To isolate antagonistic bacteria against sclerotinia rot of lettuce, caused by Sclerotinia sclerotiorum, soil samples were collected from the diseased greenhouse field in Namyangju city, Gyeong-gi province from 2007 to 2008. A total of 196 bacterial isolates were isolated using serial dilution method. In dual culture assay in vitro, 26 isolates showed more than 80% of inhibition rates of mycelial growth of S. sclerotiorum. Based on 16S rDNA sequence analysis, the 26 isolates were identified as Bacillus megaterium, B. cereus, B. subtilis, Arthrobacter nicotianae, A. ramosus, Pseudomonas filiscindens, Stenotrophomonas maltophilia, Brevibacterium frigoritolerans and Sphingobacterium faecium. The 26 isolates inhibited the mycelial growth of S. sclerotiorum up to 80% and the sclerotial germination 0-100%. In the greenhouse pot test of ten isolates conducted in summer, 2 isolates B. megaterium (DK6) and B. cereus (C210) showed control efficacy on sclerotia viability of S. sclerotiorum, 20% and 35%, respectively. In the greenhouse pot test in winter, the disease incidence of the control group was 80%, whereas those of 9 isolates among 26 were approximately 20%. From the result, the 9 isolates are expected as potentially antagonistic bacteria for biological control of sclerotinia rot of lettuce caused by S. sclerotiorum.
Antibiotic resistance in animal isolates of enterococci is a public health concern, because of the risk of transmission of antibiotic-resistant strains or resistance genes to humans through the food chain. This study investigated phenotypic and genotypic resistances profile of tetracycline in 245 $Enterococcus$ isolates from bovine milk. A total of 245 enterococci were isolated from 950 milk samples. The predominant strain was $E.$$faecalis$ (n = 199, 81.2%) and $E.$$faecium$ (n = 25, 10.2%). $E.$$avium$ (n = 7, 2.9%), $E.$$durans$ (n = 6, 2.5%), $E.$$gallinarum$ (n = 4, 1.6%), and $E.$$raffinosus$ (n = 4, 1.6%) were also isolated. Of the 245 enterococcal isolates 76.3% (n = 187) displayed tetracycline resistance (${\geq}16{\mu}g/ml$). Of the 187 tetracycline-resistant isolates, 83.4% (n = 156), 16.1% (n = 30), and 26.7% (n = 50) possessed the genes $tet$(M), $tet$(L), $tet$(S) respectively. While 3.2% (n = 6) of the tetracycline-resistant isolates possessed all three genes $tet$(M) + $tet$(L) + $tet$(S), 8.6% (n = 16), 16.0% (n = 30), and 2.7% (n = 5) of them possessed two genes $tet$(M) + $tet$(L), $tet$(M) + $tet$(S), and $tet$(L) + $tet$(S) respectively. The tetracycline resistance pattern investigated in this study was attributable mainly to the presence of $tet$(M).
The bacterial strain isolated from Kimchi showed antibacterial activity against Micrococcus luteus IAM 1056. The selected strain was identified as Lactococcus lactis by 16S rRNA nucleotide sequence analysis and named as Lactococcus sp. KD 28. The treatment of culture supernatant with proteinase K removed antibacterial activity, indicating its proteinaceous nature, a bacteriocin. This bacteriocin was sensitive to hydrolytic enzymes such as ${\alpha}$-chymotrypsion, trypsin, proteinase K, lipase, ${\alpha}$-amylase and subtilisin A. The bacteriocin was highly thermostable and resistant to heating at $80^{\circ}C$ for up to an hour but 50 % of the total activity was remained at $100^{\circ}C$ for 30 min. The pH range from 2.0 to 8.0 had no effect on bacteriocin activity and it was not affected by solvents such as acetonitrile, isopropanol, methanol, chloroform and acetone up to 50% concentration. The bacteriocin showed antibacterial activity against M. luteus IAM 1056, Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis KCTC 1058, Enterococcus faecium KCTC 3095, Bacillus cereus KCTC 1013, B. subtilis KCTC 1023, Listeria ivanovii subsp. ivanovii KCTC 3444, Staphylococcus aureus subsp. aureus KCTC 1916, B. megaterium KCTC 1098 and B. sphaericus KCTC 1184. The bacteriocin was purified through ammonium sulfate concentration, SP-Sepharose chromatography and RP-HPLC. The molecular weight was estimated to be about 3.4 kDa by tricine-SDS-PAGE analysis.
