수소 생산 균주 ES392sms 부산 소재 동의대학교에 위치한 연못 담수에서 분리하였다. 세포는 직경 $0.6\;{\mu}m$, 길이 $1.4\;{\mu}m$의 간균이고 편모와 포자를 형성하지 않았다. 분리된 균주의 16s rRNA 염기서열과 생화학적 특성을 바탕으로 계통학적으로 분류한 결과, ES392 균주는 Enterobacter sp.에 속하는 것으로 동정되었다. 수소생산을 위한 생육최적 pH와 온도는 각각 7.5와 $35^{\circ}C$이었다. 분리한 Enterobacter sp. ES392 균주의 수소생산을 최대화 하기 위해 배지성분을 최적화하였다. 그 결과 4%(w/v) sucrose, 0.5%(w/v) yeast extract, 50 mM potassium phosphate를 첨가한 배지 조건에서 최대수소생산량을 나타내었다. 회분식 배양 조건에서 최대 수소 생산량은 3481 mL/L이었고, 수소생산수율은 1.33mol/mol sucrose를 나타내었다.
A cellulolytic and xylanolytic enzyme complex-producing alkalothermoanaerobacterium strain, Tepidimicrobium xylanilyticum BT14, is described. The cell was Grampositive, rod-shaped, and endospore-forming. Based on 16S rRNA gene analysis and various lines of biochemical and physiological properties, the strain BT14 is a new member of the genus Tepidimicrobium. The strain BT14 cells had the ability to bind to Avicel, xylan, and corn hull. The pH and temperature optima for growth were 9.0 and $60^{\circ}C$, respectively. The strain BT14 was able to use a variety of carbon sources. When the bacterium was grown on corn hulls under an anaerobic condition, a cellulolytic and xylanolytic enzyme complex was produced. Crude enzyme containing cellulase and xylanase of the strain BT14 was active in broad ranges of pH and temperature. The optimum conditions for cellulase and xylanase activities were pH 8.0 and 9.0 at $60^{\circ}C$, respectively. The crude enzyme had the ability to bind to Avicel and xylan. The analysis of native-PAGE and native-zymograms indicated the cellulosebinding protein showing both cellulase and xylanase activities, whereas SDS-PAGE zymograms showed 4 bands of cellulases and 5 bands of xylanases. Evidence of a cohesinlike amino acid sequence seemed to indicate that the protein complex shared a direct relationship with the cellulosome of Clostridium thermocellum. The crude enzyme from the strain BT14 showed effective degradation of plant biomass. When grown on corn hulls at pH 9.0 and $60^{\circ}C$ under anaerobic conditions, the strain BT14 produced ethanol and acetate as the main fermentation products.
Klebsiella pneumoniae는 그람 음성균에 속하고 막대 형태를 가지며 인간이나 동물의 폐에 감염하여 병을 일으키는 균이다. K. pneumoniae는 흔히 항생제 내성을 나타내는데 이로 인해 항생제를 통한 치료가 어려워지게 된다. 이런 상황에서 숙주 균에 특이적이고 민감하게 반응하는 박테리오파지는 항생제 내성균의 치료에 대한 대체적인 접근법으로 제안될 수 있다. 박테리오파지 KP1은 하수처리장에서 분리되었으며 K. pneumoniae에 대해 특정적인 감염성이 있다. 본 연구에서는 Klebsiella pneumoniae 박테리오파지 KP1의 유전체 초안 분석을 수행하였다. KP1의 유전체 초안은 167,989 bp의 길이, 39.6%의 G + C 비율로 구성되어있다. 295개의 예측된 ORF들과 14개의 tRNA 유전자를 가지고 있다. 또한 이들은 lysozyme, 그리고 holin과 같은 다양한 세포 용해 관련 효소들을 포함하고 있다.
