다. 80명의 천식 환자의 혈액에서 genomic DNA를 추출하여 중합효소연쇄반응 (polymerase chain reaction)을 이용해 증폭하고, 그 산물을 SSCP와 DHPLC로 분석하였다. 그 결과, 베타2-교감신경수용체 유전자에서 SSCP는 80명의 sample 가운데 19개 (23.75%)의 돌연변이를 검출하였고, DHPLC는 25개 (31.25%)의 변이를 검출하였다. 돌연변이 검출법으로 DHPLC 분석법이 SSCP보다 더 빠르고 효과적인 방법임을 확인하였다.

venture portfolio-SSCP 오주언 대표

  • 김윤희
    • 벤처다이제스트
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    • 통권102호
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    • pp.12-15
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    • 2007
  • 색감이 고급스러운 휴대폰, 백색을 탈피한 냉장고, 세계인이 쓴다는 MP3플레이어, 눈이 피곤하지 않은 PDP TV, 머리 아픈 냄새가 나지 않는 자동차. 이 제품들의 공통점은 무엇일까. 바로 기술과 디자인, 친환경 제품으로 보이지 않는 곳에서 우리의 삶을 풍요롭게 만드는 SSCP의 제품이다. 30여 년이 넘는 시간동안 특수 도료라는 분야에 뿌리를 내리고 성장해 온 SSCP. 그리고 그 뿌리 깊은 나무를 가꿔온 SSCP 오주언 회장. 그에게서 진정한 벤처정신을 들어본다.

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대장암에서 PCR-SSCP와 DHPLC를 이용한 p53 돌연변이의 검출 (Detection of p53 Mutation in Colorectal Cancer Using PCR-SSCP and DHPLC)

  • 박상범;한상만;남윤형;장원철
    • 대한화학회지
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    • 제47권5호
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    • pp.460-465
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    • 2003
  • p53 유전자의 변이는 다양한 인체암 중 가장 일반적인 유전자적 변화로 알려져 있으며, 양성에서 악성 대장암으로 전이되는 과정에서 연관이 있는 것으로 알려져 있다. 본 연구에서는 PCR-SSCP와 DHPLC를 이용하여 대장암 환자의 조직에서 p53 유전자의 엑손 5-8에서 돌연변이를 분석하였다. SSCP에서는 50개의 샘플중 엑손 5에서 C13109>T 형태의 돌연변이가 7례가(14%) 발견되었고, DHPLC에서는 C13109>T 7례와 C13202>A, C13204>G 형태의 돌연변이 2례, 모두 9례의(18%) 변이가 검출되었다. DHPLC 분석법을 이용하여 SSCP에서 발견하지 못했던 2례(4%)의 변이를 더 발견하였다. 최종적으로 염기서열분석법을 통해 위의 결과를 확인하였고, p53 돌연변이 검출법으로 SSCP보다 DHPLC가 더 감도가 좋고 효과적인 검출법임을 확인하였다.

Comparison of viral population of pathologically and geographically different areas of Southern provinces and Jeju, Korea

  • Kim, Daehyun;Hyekyung Shim;Jaewook Hyeon;Kim, Kwangsik;Lee, Sukchan
    • 한국식물병리학회:학술대회논문집
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    • 한국식물병리학회 2003년도 정기총회 및 추계학술발표회
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    • pp.123.1-123
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    • 2003
  • The objective of this work was to analyze the population of sequence variants of citrus tristeza virus (CTV) isolates in Korea and to make the phylogeny trees of CTV in Korea. We also tried to analyze and find the mild strain of CTV to apply for the cross protection. The CTV isolates from yuzu (C. Junos) collected from different geographic areas of Southern provinces such as Namhae-Do, Kerche-Do, Bosung, Wan-Do and Koheung and Jeju-Bo, Korea were used for SSCP analysis. The SSCP profiles of the cDNAS obtained by RT-PCR with primers specifically designed for the p20 of the CTV population. The SSCP profiles obtained from 150 PCR products in yuzu contained two or three DNA bands, whereas, in some case, others contained four or more bands of similar intensity. The pathologically mild isolates of CTV usually yielded two DNA bands by SSCP profiles, whereas the SSCP profiles of the most virulent isolates contained more than two DNA bands. Plants shown severe stem pitting were corresponded to those plants with typical SSCP profiles of severe strains, and vice versa. This results indicate that the primers designed for SSCP analysis can be used for distinguishing the mild strains from severe strains of CTV.

