본 연구에서는 SE에 특이적인 박테리오파아지($CJ{\phi}07$)의 사료 및 음수 투여가 어린 병아리의 SE 감염에 따른 장내 균증식과 체외 균배출에 미치는 영향을 평가하고자 실시하였다. 박테리오파아지를 투여한 SPF 병아리에 SE균을 공격 접종 한 뒤, 공격 접종 10일 후 채취한 맹장 분변에 존재하는 SE균 수를 측정한 결과, 박테리오파아지를 투여한 병아리의 맹장 분변 내 SE균 수는 양성 대조군에 비하여 유의성 있게 감소하였다(P<0.05). 또한, 공격 접종 10일 후 사육 시설 표면의 SE균 오염도를 측정한 결과, 박테리오파아지를 투여한 그룹의 사육 시설에서 채취한 환경 시료의 SE균 오염율(50%)이 박테리오파아지를 투여하지 않은 그룹의 SE균 환경 오염율(100%)에 비하여 감소되는 것을 통해 박테리오파아지 $CJ{\phi}07$에 의한 장내 균 증식과 체외 균 배출 억제 효능이 확인되었다. 따라서 박테리오파아지 $CJ{\phi}07$는 항생제 대체 물질로서 가금에서의 SE 감염을 효과적으로 방어할 수 있을 것으로 판단된다.
본 시험의 목적은 국내에서 분리된 강병원성 뉴캣슬병 바이러스를 SPF(specific pathogen free)닭에 접종을 하여 병리학적 변화와 각 조직내의 뉴캣슬병 바이러스 항원의 분포를 조사하여 국내분리 바이러스들간의 조직내 친화성을 비교함으로써 분리 바이러스간 병리학적 차이점을 규명하는 것이다. 병리학적 검사를 위하여 가능한 대부분의 조직을 채취하였으며 항원검사는 특이성을 높이기 위하여 단클론성 항체를 이용하였다. 검사결과를 요약하면 뉴캣슬병 바이러스를 접종한 모든 닭들은 접종 후 3일부터 폐사가 시작되어 접종 후 9일에 100% 폐사하였으며 대부분의 접종군은 접종후 5일에서 6일 사이에 폐사가 있었으나 8248 계군은 접종후 7일에서 9일 사이에 모두 폐사를 하여 다른 접종군과 확연히 다른 폐사양상을 보였다. 그러나, 폐사한 닭들은 접종 바이러스에 관계없이 임상증상은 비슷하였다. 일반적으로 접종 후 3일이 경과하면 급격한 활동저하와 함께 빈사상태를 보였고 일단 빈사상태까지 진행된 접종 닭은 다시 회복하지 못하였다. 병리조직학적 소견은 과거 연구자들이 강병원성 뉴캣슬병에서 흔히 관찰하였던 장, 기낭, 폐장에서의 출혈소견 들을 발견할 수 있었으며 접종한 바이러스에 따른 병리학적 변화의 차이는 뚜렷하지 않았다. 공통적인 병변으로서 대표적인 것은 면역기관인 F. bursa, 흉선, 비장에서의 탐식세포 및 단핵 세포의 괴사로서 과거의 문헌들에서 기술된 병변과 비교해 볼 때 이 면역기관에서의 괴사소견은 강병원성 뉴캣슬병의 가장 특징적인 조직학적 병변인 것으로 판단된다. 조직병변과 바이러스간의 유기적 관계를 알아보기 위해 면역화학조직검사법(Immuno histo chemistry)이 많이 이용되는데 본 실험에서도 이 방법을 사용하여 국내분리주들간의 조직친화성을 비교하여 보았다.지하였으며 폐사율은 각각 1.9%, 1.9%, 2.9%와 1.0%로써 대조군의 4.8%에 비하여 낮은 수준을 보여 질병에 대한 저항능력이 향상되었다.kg/h로 분석되었다. 6. 건조작업 중에 소요되는 전력은 9.5~19.3 Wh/kg이었으며, 연료효율 6.9~9.3kg-$H_2$O/L와 열효율 50.2~65.1%에 의한 수분증발량은 124.0~125.4 kg-$H_2$O/h 로 나타났다. 7. 건조기의 열효율을 70%를 기준으로 평가한다면, 시작기의 열효율은 조금 낮은 수준이며, 열관리 계통의 개선을 필요로 하였다. 8. 제작된 계분건조기의 시작기를 15,000수 규모의 양계농장에서 사용한다면 관행의 계분처리 방법에 비하여 약 590,700(원/월)의 비용을 절감할 수 있을 것으로 추정되었다.
