영지(Ganoderma lucidum) 열수추출물이 지질생성효모(Rhodotorula glutinis)의 증식과 지질함량 및 지방산 조성에 미치는 영향을 조사하기 위하여 영지추출물을 각각 0 ($S_0$), 0.1 ($S_1$), 0.01 ($S_2$) 및 1.0% ($S_3$)되게 첨가한 기본배지에 R. glutinis를 접종하여 $30^{\circ}C$에서 8일간 진탕배양하면서 그 효모의 생육도, 당 소비량의 변화, 지질함량 및 지방산 조성을 조사하였다. 영지추출물의 첨가량이 증가할수록 균체증식은 증가하였으며, 배양 8일에는 $S_1,\;S_2$ 및 $S_3$구가 $S_0$구보다 각각 1.5배, 1.6배, 및 2.1배로 증가하였으며 8일 후 당 소비율은 감소하는 경향이 있었다. 균체지질함량은 영지추출물의 농도가 증가함에 따라 40% ($S_0$)에서 41.5% ($S_1$), 43.7%($S_2$) 및 46.7% ($S_3$)로 증가하였고 균체 지방산은 myristic, palmitic, stearic, oleic, linoleic acid 등이였으며 불포화지방산의 함량(38.6 mg/g)이 포화지방산의 함량(22.3 mg/g)보다 많았다. 영지추출물의 농도가 증가함에 따라 각 처리구의 균체 지방산함량은 myristic acid를 제외한 모든 산이 증가하였는데, 그 중 $S_2$에서 가장 많았으며, $S_3$구에서는 $S_1$구보다도 감소한 반면, myristic acid는 $S_3$에서 가장 높게 나타났다.
전라북도 고군산열도 선유도 일대에서 2014년 4월에 개화한 야생화들로부터 효모들을 분리한 후 이들의 26S rDNA의 D1/D2 부위의 염기서열을 결정한 다음 NCBI의 BLAST database에 등록되어 있는 효모들과의 상동성을 비교 분석하여 동정하였다. 야생화 51점에서 21종의 효모들을 61 균주 분리하였고, 이들 중 Cryptococcus aureus SY1-4 등의 Cryptococcus 속 균들이 가장 많았고, Metschnikowia reukaufii SY20-1등 Metschnikowia 속 균과 Rhodotorula ingeniosa SY1-1등 Rhodotorula 속 균들도 비교적 많이 분리되었다. 이들 61 균주들의 배양상등액과 무세포추출물을 제조한 후 생리기능성을 측정한 결과 M. reukaufii SY44-6의 배양상등액이 각각 49.6%의 XOD 저해활성과 38.4%의 미백성 Tyrosinase 저해활성을 보여 우수하였다.
심각한 수질환경 오염을 억제하기 위하여 알코올 발효고정의 폐액을 미생물을 이용하여 BOD를 낮추고 동시에, 단세포 지질의 생산 공정을 개발하고자 하였다. 알코올 발효공장 두 곳의 폐액을 수집하여 그 조성 및 일반성분과 생물학적 산소 요구량(BOD), 화학적 산소요구량(COD) 등을 측정하였고, 폐액중에 생존하는 미생물들과 유지 함량이 높다고 알려진 효모 균주들을 배양하여 단세포 지질의 생산에 적합한 Rhodotorula glutinis 균주를 선발하였다. 알코올 발효 공장의 폐액을 기질로 사용하기 위하여, 전처리 조건을 실험한 결과 NaOH의 처리가 가장 우수하였다. 최대의 지질수율을 얻기 위한 최적 배양 조건을 구한 결과, 배양 온도 $30^{\circ}C$, 초기 pH5.0이었고, 인산염의 첨가 효가가 있었다. 발효조를 이용한 단세포 지질 생산을 시도하여 기질 중에 탄소원대 질소원의 비에 따라 단세포 지방산 조성 및 함량에 차이가 있었으며, 탄소원 대 질소원의 비가 50에서 최대 지질계수를 나타내었다. 최종적으로 효모 배양에 의한 단세포 지질이 4g/L 생산되었고, 처리폐액의 BOD의 88.7%가 감소되었다.