Chemical changes, lactic acid bacteria and yeast counts in kimchi prepared by a commercial manufacturer in large scale were monitored at different fermentation temperature. The optimum pH of kimchi, around pH 4.2, reached within 2 days at $25^{\circ}C$, 3 days at $15^{\circ}C$ and 23 days at $5^{\circ}C$ fermentation, respectively. The optimum acidity calculated as lactic acid was not exactly coincident with pH. The total viable count reached at maximum within 2 days at $25^{\circ}C$, 6 days at $15^{\circ}C$ and 12 days at $5^{\circ}C$ fermentation, respectively. The identified strains of Lactobacilli during kimchi fermentation were L. brevis, L. plantarum and L. acidophilus with 3 unidentified strains. L. brevis, L. plantarum appeared from the first stage of fermentation to the terminal at $15^{\circ}C$ and $25^{\circ}C$ with keeping a constant level of viable number. In case of Leuconostoc species, L. mesenteroides subsp. mesenteroides was identified. This strain increased in viable number at the beginning of fermentation and dropped sharply at all fermentation temperatures. Pediococcus species including P. pentosaceus and one unidentified strain increased at the first stage of fermentation and decreased after on. Streptococcus faecium subsp. casseliflavus which appeared at the middle stage and Aerococcus viridans which was sole strain were also confirmed during kimchi fermentation. Cryptococcus laurenti was identified at all fermentation temperature and disappeared at the first stage of fermentation. It was reappeared 10 days only after fermentation at $25^{\circ}C$.
Jieon Park;Myeong-Hui Han;Woosoo Jeong;Soo-Hwan Yeo;So-Young Kim
Food Science and Preservation
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v.30
no.6
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pp.1056-1071
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2023
This study aimed to investigate the quality and microbial population changes for 90 days under two fermentation conditions, outdoors and indoors (35℃), with starters (single or mixed) in soybean paste. Bacillus velezensis NY12-2 (S1), Debaryomyces hansenii D5-P5 (S2), Enterococcus faecium N78-11 (S3), and their mixtures (M) were used for the makjang fermentation. The content of amino-type nitrogen among the makjang samples was highly shown in the indoors, followed by M, S3, and S2. The glutamic and aspartic acid contents in the M sample fermented in the indoors showed the highest values of 867.42±77.27 and 243.20±15.79 mg/g, respectively. By the electronic tongue analysis, the M sample fermented in the indoors exhibited lower saltiness and higher umami than the others. Consequently, we expect that using mixed strains, such as Bacillus, Debaryomyces, and Enterococcus, under constant conditions showed potential to the quality improvement of soy products.
Hong, Sung Wook;Bae, Hyo Ju;Chang, Jin Hee;Kim, So-Young;Choi, Eun-Young;Park, Beom Young;Chung, Kun Sub;Oh, Mi-Hwa
Journal of Dairy Science and Biotechnology
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v.31
no.2
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pp.153-159
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2013
Lactic acid bacteria are microorganisms that are closely associated with human and/or animal environments, and are categorized as generally recognized as safe (GRAS) organisms due to their ubiquitous appearance in foods and their contribution to the healthy microflora of mucosal surfaces. This study was performed to isolate and identify lactic acid bacteria with antagonistic effects against food-borne pathogens. A total of 3,000 acid-producing bacteria were isolated from infant feces, cattle feces, goat feces, dog feces, pig feces, vaginal tracts, vegetables, fruits, Kimchi, Jeotgal, fermented sausages, raw milk, cheese, yogurt, Cheonggukjang, Meju, and Makgeolli cultured on MRS agar with 0.05% bromocresol purple. For the isolation of bacteriocin-producing bacteria, the diameter of the clear zone was measured on MRS agar plates. Twenty-six isolates exhibited strong antibacterial activity against indicator strains such as Listeria monocytogenes, Escherichia coli O157:H7, and Salmonella enterica serovar Enteritidis. Lactic acid bacteria were identified as Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium, Enterococcus hirae, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus amylovorus, Lactobacillus curvatus, Lactobacillus plantarum, and Pediococcus acidilactici by 16S rDNA gene sequence analysis. The results of this study suggest that the isolates could be used as potential probiotic starters for functional food applications.