Renal failure is one of the main causes of economic impacts in the poultry industry and complex syndrome with different severity of clinical signs caused by multiple nephropathogenic factors such as infectious bronchitis viral infection and excess salt and calcium in diet. To evaluate the correlation between severity of renal failure and the causative nephropathogenic factors, one-day-old specific pathogen free chickens were treated with either single causative factor or multiple causative factors described as above. Each group was designed as control for non-treated control, IB for infectious bronchitis virus (IB virus) infection, IBHNa for IB virus infection with high diet salt, IBHCa for IB virus infection with high diet calcium, IBHNC for IB virus infection with high diet salt and calcium, HNa for high diet salt, HCa for high diet calcium and HNC for high diet salt and calcium. Chickens were inoculated with IB virus at 1-day-old and remained on their respective diets until 21 day of age. Plasma $Na^+$, $Cl^-$, BUN, creatinine, calcium and uric acid values were examined. The results obtained were as follows ; IB virus and high dietary calcium combined treatment showed elevated plasma uric acid. BUN and creatinine values were not characteristic on chicken renal failure. But plasma uric acid values were increased according to renal lesion. Hypercalcemia and hyperuricemia did not induce urate deposition and mineralization in the kidney.
To reduce the economic impact and control Low pathogenic avian influenza (LPAI), vaccination with inactivated vaccine has been considered in this country. We tried to develop inactivated vaccine with reassorted H9N3 AI virus which has different type of neuraminidase compare to those of field AI virus. Before reassorted vaccine was produced, we confirm the virus as master seed by limiting dilution, RT-PCR and sequencing method. Also, we evaluate the biological characteristics of the virus to find out the possibility of prevention against field infection of AI virus. Finally, we evaluate the safety and efficacy of the vaccine made of reassorted AI virus in the specific pathogen free (SPF) chickens. After limiting dilution, we choose RV7CE4 as a vaccine candidate and compare the gene sequence of this vaccine strain to those of AI05GA which is parents strain. Compared to amino acid sequences of specific gene of AI05GA and RV7CE4, exhibited a high degree of amino acid sequence homology. In the safety and efficacy test, there were no specific clinical signs or mortality. Reassorted H9N3 viruses were reisolated in cloaca swab on 5 days post inoculation. In the vaccine study, once or twice vaccination was performed and challenged with H9N2 field virus (01310). Vaccine has no adverse effect on birds and formed good immune capability which reduce viral shedding in the birds infected with 01310. Based on the above result, we developed reassorted H9N3 vaccine which will efficiently prevent the low pathogenic AIV (H9N2) infection in the poultry farms.
Low pathogenic avian influenza (LPAI; H9N2) and Newcastle disease (ND) are economically important poultry diseases in Korea. In this study, we investigated pathological features and virus distribution in the lymphoid tissues of chicks experimentally infected with H9N2 and/or ND virus. Six-weeks-old SPF chickens were divided into 4 groups, Control (C), H9N2 (E1), NDV (E2), and H9N2+NDV (E3). E1 group was challenged with 0.1 ml A/Kr/Ck/01310/01 (H9N2) $10^{5.6}$$EID_{50}$ intranasally, E2 group was challenged with 0.5 ml KJW (NDV) $10^{5.0}{\sim}10^{6.0}$$ELD_{50}$ intramuscularly, and E3 group was challenged with H9N2, followed 7 days later by NDV. In histopathological examination, E1 group showed depletion and necrosis in bursa of Fabricius, thymus, cecal tonsil, and spleen, whereas E2 and E3 groups were noted severe lymphocyte depletion and necrosis with destruction of lymphoid organs structures. In TUNEL assay, apoptotic bodies were detected in lymphoid organs of all experimental groups, which was most severe in E3 group. H9N2 and ND viruses were predominantly detected in cecal tonsil of E1, E2, and E3 groups by PCR and immunohistochemistry (ICH). In conclusion, co-infection of H9N2 with NDV caused severe pathologic lesions and apoptosis in lymphoid tissues compared to single infections.