Having studied the production of monoclonal antibodies for developing a diagnosis medicine which shall be detected by a high-sensitivity test by using Rhodotorula rubra as a fungi-host which had been extracted through biochemical tests and follow-up examinations on Yeast-like fungi obtained from pulmonary tissues of pulmonary tuberculosis patients who had been in Kong ju National Tuberculosis Hospital from Jun. to Dec. in 1987, I. have gained such results as follows: 1. The fusion rate was influenced by feeder cell layers, cell density and time required to the cell fusion with cells in myelona subculture. 2. The fusion rate did not show any significant difference when the cell was applyed with two molecular weights, i.e., 1500 and 4000, of polyethylene glycol. 3. Fused cells after the addition of HAT selection media were bright and round, whereas unfused myelona cells and spleen cells were shrunk and granulated. 4. The cell fusion rate turned out to be about $57.2\%$(150 wells / 264 wells). 5. $10\%$(15 wells / 150 wells) of the positive reaction was detected in monoclonal antibody screening. 6. The titer which had reacted positively to Rhodotorula rubra fungal-host was 800 times in density after the gradual dilution of the produced monoclonal antibodies with Indirect ELISA method. 7. The Strongest specific reaction came out after the peroxidase labelled anti-human Immunogobulin had been applyed to Rhodotorula rubra for activating its nature after making drift with Carbonate-bicarbonate buffer (pH 9.6) and drying completely.
세포내 및 세포벽 뿐만 아니라, 세포외에도 invertase를 구성적으로 생산하는 효모 Rh.glutinis K-24로 부터 세포외 invertase를 disc 전기 영동상으로 단일한 상태로까지 정제하였다. 정제 효소의 효소화학적 성질을 밝힌 후 이미 보고한 바 있는 세포내 및 세포벽 invertase와 그 개락적 성질을 비교 검토하였다.
효모의 균체생산에 관한 연구중 glutathione 함량이 다량 축적되는 효모를 검색한 결과, Rhodotorula glutinis 균주가 높은 균체량과 g1utathione 을 함육하였다. 이 균주에 대한 배양시간에 따른 glutathione의 함량증가를 검토한 결과 pH 6.0, 3$0^{\circ}C$에서 왕복진탕배양으로 48시간 배양하였을 때 가장 좋은 결과를 보였다. Glutathione 함량 증가를 보기 위해 기본배지에 아미노산을 첨가하여 glutathione 함량을 측정한 결과, 명아미노산의 최적농도는 0.7%, 최적 시기는 배양 후 36시간째 였다. Glutathiohe의 구성아미노산인 glutamic acid, cysteine, glycine을 조합하여 첨가할 때 219$\mu\textrm{g}$/ml으로 무첨가 배지의 73$\mu\textrm{g}$/ml에 비해 약 3배의 증가를 보였다.
In 2020, 11 Basidiomycetous yeast strains were isolated from soil samples collected from the forests of Namhansanseong in Korea. Among them, seven species were reported, but four species were unreported in Korea. To identify wild yeasts, pairwise sequence comparisons of D1/D2 domain of the 26S rRNA were performed using Basic Local Alignment Search Tool (BLAST). The cell morphologies and assimilation test are observed by phase contrast microscope and API 20C AUX kit, respectively. The 11 strains were assigned to the genera Rhodotorula (4 strains) of the order Sporidiobolales of the class Microbotryomycetes; and Cryptococcus(2 strains), Goffeauzyma (1 strains), Naganishia (2 strains) of the order Filobasidiales and Saitozyma (2 strains) of the order Tremellales of the class Tremellomycetes in the phylum Basidiomycota. The unreported yeast strains Cryptococcus gastricus 20n5-2, Goffeauzyma gilvescens 20n2-7, Naganishia adeliensis 20n8-1, and Naganishia friedmannii 20n24-1 belong to the family Filobasidiaceae. All strains had oval shaped cells and cream-colored colonies cultured on on YM agar for 3 days. In this study, we focus on the description of four unreported yeast species in Korea.
