원핵생물체의 생명유지에 중요한 역할을 담당하는 유전자들을 밝히기 위해 미생물 유전체들 사이의 공통적 유전자를 파악하는 COG 알고리즘을 이용하였다. 원핵생물 711종 모두에 보존적인 것은 COG0080 (Ribosomal protein L11) 1개였다. 708종 이상의 원핵생물에 보존적인 22개의 ortholog 중 전사관련 2개, tRNA synthetase 관련4개, ribosamal large subunit 8개, ribosomal small subunit 7개였다. 700종 이상의 원핵생물에 보존적인 COG는 58개였다. 이중 리보좀을 구성하는 소단위체 등 번역 관련 COG가 50개(86.2%), 전사관련 COG가 4개(6.9%)로 나타나 생명현상에서의 단백질의 중요성을 알 수 있었다. 58개의 COG 중 보존성은 COG0060 (Isoleucyl tRNA synthetase)이 가장 높았고 COG0143 (Methionyl tRNA synthetase)이 가장 낮았다. 문(phylum)과 강(class) 수준에서 보존적 유전자들의 평균과 분산으로 유전체 분석을 수행한 결과 변이가 큰 고세균은 진정세균과 구분되었으며 편차는 일부 진정세균이 고세균보다 컸다. 보존적 유전자를 탐색하는 본 연구의 기법은 기초과학 연구와 함께 항균제 개발과 항암요법 개발 등에도 유용할 것이다.
KIM IL-SUP;YUN HAE SUN;SHIMISU HISAYO;KITAGAWA EMIKO;IWAHASHI HITOSHI;JIN INGNYOL
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제15권6호
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pp.1240-1249
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2005
Saccharomyces cerevisiae KNU5377 has potential as an industrial strain that can ferment wasted paper for fuel ethanol at $40^{\circ}C$ [15, 16]. To understand the characteristics of the strain, genome-wide expression was performed using DNA microarray technology. We compared the homology of the DNA microarray between genomic DNAs of S. cerevisiae KNU5377 and a control strain, S. cerevisiae S288C. Approximately $97\%$ of the genes in S. cerevisiae KNU5377 were identified with those of the reference strain. YHR053c (CUP1), YLR155c (ASP3), and YDR038c (ENA5) showed lower homology than those of S. cerevisiae S288C. In particular, the differences in the regions of YHR053c and YLR155c were confirmed by Southern hybridization, but did not with that of the region of YDR038c. The expression level of mRNA in S. cerevisiae KNU5377 and S288C was also compared: the 550 ORFs of S. cerevisiae KNU5377 showed more than two-fold higher intensity than those of S. cerevisiae S288C. Among the 550 ORFs, 59 ORFs belonged to the groups of ribosomal proteins and mitochondrial ribosomal proteins, and 200 ORFs belonged to the group of cellular organization. DIP5 and GAP1 were the most highly expressed genes. These results suggest that upregulated DIP5 and GAP 1 might take the place of ASP3 and, additionally, the sensitivity against copper might be contributable to the lowest expression level of copper-binding metallothioneins encoded by CUP 1a (YHR053c) and CUP1b (YHR055c) in S. cerevisiae KNU5377.
Kim, Nam-Soo;Shen, Yan-Nan;Kim, Tae-Yoon;Byun, Sung-June;Jeon, Ik-Soo;Kim, Sang-Hoon
BMB Reports
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제40권2호
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pp.212-217
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2007
The chicken oviduct is a dynamic organ that produces secretory proteins such as ovalbumin during the laying period. In this study, we identified oviduct-specific proteins in hens during the egg-laying period by proteomic analysis. Proteins extracted from the magnum of hens of different ages (5, 35, and 65 weeks) were analyzed by two-dimensional gel electrophoresis to compare the intensity of proteins among samples. Approximately 300 spots were detected on each gel. Based on the comparison of image gels, we found that the intensity of eight spots in 35-week magnums was increased at least by 2-fold compared with the others. Five of the eight spots were identified as calumenin, acidic ribosomal phosphoproteins (ARP), prohibitin, heart fatty acid-binding protein, and anterior gradient-2 (AGR-2). In particular, ARP and AGR-2 were highly expressed in 35- week magnums compared with 5- and 65-week magnums. In addition, the level of these proteins was consistent with their RNA levels. Expression of AGR-2 mRNA was detected in the mature magnum, whereas no signal was observed in premature tissue. Among various tissues, expression of AGR-2 mRNA was highest in the magnum, high in the isthmus, and five fold lower in muscle. It was undetectable in the liver and in other tissues (heart and kidney). However, the mRNA levels of other proteins were ubiquitous among tissues. In transcriptional activity of AGR-2, a 3.0 kb fragment of promoter region containing potential estrogen receptor binding sites had enhanced its activity strongly. In conclusion, these results suggest that AGR-2 has functional regulatory roles in the chicken oviduct during the egglaying period.
