A rapid assay to determine respiration inhibition of Saccharomyces cerevisiae by chemicals was developed. S. cerevisiae was harvested with two different liquid media, yeast extract-peptone-dextrose (YPD) medium capable of occurring both glucose fermentation and mitochondrial respiration, and non-fermentable carbon-yeast extract (NFY) medium capable of occurring respiration only Wells in 96-well plate were loaded with each cell suspension and various concentrations of 46 fungicides with various modes of action. n NFY medium, the non-fermentable carbon source, ethanol (NFY-E medium), glycerol (NFY-G medium) or lactate (NFY-L medium), was used. After incubation for $1{\sim}3$ days, minimum inhibitory concentrations (MICs) of the chemicals were recorded in the media. Of the 46 inhibitors employed in this study, four inhibitors of fungal respiration by blockage of electron flux in the mitochondrial respiratory chain, azoxystrobin, kresoxim-methyl, metominostrobin, and trifloxystrobin, exhibited strong antifungal activity in all of NFY media, but no activity in YPD medium. In contrast to this, five N-trihalomethylthio fungicides showed much stronger antifungal activities in YPD medium than three NFY media. Eleven fungicides inhibited growth of S. cerevisiae in all media and the other 26 fungicides showed no antifungal activity in all media. Thus, our rapid and efficient in vitro method can be considered as an alternative assay system for respiration inhibitor.
Kim, Seong-Lim;Kim, Woo-Jung;Lee, Sang-Yeol;Byun, Si-Myung
Applied Biological Chemistry
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v.27
no.3
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pp.139-145
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1984
For the ultimate manufacture of vinegar with watermelon juice, we examined the preliminarily alcoholic fermentation of watermelon juice using Saccharomyces cerevisiae, Saccharomyces cerevisiae var. ellipsoideus and Kluyveromyces fragilis. The juice contained 3.2% total reducing sugar by the Somogyi-Nelson method. Strains of yeast culture, pH, temperature and concentration of sugar in the juice were important factors affecting alcoholic fermentation. Saccharomyces cerevisiae var. ellipsoideus produced 5.3% alcohol from the juice fortified with 12% glucose under the conditions of pH 5.73 and $27^{\circ}C$ for 8 days. Generally, small quantities of various salts and N-sources affected little the alcoholic fermentation of the juice. The sterilization of the juice by autoclaving improved efficiency of fermentation than that by $SO_2$ sterilization. Determination of alcohol was carried out by the gas chromatographic method using Chromosorb W: Carbowax as packing material.
Heavy metal adsorption by microbial cells is an alternative to conventional methods of heavy metal removal and recovery from metal-bearing wastewater The waste Sac-chuomyces cerevisiae is an inexpensive, relatively available source of biomass for heavy metal biosorption. Biosorption was investigated by free and immobilized-S. cerevisiae. The order of biosorption capacity was Pb>Cu>Cd with batch system. The biosorption parameters had been determined for Pb with free , cells according to the Freundlich and Langmuir model. It was found that the data fitted reasonably well to the Freundlich model. The selective uptake of immobilized-S. cerevisiae was observed when all the metal ions were dissolved in a mixed metals solution(Pb, Cu, Cr and Cd). The biosorption of mixed metals solution by immobilized-cell was studied in packed bed reactor. The Pb uptake was Investigated in particular, as it represents one of the most widely distributed heavy metals in water. We also tested the desorption of Pb from immobilized-cell by us- ing HCI, $H_2SO_4$ and EDTA.
포도는 전세계에서 널리 소비되는 과실로 포도 과피에 존재하는 천연색소인 flavonoid는 혈중 콜레스테롤 함량 저하, 항알러지성, 항암성, 항바이러스성, 항염성의 생리적 기능이 있다고 알려져 있다. 최근에 들어와 이들 과실주스 가공에 열처리를 최소화하는 살균방법으로 자연 그대로의 영양성분, 맛과 향기 개선을 위한 초고압 처리에 관한 연구가 폭넓게 이루어지고 있다. 본 연구는 주스에서 문제가 되고 있는 ethanolic spoilage 균주인 S. cerevisiae의 초고압 살균 효과와 세포 구조적 형태를 연구하였다. 1.2$\times$$10^{6}$ cfu/ml의 S. cerevisiae를 포도주스에 접종하고 24시간 배양하여 멸균한 high barrier주머니에 20m1씩 넣고 2$0^{\circ}C$ 에서 200-600 MPa 조건으로 0-20분 동안 초고압 장치로 실시하였다. 생균수는 YM agar로 poured 방법으로 실시하였으며 200 MPa에서 5, 10, 15, 20분 후의 생균수는 각각 2.2$\times$$10^{7}$ , 4.5$\times$$10^4$, 2.8$\times$$10^4$, 9.8$\times$$10^3$, 9.5$\times$$10^3$cfu/ml로 tailing 현상을 관찰하였고, 400 MPa에서 5분 후 급격하게 감소하였다. S. cerevisiae의 사멸속도는 초고압 처리가 높을수록 증가했으며 세포 손상도는 압력과 처리시간이 길수록 증가하였다. 이들 조건에 따른 효모 세포의 구조적 관찰을 scanning electron microscopy와 electron microscopy로 하였다. S. cerevisiae 세포는 압력에 의한 pinhole, surface roughening을 발견하였고, 세포 내부의 세포질, 액포, 핵 손상과 세포질 물질들이 압력에 의하여 세포벽으로 이동하여 내부가 비어있는 현상을 관찰하였다.