양조식초발효탱크에서 9% 이상의 고산도 초산 생성균을 분리하여 그 균주의 특성을 규명하였다. 분리된 초산균은 AE중층 한천배지에서 연한 베이지색의 colony를 형성하였고 전자현미경 관찰 결과 간균, Gram음성의 세균으로 flag-ella가 관찰되지 않아 운동성이 없을 것으로 추정된다. 배양액을 검경한 결과 분리균은 단일균 또는 2개가 짝을 지어 있는 쌍구균임을 알 수 있었다. 이 분리균주의 최적 생육온도와 pH는 3$0^{\circ}C$와 2.7이었다. 4~8% 초산을 함유한 AE배지에서 잘 생육하였고 pH 2.5의 초산을 첨가한 배지에서 잘 생육하였으나 초산을 첨가하지 않은 AE배지에서는 생육하지 않았다. Glucose를 이용하여 2-, 5-ketogluconate를 형성하였다. Ethanol 존재 하에서는 잘 생육하였으나 lactate 존재 하에서는 생육이 억제되었으며 cellulose를 생성하지 않았다. HPLC로 분석한 DNA 염기 중의 G와 C 함량(mol%)은 56.2 mol%이었다. 분리된 초산균은 탄소원으로 fructose, maltose, sucrose, mannitol, sorbitol을 첨가한 배지에서 잘 생육하였고 AE액체 배지 에 ethanol을 첨가하였을 경우와 propanol를 첨가한 경우 모두 잘 생육하였다. 생화학적 특성 및 G와 C함량을 다른 표준균주들과 비교한 결과 분리된 균주는 Gluconacetobacter europeus임을 확인할 수 있었다.
Cellulose를 이용할 수 있는 Cellulomonas속 균주의 종간 세포의 융합방법을 확립하기 위해 원형질체 재생 및 융합조건에 대해 검토하였다. Cellulomonas속 균주의 원형질체는 osmotic stabilizer를 포함하는 재생배지에서 유동성 한천배지로 중층하여 재생시켰고 재생 확인은 주사전자현미경으로 하였다. 원형질체 융합은 항생물질 내성과 영양요구성 돌연변이주의 유전자 표지에 확인하였다. Lysozyme을 처리하여 형성된 C. flavigena 원형 질체의 세포벽 재생은 osmotic stabilizer로 0.4M sorbitol을 포함하는 재생배지에서 약 15% 수준이었으며 여기에 Polyvinyl Pyrrolidone(PVP) 3% 첨가로 재생율을 약 3배정도 증가시킬 수 있었다. Cellulomonas속 균주의 변이주간의 원형질체 융합은 융합유도제로 PEG 6000을 취하여 최적농도 40% (w/v), 치적 처리시간 15분, Ca농도 25mM에서 약 2.0$\times$$10^{-4}$ - 4.0$\times$$10^{-4}$의 융합빈도를 얻을 수 있었다.
저온에서 높은 세척력을 갖는 호소세제의 개발을 위하여 토양으로부터 alkaline protease의 활성이 높은 균주를 분리, 동정하였으며, 호소의 성질을 조사하였다. 분리균주의 형태적 특징은 Gram 음성균 이고, 간균$(0.6{\sim}0.7{\times}1.3{\sim}2.6\;{\mu}m\;in\;size)$ 형태를 하고 있으며, 운동성을 보였다. 또한 catalase 양성, aesculin, gelatin 및 casein 분해능이 있었다. 분리균주의 세포벽 구성 성분은 meso-DAP를 함유하였으며, G+C mol 함량은 43.3%를 나타내었다. 이러한 형태적, 생리 생화학적 특성의 결과로부터 분리 균주는 Acinetobacter 속으로 동정되었다. 분리 균주를 이용한 alkaline protease의 생산은 초기 pH 10과 $40^{\circ}C$에서 36시간 배양하였을 때 3,300 D.U/mL로 최대 효소 활성을 보였으며, 최적 pH와 온도는 9와 $60^{\circ}C$이었다. 또한 본 균주에 의해 생산된 alkaline protease는 두개의 활성 band를 나타내었다.
Starters of lactic acid bacteria(LAB) were isolated from the commercial yoghurt products and the four isolates have been studied on their identification and some physiological characteristics. For the purpose of identification, microscopic examination, API test, and 16s rRNA gene sequencing were conducted. Isolate A from a yogurt product of local dairy company A was shown to be Gram-positive rod-shaped bacterium. All strains isolated were turned out to be as Lactobacillus paracasei by using a API 50 CHL kit. In contrast, isolate A was identified as a strain of Lactobacillus helveticus based on the 16S rRNA sequencing data, and L. casei ssp. casei for both B and D and L. paracasei for C. All the isolates survived the simulated gastric juice, pH 2.0 within 3 hours and sharply decreased in viability so that no viable cell was observed after 4.5 hours incubation. In addition, the four isolated strains were almost identical in antibiotic susceptibility to six different kinds of antibiotics including erythromycin ($15\;{\mu}g$), ampicillin ($10\;{\mu}g$), gentamycin ($10\;{\mu}g$), neomycin ($30\;{\mu}g$), but rather resistant to colistin ($10\;{\mu}g$) and streptomycin ($10\;{\mu}g$). It was noteworthy that four isolates were confirmed to produce antibacterial substance against foodborne pathogens of Gram-positive Staphylococcus aureus and Gram-negative Escherichia coli 0157:H7 as test organisms based on the inhibitory zones on an MRS soft agar medium. At presence, the inhibitory factor is unknown so that further studies are required to ascertain the active factor responsible for the inhibitory activities.