개량식 고추장으로부터 동정한 효모들은 Candida glabrata C. guilliermondii. C. humicola. C. rugosa, C. zeylanoides, Cryptococcus uniguttulatus, Pichia farinosa, Rhodotorula glutinis, Saccharomyces cerevisiae Zygosaccharomyces rouxii로 분류되었다. 재래식 고추장에서 동정한 효모는 C. glabrata, P. farinosa, S. cerevisiae, Z. rouxii로 분류되었으며 분포율이 높아 발효숙성에 깊이 관여할 것으로 생각되는 효모는 재래식과 개량식고추장에서 Candida, Pichia, Saccharomyces, Zygosaccharomyces등 4속이었다. 개량식 고추장의 발효숙성 중기와 후기에 나타난 Z. rouxii와 S. cerevisiae는 고추장용 메주에서 분리되어 그 기원이 되는 것으로 생각되며, 특히 Z. rouxii는 고추장용 메주에서 분포된 효모중 46%를 차지하였다. 발효숙성중 분포는 Z. rouxii가 15일 후에 33%, S. cerevisiae가 21일 후에 13%펄 각각 가장 높은 분포율을 보였다. Candida속의 경우 개량식 메주, 소맥코지, 콩코지 모두에서 분리되었으나 고추장의 발효숙성이 진행됨 에 따라 40%에서 10%로 점차 감소하는 경향을 보였다. 재래식 고추장에서는 발효음성 3개월 후에 Z. rouxii가 53%, 7개월 후에 S. cerevisiae가 26%로 가장 높은 분포율을 보였다. NaCl 과 glucose를 혼용한 배지에서 S. cerevisiae와 Z. rouxii 등 2종의 효모가 다른 효모에 비해 생육이 현저히 나타난 것은 이들이 고추장의 발효숙성 과정에서 분리된 빈도수가 높았다는 것과 무관하지 않을 것으로 사료된다. 특히 S. cerevisiae와 Z. rouxii 두 균주는 무염 또는 7% NaCl이 첨가된 배지에서 가장 먼저 가스를 생성하였으며 7% NaCl이 첨가된 조건하에서의 가스생산량은 Z. rouxii 및 S. cerevisiae 각각에서 0.024 ml/ml/hr, 0.013ml/ml/hr로 나타났다.
BACKGROUND: Yeast biotechnology finds applications in various industries. Hence, we sought to explore the yeasts associated with the flower of Aster spathulifolius Maxim. This study aimed to isolate yeasts from the flower of the plant and screen for biosurfactant-producing yeasts. METHODS AND RESULTS: We collected flowers of Aster spathulifolius Maxim. and performed pure isolation using four types of media. In total, 117 strains belonging to 4 genera, namely, Cryptococcus (75 strains), Aureobasidium pullulans (30 strains), Candida (11 strains), and Rhodotorula (1 strain), were isolated and identified by ITS sequencing. Upon in-depth analysis, Cryptococcus, the most dominant genus (75 strains) was categorized into the 'Unknown group'. Upon in-depth analysis of A. pullulans, we discovered the 'Unknown group I' (27 strains) and the 'Unknown group II' (2 strains), which have not been reported previously. Two A. pullulans isolates with potent surfactant activity were selected via the screening procedure. CONCLUSION: In this study, a total of 117 strains were isolated from the flower of Aster spathulifolius Maxim. In addition, two biosurfactant-producing yeasts were identified from among the isolated yeasts.
Yeehn Yeeh;Sang Hae Kim;Woo Hong Joo;Hong Ki Jun;Oh Change Kwon
KSBB Journal
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제11권3호
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pp.367-373
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1996
Rhodotorula sp. Y -55 효모의 중식특성을 etha nol, acetic acid 또는 acetaldehyde 상에서 batch culture로 조사하였다. 기질농도가 중가함에 따라 중식수율이 감소하고 유도기가 연장되었다. 비성장속도(${\mu}$)는 지수기에서 ethanol과 acetaldehyde의 초기농도에 따라 변화하였으나 acetic acid는 이와 상관이 없었으며 그 값은 $O.107h^{-1}$로 나타났다. 최대 비성장속도는 20g/L의 ethanol에서 $O.270h^{-1}$, O.2g/L의 acetaldehyde에서 $O.041h^{-1}$이었다. 또 최대 중식수융은 109/L의 ethanol에서 32.6%, 20g/L의 a acetic acid에서 25.6%와 O.2g/L의 acetaldehyde 에서 45%였다. 세포내 조단백질과 핵산 함량은 et thanol상에서 각각 41.5wt%와 4.9wt %였고 acetic acid상에서는 각각 40.2wt %와 4.7wt%로 나타났다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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