봉입체성 간염-심낭수종증(IBH-HPS)은 주로 육계에서 다발하며 3~6주령의 육계에서 최고 75%까지의 폐사율을 일으킬 수 있는 질병이다. 주 증상으로는 심낭의 황색 수양성 액체가 저류되는 심낭수종증과 함께 봉입체성 간염이 나타난다. 1987년 파키스탄에서 처음 발생이 보고된 후 여러 나라에서 발병되었으며, 최근 우리나라에서도 질병 발생이 확인된 바 있다. 본 실험에서는 IBH-HPS에 대한 경제적 피해를 감소시키기 위한 목적으로 사독 오일 백신을 제조하여 안전성 및 효능을 평가하였다. 2주령의 SPF 닭에 제조한 사독 백신을 1 또는 2수분으로 근육 접종한 뒤 2주 후인 4주령에 FAdV-4로 공격 접종을 실시하였다. 백신 접종에 의한 임상 증상 발현 및 폐사가 관찰되지 않아 백신의 안전성이 인정되었고, AGP 검사를 통해 FAdV-4에 대한 항체가 100% 형성되었음을 확인하였다. 공격 접종 시 각각 경구 또는 근육으로 접종하였고, 접종 후 10일간 관찰한 결과, 백신 접종군 모두 부검 소견, 바이러스 유전자 검색율 및 조직학적 병변도에 있어서 효능이 인정되었다. 육안 병변의 경우, 백신 비접종군에서는 간의 괴사 반점이 10~50%의 개체에서 발생한 데 비해 백신 접종군에서는 관찰되지 않았다. 바이러스 유전자 검색 양성률 또한 백신 접종군이 백신 비접종군에 비해 낮은 수준으로 나타났으며, 이는 특히 근육 투여군에서 더 명확하게 나타났다. 조직 병변도는 관찰 기간 내내 핵내 봉입체는 관찰되지 않았으나, 림프구 침윤 및 간세포의 괴사 정도가 백신 접종군에서 현저히 감소한 것을 확인할 수 있었다. 따라서, 본 실험에서 제조한 FAdV-4 사독 오일 백신은 실험계에 임상적으로 안전하고 면역원성도 높았으며, 효능에 있어서는 백신 비접종군에서의 임상 증상이 명확하지 않았음에도 불구하고, 육안 병변, 바이러스 검색율 및 조직 병변도에 있어서 공격 접종에 대한 방어가 효과적인 것으로 판단된다.
Renal failure is one of the main causes of economic impacts in the poultry industry and complex syndrome with different severity of clinical signs caused by multiple nephropathogenic factors such as infectious bronchitis viral infection and excess salt and calcium in diet. To evaluate the correlation between severity of renal failure and the causative nephropathogenic factors, one-day-old specific pathogen free chicks were treated with either single causative factor or multiple causative factors described as above. Each group was designed as control for non-treated control, IB for infectious bronchitis virus (IB virus) infection, IBHNa for IB virus infection with high diet salt, IBHCa for IB virus infection with high diet calcium, IBHNC for IB virus infection with high diet salt and calcium, HNa for high diet salt, HCa for high diet calcium and HNC for high diet salt and calcium. Chickens were inoculated with IB virus at 1-day-old and remained on their respective diets until 21 day of age. The high dietary salt feeding groups such as IBHNa, IBHNC, HNa, HNC increased water intake, watery diarrhea, general subcutaneous edema and the high dietary calcium feeding groups such as IBHCa and IBHNC showed severe visceral gout. Two more than treated groups caused high mortality in comparison with the single treated groups. IB virus exposure significantly increased urate deposition and lymphocytic interstitial nephritis. Especially urate deposition dramatically increased when excess diet calcium was combined together. In excess diet salt treated groups enlarged edematous kidneys were observed and hypertrophy of glomeruli were showed. These results suggest that IB virus enhanced the incidence and severity on chicken renal failure clearly related to the quantity of salt and calcium.
To isolate Lactic acid bacteria for animals, we have screened from Kim-chi, swine intestine, swine feces, and dairy products by random selection and anti-viral, antipathogenic bacteria test. Among them, CLP-1 shown that inhibitory effect against rotavirus, porcine epidemic diarrhea (PED) virus, Salmonella sp, and E.coli. By examining biological property, API-ZYM and identified Lactobacillus plantarum by 16S rDNAgene sequence. CLP-1 determined resistance to low pH and bile salt. Futhermore, the cell body of CLP-1 adhered to the intestinal epithelium tissue of swine and Caco-2 cell. CLP-1 was examined on cell immune system modulating activity in vitro. The whole cell and cell culture supernatant was increasing of interferon-${\beta}$ activity. And then, CLP-1 increased prevention effect by Salmonella enteritidis infection in SPF chickens. And we determined similar result in pigs.