The SpoU family of proteins catalyzes the methylation of transfer RNAs (tRNAs) and ribosomal RNAs (rRNAs). We characterized a putative tRNA/rRNA methyltransferase, VaSpoU1 of the SpoU family, from Viscum album (mistletoe). VaSpoU1 and other plant SpoU1s exhibit motifs of the SpoU methylase domain that are conserved with bacterial and yeast SpoU methyltransferases. VaSpoU1 transcripts were detected in the leaves and stems of V. album. VaSpoU1-GFP fusion proteins localized to both chloroplasts and mitochondria in Arabidopsis protoplasts. Sequence analysis similarly predicted that the plant SpoU1 proteins would localize to chloroplasts and mitochondria. Interestingly, mitochondrial localization of VaSpoU1 was inhibited by the deletion of a putative N-terminal presequence in Arabidopsis protoplasts. Therefore, VaSpoU1 may be involved in tRNA and/or rRNA methylation in both chloroplasts and mitochondria.
Cyanobacteria havebeen identified as one of the most promising group producing novel biochemically active natural products. Cyanobacteria are a very old group of prokaryotic organisms that produce very diverse secondary metabolites, especially non-ribosomal peptide and polyketide structures. Though many useful natural products have been identified in cyanobacterial biomass, cyanobacteria produce also extracellular proteins related with NRPS/PKS. Detection of unknown secondary metabolites in medium was carried in the present study by a screening of 98 cyanobacterial strains. A degenerated PCR technique as molecular approaches was used for general screening of NRPS/PKS gene in cyanobacteria. A putative PKS gene was detected by DKF/DKR primer in 38 strains (38.8%) and PCR amplicons resulted from a presence of NRPS gene were showed by MTF2/MTR2 primer in 30 strains (30.6%) and by A3/A7 primer in 26 strains (26.5%). HPLC analysis for a detection of natural products was performed in extracts from medium in which cyanobacteria containing putative PKS or NRPS were cultivated. CBT57, CBT62, CBT590 and CBT632 strains were screened for a production of extracellular natural products. 5 pure substances were detected from medium of these cyanobacteria.
Arayan, Lauren Togonon;Tran, Xuan Ngoc Huy;Reyes, Alisha Wehdnesday Bernardo;Huynh, Tan Hop;Vu, Hai Son;Min, WonGi;Lee, Hu Jang;Kim, Suk
Journal of Preventive Veterinary Medicine
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제42권4호
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pp.157-162
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2018
This study evaluated the protective effects of a combination of eight B. abortus recombinant proteins that were cloned and expressed into a pMal vector system and $DH5{\alpha}$: nucleoside diphosphate kinase (rNdk), 50S ribosomal protein (rL7/L12), malate dehydrogenase (rMDH), DNA starvation/stationary phase protection protein (rDps), elongation factor (rTsf), arginase (rRocF), superoxide dismutase (rSodC), and riboflavin synthase subunit beta (rRibH). The proteins were induced, purified, and administered intraperitoneally into BALB/c mice. The mice were immunized three times at weeks 0, 2, and 5 and then infected intraperitoneally (IP) with $5{\times}10^4CFU$ of virulent B. abortus 544 one week after the last immunization. The spleens were collected and the bacterial burden was evaluated at four weeks post-infection. The results showed that this combination produced a significant reduction of the bacterial burden in the spleen with a log reduction of 1.01 compared to the PBS group. Cytokine analysis revealed induction of the cell-mediated immune response in that TNF (tumor necrosis factor) and proinflammatory cytokines IL-6 (Interleukin 6) and MCP-1 (macrophage chemoattractant protein-1) were elevated significantly. In summary, vaccination with a combination of eight different proteins induced a significant protective effect indicative of a cell mediated immune response.