This study aimed to enhance ethanol productivity of Saccharomyces cerevisiae through genome editing using CRISPR/CAS9. To increase ethanol productivity, ACC1, ELO1, and OLE1 were overexpressed in S. cerevisiae using the CRISPR/CAS9 system. The strains overexpressing ACC1, ELO1, and OLE1 survived up to 24 h in YPD medium supplemented with 18% ethanol. Moreover, the ethanol yields in strains overexpressing ACC1 (428.18 mg ethanol/g glucose), ELO1 (416.15 mg ethanol/g glucose), and OLE1 (430.55 mg ethanol/g glucose) were higher than those in the control strains (400.26 mg ethanol/g glucose). In conclusion, the overexpression of these genes increased the viability of S. cerevisiae at high ethanol concentrations and the ethanol productivity without suppressing glucose consumption.
The evolutionary relationships of the genus Trichoderma and related taxa were assessed using partial sequencing of 18S ribosomal RNA. Phylogenetic tree divided into three major groups; 1. Saccharomyces cerevisiae-Geotrichum klebahnii-Alternaria mali group; 2. Neurospora crassa-Aspergillus-Penicillium-Chrysosporium pannorum-Scopulariopsis sp. group; 3. Trichoderma group. The genus Trichoderma seemed to be phylogenetically separated from Saccharomyces cerevisiae, Aspergillus and Penicillium groups, and have passed through it's own evolutionary pathway.
Lee Chi-Hyeoung;Cha Jae-Young;Jun Bang-Sil;Lee Ho-Jun;Lee Young-Chun;Cho Yong-Lark;Cho Young-Su
Journal of Life Science
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v.15
no.5
s.72
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pp.819-825
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2005
The Antioxidative accvities of the cell free extracts containing high glutathione by Saccharomyces cerevisiae FF-8 were tested in vitro experimental models : DPPH method for radical scavenging activity, ferric TBA method and ferric thiocyanate method using linoleic acid and tissue microsome for lipid peroxidation inhibitions. The concentration of intercellular glutathione by cultivating S. cerevisiae FF-8 in the YM optimal medium obtained $204\mug/ml$, which was increased by 2.76-fold from $74\mug/ml$ in the YM basal medium. A comparition between the YM basal medium and the YM optimal medium on antioxidative substance produced by S. cerevisiae FF-8 was investigated. In DPPH ($\alpha, \alpha-diphenyl-\beta-picrylhydrazyl$) method, the electron donating activity of the glutathione produced by S. cerevisiae FF-8 cultured in the YM optimal medium was as high as that of BHT ($ 0.05\%w/v $). The antioxidative a.tivity was measured by inhibition against lipid peroxidation of rat tissues' microsomes. The results of anti-oxidant activity of the cell free extracts by S. rerevisiae FF-8 cultured in the YM optimal medium was shown in the following order . $ liver 60.98\% > kidney 56.43\% > heart 52.91\% > brain 52.13\% > testis 45.57\% > spleen 42.95\% $. In antioxidative activities determined by ferric thiocyanate method and TBA methods against lipid peroxidation, the lipid peroxidation in the control mixture increased more rapidly than the typical peroxidation curve of linoleic acid from one day. The antioxidative activity of the cell free extracts by cultivating S. cerevisine FF-8 in the YM optimal medium were higher than that of the YM basal medium. These data indicate that the cell free extracts containing a high intercellular glutathione of S. cerevisiae FF-8 cultured in YM optimal medium showed strong antioxidative capacities by DPPH radical scavenging activity and ferric thiocyanate and TBARS measurements.
In order to identify the protein(s) secreted into culture medium by the sool-l/retl-l mutation of Saccharomyces cerevisiae, proteins from the culture medium of cells grown at permissive (28$^{\circ}C$) and non-permissive temperatures (37$^{\circ}C$), were analyzed. Comparison of protein bands separated by SDS-PAGE identified a prominent band of 47-kDa band from a mutant grown at 37$^{\circ}C$. N-terminal amino acid sequencing of this 47-kDa protein showed high identity with enolases 1 and 2. Western blot analysis revealed that most of the cell wall-bound enolase was released into the culture medium of the mutant grown at 37$^{\circ}C$, some of which were separated as those with lower molecular weights. Our results, presented here, indicate the impairment of cell wall enolase biogenesis and assembly by the sool-l/retl-l mutation of S. cerevisiae.
A flocculating sugar tolerant yeast strain was isolated from fermenting Takju. This strain was identified as Saccharomyces cerevisiae CA-1 according to the Lodder's yeast taxonomic studies. The isolated yeast could grow in 50% glucose and in 7% ethanol in the YPD medium. It's optimal growth temperature, initial pH, shaking rate and initial glucose concentration for ethanol fermentation showed 35$\circ$C, 4.5, 150 rpm, 15%, respectively. Ethanol concentration was 63 g/l in 20% glucose after 24 hours, fermentation yield was 0.49 g-ethanol/g-glucose in 10% glucose after 24 hours and ethanol productivity was 3.09 g/l$\cdot $h in 10% glucose after 12 hours in batch fermentation. Repeated batch fermentation was possible for over 50 days and ethanol yield, ethanol productivity and substrate conversion rate were 0.39-0.50 g/g, 1.63-2.08 g/l$\cdot $h and more than 99%, respectively during these periods.
A study on the removal of mercury and lead by microorganisms, Saccharomyces cerevisiae and Aureobasidium pullulans, was performed, in which the comparison of adsorption model between these two heavy metals was done. The amounts of mercury removed were more than those of lead in both microorganisms. In case of mercury, the adsorption isotherm of S. cerevisiae was accorded with Langmuir model but A. pullulans was followed to Freundlich model. In the case of lead, however, the adsorption isotherm had opposite results. The adsorption rate of mercury to S. cerevisiae was faster than that of A. pullulans, but in the case of lead, it revealed contrary results. It seems, therefore, that the type of microorganisms used as biosorbents should be selected differently with the type of heavy metals removed for applying these to real adsorption process.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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