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무선 스트리밍 QoS를 위한 이득 기반 세그먼트 캐싱 (Profit-based Segment Caching for Wireless Streaming QoS)

  • 이종득
    • 한국항행학회논문지
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    • 제16권3호
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    • pp.463-470
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    • 2012
  • 본 논문에서는 무선 채널 상에서 연속적인 스트리밍 QoS 보장을 위한 새로운 이득 중요도 기반의 세그먼트 캐싱 제어 메커니즘을 제안한다. 제안된 기법은 QoS (Quality of Service)보장을 위해 SSCP (Single Segment Caching Profit)와 MSCP (Multiple Segment Caching Profit)에 의해 캐싱 제어를 수행한다. 이들 SSCP와 MSCP 캐싱 제어는 프록시에서 스트리밍이 수행될 때 캐시의 성능을 최적화하기 위한 것이다. 제안된 기법의 성능을 알아보기 위하여 본 논문에서는 고정 분할 기법, 임계값 기반 기법, SSCP와 MSCP의 성능을 비교하였으며, 그 결과 제안된 기법이 다른 기법들에 비해서 성능이 우수함을 보인다.

두경부 종양에서 DHPLC를 이용한 p53체세포 돌연변이 검출 연구 (Analysis of p53 Somatic Mutation in Head and Neck Cancer Using Denaturing High Performance Liquid Chromatography(DHPLC))

  • 김광열;박상범;한상만;남윤형;장원철
    • 대한화학회지
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    • 제48권1호
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    • pp.33-38
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    • 2004
  • 두경부 편평 세포암종(HNSCC: head and neck squamous cell carcinoma) 의 발생과 관련하여 p53 종양 억제 유전자 (tumor suppressor gene) 의 돌연변이는 높은 비율로 나타나는 것으로 보고 되고 있다. 단국대학교 병원에서 두경부 종양으로 진단 받고 수술 받은 환자의 조직 50개를 대상으로 p53 종양 억제 유전자의 exon 5-8 까지의 영역에서 DNA를 추출하여 PCR-SSCP(polymerase chain reaction single strand conformational polymorphism) 방법과 DHPLC(denaturing high performance liquid chromatography) 방법으로 p53체세포 돌연변이(somatic mutation)를 비교 분석하였다. 그 결과 SSCP 분석 방법은 16개(32%), DHPLC 분석 방법은 17개(34%) 를 검출하였고 그 중 SSCP와 DHPLC 분석 방법 모두 exon 8번에서 결실(deletion) 형태의 돌연변이를 확인하였으며 최종적으로 자동 염기 서열 분석기(automatic DNA sequencer) 를 통하여 모든 돌연변이를 확인하였다. DHPLC 분석방법이 SSCP 방법보다 분석 시간이나 노력이 덜 소모되며 보다 더 정확한 돌연변이 검출 방법임을 확인하였다.

Genetic Differentiation of Phytoplasma Isolates by DNA Heteroduplex Mobility Assay and Single-Strand Conformation Polymorphism Analysis

  • Cha, Byeongjin;Han, Sangsub
    • The Plant Pathology Journal
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    • 제18권6호
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    • pp.308-312
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    • 2002
  • Heteroduplex mobility assay (HMA) and single-strand conformation polymorphism (SSCP) analyses combined with PCR were developed for genetic differentiation of various phytoplasma isolates. In the HMA and SSCP analyses, differences in the mobility shifts and the SSCP band patterns identified three distinct types of phyto-plasmas: Type Ⅰ, jujube witches'-broom (JWB) and ligustrum witches'-broom (LiWB); Type Ⅱ, mulberry dwarf(MD) and sumac witches'-broom (SuWB); and Type Ⅲ, paulownia witches'-broom (PaWB). Results of the sequence analyses revealed that phytoplasmas of JWB and MD had 100% homology with LiWB and SuWB, respectively. On the other hand, PaWB phyto-plasma had 97.8% homology with MD phytoplasma. The PCR-HMA and SSCP techniques were very useful in determining variations in sequence among several isolates of phytoplasmas. Furthermore, the methods were rapid, economical, highly sensitive, and easy to handle with the gels.