연체동물 유래 아미노산 서열 22,138 개에서 NLS가 예측되는 아미노산 서열은 266 개였으며 이는 연체동물 전체 아미노산 중 1.2% 정도였다. 또한 현재 등재되어 있는 연체동물 8,314 종 중 NLS를 포함한 아미노산이 밝혀진 생물은 60여종에 불과 하였다. 현재 알려진 연체동물 서열 중에는 두족 강의 경우가 NLS를 포함한 아미노산이 많을 것으로 예측되었다.
mTOR 신호전달 단백질의 변화는 다양한 종류의 암에서 관찰 되었다. 따라서 이들 단백질은 최근에 암 치료제에 대한 새롭고 흥미로운 표적이 되고 있다. 우리는 대장암과 선종 환자의 mTOR 세포신호의 활성도를 조사하였다. 면역조직화학적 방법으로 대장암과 선종의 세포신호 단백질 성분인 mTOR, p70-S6K, S6, 4EBP1 발현을 분석하였다. 이번 연구는 모두 100개의 예를 악성(Colorectal Adenocarcinoma, CRAC) 40건, 고등급 선종(Adenoma with High grade intraepithelial neoplasms, HIN) 30건, 저등급 선종(Adenoma with Low-grade intraepithelial neoplasms, LIN) 30건으로 분류하여 진행하였다. p-mTOR의 발현률은 LIN 7%, HIN 30%, CRAC 75%였고 p-S6의 발현률 또한 LIN 10%, HIN 27%, CRAC 55%였다. p-mTOR, p-S6의 발현과 선종-선암 연속성은 중요한 상관관계 있다는 것이 발견되었다. 그리고 흥미롭게도 p-S6 발현률은 진행암보다 초기암에서 더 높았다.
이 연구의 목적은 122종의 고세균 종에 보존된 대사 경로와 보존된 유전자를 확인하는 것이었다. 각각의 122개 고세균이 63개의 COG 대사 경로, 이를 구성하는 822개의 COG, 총 4,877개의 COG를 보유하고 있는지 분석했다. 대사경로에서는 archaeal ribosomal proteins만이 가장 보존적이었다. 122종의 고세균 모두에 공통적인 COG는 7개의 COG pathways에서 46개, 그리고 그 외가 20개였다. COG pathways에서는 ribosome을 구성하는 29개, tRNA synthetase와 전사인자가 각각 5개, RNA polymerase를 구성하는 3개, 그리고 tRNA modification에 관련된 2개의 COG가 공통적이었다. COG pathways에 속하지 않고 122종의 고세균에 공통적인 보존적 유전자까지 고려하면 외부와 세포질을 구분 짓는 세포벽과 세포외기질의 합성, 복제, 전사, 번역, 단백질 대사에 관련된 유전자들 중에서 일부가 공통적이었다. 계통수에서 구한 각 고세균의 distance value를 분류단위로 보면 Euryarchaeota 문의 Halobacteria강의 평균이 가장 낮았고 표준편차는 Thaumarchaeota 문의 Nitosospharia강, 강을 알 수 없는 Thaumarchaeota문의 고세균, Euryarchaeota 문의 Halobacteria 강, Crenarchaeota 문의 Thermoprotei 강, 기타 고세균(OA)이 높았다. 계통수 분석으로 6가지의 공통점을 찾았다. 본 연구결과는 보존된 유전자에 관한 자료 외에도 의약품 개발, 균주 개선을 위한 유전자의 선택 등에 활용될 수 있을 것이다.
CHUNG Hyang Suk;YU Tai Hyun;KIM Bong Jin;KIM Sun Mi;KIM Joo Yeong;YU Hak Sun;Jeong Hae Jin;OCK Mee Sun
Parasites, Hosts and Diseases
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제43권4호
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pp.149-156
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2005
Four hundred and sixty five randomly selected clones from a cDNA library of Blattella germanica were partially sequenced and searched using BLAST as a means of analyzing the transcribed sequences of its genome. A total of 363 expressed sequence tags (ESTs) were generated from 465 clones after editing and trimming the vector and ambiguous sequences. About $42\%$ (154/363) of these clones showed significant homology with other data base registered genes. These new B. germanica genes constituted a broad range of transcripts distributed among ribosomal proteins, energy metabolism, allergens, proteases, protease inhibitors, enzymes, translation, cell signaling path-ways, and proteins of unknown function. Eighty clones were not well-matched by database searches, and these rep-resent new B. germanica-specific ESTs. Some genes which drew our attention are discussed. The information obtained increases our understanding of the B. germanica genome.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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