Journal of Korean Society of Environmental Engineers
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v.32
no.10
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pp.979-985
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2010
This study was performed to detect enterococci strain as an indicator of faecal contamination, to identify of 16S rDNA sequence and vancomycin resistance by MIC (Minimum Inhibitory Concentration) test from drinking spring-water samples in Seoul. The detection frequency of enterococci was 42 (19.8%) among 212 samples, and its concentration was ranged from 0 to 110 CFU/100 mL. These results were confirmed the possibility as an indicator microorganisms that similar to the frequency of E. coli detection (t test p-value 0.268, significant level 0.05). Isolated 56 enterococci samples were identified by 16S rDNA sequence data and their NCBI BLAST searching. They were identified to Enterococcus faecalis of 24 samples, E. faecium (10), E. casseliflavus (10), E. gallinarum (3), E. hirae (2), E. durans (2), E. sanguinicola (1). E. faecalis was dominant species that clinical case report of a domestic was similar. Vancomycin resistant enterococci (VRE) of 53 samples showed that vanB and vanC1/C2 type with 2 and 12 case, respectively. These results indicated that the drinking spring-water quarantined to fecal pollution for block out outbreak of gastrointestinal symptom with using such as disinfection process.
Ham, Seung-Hee;Choi, Nack-Shick;Moon, Ja-Young;Baek, Sun-Hwa;Lee, Song-Min;Kang, Dae-Ook
Journal of Life Science
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v.27
no.2
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pp.202-210
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2017
As an effort to find a potential biopreservative, we isolated bacterial strains producing bacteriocin from fermented foods. A strain was finally selected and characteristics of the bacteriocin were investigated. The selected strain was identified as Bacillus subtilis E9-1 based on the 16S rRNA gene analysis. The culture supernatant of B. subtilis E9-1 showed antimicrobial activity against Gram-positive bacteria. Subtilisin A, ${\alpha}$-chymotrypsin, trypsin and proteinase K inactivated the antimicrobial activity, which means its proteinaceous nature, a bacteriocin. The bacteriocin activity was fully retained at the pH range from 2.0 to 8.0 and stable at up to $100^{\circ}C$ for 60 min. Solvents such as ethanol, isopropanol and methanol had no effect on the antimicrobial activity at the concentration of 100% but acetone and acetonitrile reduced the activity at up to 100% concentration. Cell growth of four indicator strains was dramatically decreased in dose-dependent manner. Listeria monocytogenes was the most sensitive, but Enterococcus faecium was the most resistant. Bacillus cereus and Staphylococcus aureus showed the medium sensitivity. The bacteriocin showed its antimicrobial activity against B. cereus and L. monocytogenes via bactericidal action. The number of viable cells of L. monocytogenes started to reduce after addition of bacteriocin to the minced beef. The bacteriocin was purified through acetone concentration, gel filtration chromatography and RP-HPLC. The whole purification step led to a 6.82 fold increase in the specific activity and 6% yield of bacteriocin activity. The molecular weight of the purified bacteriocin was determined to be 3.3 kDa by MALDI-TOF/TOF mass spectrometry.
For the development of probiotics in aquaculture of marine organisms, three strains having psychrophilic and salt tolerant characteristics were isolated from Kimchi. Amng the isolated strains. MG19, MG89 and MG208 were identified as Lactobacillus brevis, Enterococcus faecium and Lactobacillus plantarum, respectively. The neutralized culture broth of isolated strains were tested in order to evaluate the antibactrial activity, 조초 showed high antibacterial activity against Edwardsiella tarda, Vibrio cholerae andPseudomonas fluorescens. In mixed culture of pathogens and isolated strain,pathogens were signifi-cantly inhibited after 2 days of cultivation but the isolated strains showed normal growth. When the Edwardsiella tarda was cultured with three isolated strains, its growth was completely inhibited after 254 hours of cultivation. The effect of isolated three strains as probiotics was investigated based on the changes in body weight of aquacultured flounder. After 50 days feeding trial, it was found that the mean body weight gain of the tested group fed freeze-dried isolated cells was significantly greater than that of the control group. These results suggest that these isolated strains can play an important role as probiotics in aquaculture.
Streptococci and enterococci, isolates from the rumen content of mouflons and European bisons were isolated. The total counts of these species reached the values(log 10 ${\pm}$ S.E.M.) $7.3{\pm}0.21$; $6.1{\pm}0.06$ bacteria per one ml of the rumen content in streptococci and $3.6{\pm}0.20$; $3.17{\pm}0.18$ bacteria per one ml of the rumen content in enterococci, Strains isolated were allotted to te species Streptococcus bovis(AM1, AM2, AM3, AM4), Enterococcus faecium(EH1, EFG2, EC3) and Enterococcus faecalis (EFA1, EFD2). Bactera presented belong to the strains with low urease and ${\alpha}$-amylase activities. The majority of isolates were polyresistant. Each strain produced bacteriocin - like substance with effect against at least of one of relatives species as indicators used. The most of inhibition zones were hazy with the width 2-6 mm in diameter.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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