Avian paramyxovirus (APMV) type 4 and 6 were isolated during an avian influenza (AI) surveillance program of wild birds. This study also conducted experimental infection of wild-bird-origin APMV type 4 and 6 in specific pathogen free (SPF) chickens to study pathogenicity and transmission within domestic flocks. In addition, serological prevalence data of APMV type 4 and 6 in domestic fowls was conducted with chicken sera collected from 2007 to 2009 in order to understand infection status. The results of the animal experiment showed that APMV type 4 and 6 had the ability to infect chickens with sero-conversion and to transmit the virus from infected birds to contacted birds, but showed low pathogenicity. Serological tests revealed that APMV type 4 was widespread in the poultry industry, especially in layer flocks, but the positive rate for APMV type 6 was very low. This study concluded that wild bird-origin APMV type 4 and 6 could infect the chickens by inter-species transmission and the seroprevalence of APMV type 4 was quite high in Korean poultry. However, since almost all the chicken flocks had a high level of antibody titer against APMV type 1, there was possibility of cross reaction between APMV type 1 and 4, which made the interpretations more complicated. In order to understand infection status in the natural environment, additional study is necessary regarding the seroprevalence of APMV type 4 and 6 in the wild bird population.
우리나라 육계산업을 저해하는 중요한 질병중의 하나가 닭의 맹장콕시듐증이다. 그 병원체는 Eimeria tenella로서 병아리에 감염하면 증체저하와 폐사율이 높기 때문에 양계농가에 커다란 경제적 손실을 준다. 닭의 맹장콕시듐증을 효과적으로 관리하기 위하여 몇가지 예방백신의 개발을 시도하여 왔으며 근래에는 재조합 DNA기법을 이용, Escherichia coli를 매체로 제조한 항원으로 닭에 방어력을 부여시키고자 하는 방법과 조기발육형원충의 작출법에 의하여 생산된 약독원충으로 면역을 부여하는 방법 등에 관한 연구를 진행하고 있으나 아직 만족할만한 성과를 이루지 못하였다. 본 시험에서는 약독원충을 이용하여 닭 맹장콕시듐증에 대한 저항성을 부여하고자 하였다. 콕시듐증의 병원체인 E tenella에 Cobalt-60 감마선을 조사한 원충 또는 그 원충을 SPF병아리에 계대증식시켜 회수한 오오시스트로 병아리에 접종하고 체내발육상태와 병원성을 조사하였으며, 면역접종한 후 병원성이 강한 원충의 공격접종에 대한 방어효과를 관찰한 성적은 다음과 같다. 원충감염 닭의 생잔율, 증체량, 혈변도 및 병변도 등에 대한 효과에서 감마선 100Gy로 조사한 E tenella를 접종한 것이 가장 좋았으며, 접종량은 1대 계대한 오오시스트 약 10,000개를 접종한 것이 좋았다. 면역접종한 후 공격접종한 결과 계대원충접종군은 혈변도 및 병변도가 낮게 나타났으며, 최대 오오시스트 배설수(OPG)는 103,900으로서 공격접종대조군의 1,658,900에 비하여 현저하게 낮았으나 적혈구용적율은 계대원충접종군이 가장 높았다. 공격접종한 닭의 1주 및 2주 후의 증체량은 계대원충접종군이 2.6g 및 155.4g으로서 공격접종대조군의 -85.8g 및 63.6g보다 좋았으며, 사료요구율도 계대원충접종군이 3.28로서 공격접종대조군의 5.60보다 낮았다. 생잔율은 계대원충접종군이 100%로서 공격접종대조군의 87.0%와 비교하면 방어효과가 있었다. 계대원충접종군의 항콕시듐 지수는 70.5로서 공격접종대조군의 -81.9에 비하면 현저하게 높았다. 그러므로 맹장콕시듐 원충은 감마선 조사가 병원성을 저하시키고 계대수가 증가할수록 병원성은 약간 증가하지만 공격접종에 대한 방어효과가 높아지는 것을 볼 수 있었다. 이는 병원성이 있는 원충이 면역원성도 좋으며 앞으로 면역원성이 유지되며 병원성이 없는 원충의 선발이 필요할 것으로 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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