Previously, we identified that Cirsium japonicum (CJ) extract posses antidepressant properties. In order to look for the optimal hebal preparation, CJ extracts collected from Koheung, Yesan, Cheju, Pyungchang and Pocheon were compared. The psychopharmacological activities of each extract were investigated using the open field test, the rota-rod test and the forced swimming test. Effect of each extract on $Cl^-$ influx in neuroblastoma cells were also identified. All of the extracts were orally administered at dosages of 50, 100, 200, 400 mg/kg of body weight. Supplementation of CJ did not significantly alter psychomotor behaviors such as movement, rearing frequency and total turn angle on the open field. Supplementation of CJ's extract from Pyungchang (100 mg/kg, p.o.), Cheju (200 and 400 mg/kg p.o.) and Yesan (100 and 200 mg/kg, p.o.) significantly decreased immobile duration and increased mobile duration in the forced swimming test. All of extracts have no influence on NE uptake in HEK-293 cells, but increased $Cl^-$ influx in neuroblastoma cell. The extract from Yesan demonstrated the most potent effect on $Cl^-$ influx. These results indicate that CJ's extracts from Pyungchang, Cheju and Yesan may alleviate depression, and the extract from Yesan may be the most effective preparation.
본 연구에서는 페로브스카이트 태양전지의 광흡수체로 사용되는 메틸암모늄 할로젠화 납(methylammonium lead halide, $MAPbX_3$, X = I, Br) 페로브스카이트(perovskite) 박막을 이중주입 초음파분무법을 이용하여 제조하였다. 이중주입 초음파 분무법을 통해 $60^{\circ}C$ 이하의 기판온도에서 분무한 후, $75^{\circ}C$에서 5분간 최종열처리 후 $MAPbI_3$ 단일상을 제조할 수 있었다. $80^{\circ}C$ 이상의 온도에서 분무 증착 시에는 페로브스카이트 상의 분해로 인해 구형의 결정립이 막대형태의 프렉탈(fractal) 구조로 변화되었다. $MAPbI_3$ 용액과 $MAPbIBr_2$ 용액의 이중주입을 통해, $MAPbI_3$ 박막에 비해 높은 $100^{\circ}C$의 열처리로 $MAPbI_{3-x}Br_x$ 박막을 제조할 수 있었다.
CCCTC-binding factor (CTCF), a zinc finger protein, is a transcription factor and regulator of chromatin structure. Forebrain excitatory neuron-specific CTCF deficiency contributes to inflammation via enhanced transcription of inflammation-related genes in the cortex and hippocampus. However, little is known about the long-term effect of CTCF deficiency on postnatal neurons, astrocytes, or microglia in the hippocampus of adult mice. To address this, we knocked out the Ctcf gene in forebrain glutamatergic neurons (Ctcf cKO) by crossing Ctcf-floxed mice with Camk2a-Cre mice and examined the hippocampi of 7.5-10-month-old male mice using immunofluorescence microscopy. We found obvious neuronal cell death and reactive gliosis in the hippocampal cornu ammonis (CA)1 in 7.5-10-month-old cKO mice. Prominent rod-shaped microglia that participate in immune surveillance were observed in the stratum pyramidale and radiatum layer, indicating a potential increase in inflammatory mediators released by hippocampal neurons. Although neuronal loss was not observed in CA3, and dentate gyrus (DG) CTCF depletion induced a significant increase in the number of microglia in the stratum oriens of CA3 and reactive microgliosis and astrogliosis in the molecular layer and hilus of the DG in 7.5-10-month-old cKO mice. These results suggest that long-term Ctcf deletion from forebrain excitatory neurons may contribute to reactive gliosis induced by neuronal damage and consequent neuronal loss in the hippocampal CA1, DG, and CA3 in sequence over 7 months of age.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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