Lim, Chae Eun;Choi, Jung Nam;Kim, In A;Lee, Shin Ae;Hwang, Yong-Sic;Lee, Choong Hwan;Lim, Jun
Molecules and Cells
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제25권3호
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pp.368-375
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2008
Approximately 120 UDP-glycosyltransferases (UGTs), which are classified into 14 distinct groups (A to N), have been annotated in the Arabidopsis genome. UGTs catalyze the transfer of sugars to various acceptor molecules including flavonoids. Previously, UGT71C1 was shown to glycosylate the 3-OH of hydroxycinnamates and flavonoids in vitro. Such secondary metabolites are known to play important roles in plant growth and development. To help define the role of UGT71C1 in planta, we investigated its expression patterns, and isolated and characterized a loss-of-function mutation in the UGT71C1 gene (named ugt71c1-1). Our analyses by quantitative real-time reverse transcriptase polymerase chain reaction (qRT-PCR), microarray data mining, and histochemical detection of GUS activity driven by the UGT71C1 promoter region, revealed the tissue-specific expression patterns of UGT71C1 with highest expression in roots. Interestingly, upon treatment with methyl viologen (MV, paraquat), ugt71c1-1 plants displayed enhanced resistance to oxidative stress, and ROS scavenging activity was higher than normal. Metabolite profiling revealed that the levels of two major glycosides of quercetin and kaempferol were reduced in ugt71c1-1 plants. In addition, when exposed to MV-induced oxidative stress, eight representative ROS response genes were expressed at lower levels in ugt71c1-1 plants, indicating that ugt71c1-1 probably has higher non-enzymatic antioxidant activity. Taken together, our results indicate that ugt71c1-1 has increased resistance to oxidative stress, suggesting that UGT71C1 plays a role in some glycosylation pathways affecting secondary metabolites such as flavonoids in response to oxidative stress.
In the post-genome period, the technique for identifying gene expression has been progressed to high throughput screening. In the field of molecular nutrition, the use of screening techniques to clarify molecular function of specific nutrients would be very advantageous. In this study, we have evaluated Zn-regulated gene expression in Zn-deficient, homocystein-treated EA.hy926 cells, using cDNA microarray, which can be used to screen the expression of many genes simultaneously. The information obtained can be used for preliminary assessment of molecular and signaling events modulated by Zn under pro-atherogenic conditions. EA.hy926 cells derived from human umbilical vein endothelial cells were cultured in Zn-adequate (control, 15 $\mu$M Zn) or Zn-deficient (experimental, 0 $\mu$M Zn) Dulbecco's MEM media under high homocysteine level (100 $\mu$M) for 3 days of post-confluency. Cells were harvested and RNA was extracted. Total RNA was reverse-transcribed and the synthesized cDNA was labeled with Cy3 or Cy5. Fluorescent labeled cDNA probe was applied to microarray slides for hybridization, and the slide was then scanned using a fluorescence scanner. The expression of seven genes was found to be significantly decreased, and one significantly increased, in response to treatment of EA.hy926 cells with Zn-deficient medium, compared with Zn-supplemented medium. The upregulated genes were oncogenes and tumor suppressor genes, cell cycle-related genes and transporter genes. The down-regulated gene was RelB, a component of the NF-kappaB complex of transcription factors. The results of this study imply the effectiveness of cDNA microarray for expression profiling of a singly nutrient deficiency, namely Zn. Furthur study, using tailored-cDNA array and vascular endothelial cell lines, would be beneficial to clarify the molecular function of Zn in atherosclerosis, more in detail.
본 논문에서 역 방향 링크 채널에 대해 비 선형 등화기를 이용하여 CDMA 셀룰라 시스템을 연구하였다. 일반적으로 무선 통신에서 불확실한 채널 특성 때문에 Observable 들의 확률분포는 유한 세트의 파라미터로 규정될 수 없다. 대신에 training 샘플에 기반을 둔 Quantile과 Vector Quantizer를 사용함으로서 유한 수의 disjoint된 영역으로 m차 샘플 공간으로 분할하였다. 제안된 알고리듬은 RMSA 알고리즘에 의해 예측된 Quantile와 조건부 분할 모멘트에 따른 regression function의 부분적인 근사에 근간을 두고 있다. 본 논문의 등화기와 검출기는 잡음 분포의 Variation에 민감하지 않다는 관점에서 상당히 강한 특성을 보여 준다. 주요 아이디어는 Robust equalizer와 Robust partition detector가 어떤 환경의 무선 채널 하에서도 partition되지 않은 Observation space의 일반적인 등화기 보다 Observation의 등 확률로 분할된 부 공간에서 더 낳은 성능을 보여 준다. 또한 이런 개념을 CDMA 시스템에 적용하여 BER 성능을 분석하였다.
본 논문에서는 Perfect Shuffle에 의한 5치 논리 회로의 구성에 관한 한 가지 방법을 제시하였다. 먼저, Perfect Shuffle 기법과 Kronecker 곱에 의한 5치 논리함수의 입출력 상호연결에 대하여 논하였고, GF(5)의 가산회로와 승산회로를 이용하여 5치 Reed-Muller 전개식의 변환행렬과 역변환행렬을 실행하는 기본 셀을 설계하였다. 이 기본 셀들과 Perfect Shuffle과 Kronecker 곱에 의한 입출력 상호연결 방법을 이용하여 5치 Reed-Muller 전개식에 의한 5치 논리 회로를 구현하였다. 제시된 5치 Reed-Muller 전개식의 설계방법은 모듈구조를 기반으로 하여 행렬변환을 이용하므로 동일한 함수에 대하여 타 방법과 비교하여 간단하고 회로의 가산회로와 승산회로를 줄이는데 매우 효과적이다. 제안된 5치 논리회로의 설계방법은 회선경로 선택의 규칙성, 간단성, 배열의 모듈성과 병렬동작의 특징을 가진다.
A neoglycolipid, N-stearyl lactobionamide(N-SLBA) was synthesized and the incorporation of the neoglycolipid into liposomes was achieved in order to prepare neo-galactosylated liposome as potential drug carrier for active targeting to galactose receptor existing cell and tissue. N-SLBA was synthesized by the covalent linkage between carboxyl group of lactobionic acid and amino group of stearylamine(SA). The yield of N-SLBA was about 52.3%. It was identified with $1650\;cm^{-1}$ in IR chart, 7.5 ppm in NMR spectra, $61^{\circ}C$ endothermic peak in DSC heating curve. Surface-modified large unilamellar vesicle with galactose(N-SLBA-LUV) could be prepared with N-SLBA by reverse evaporation method. N-SLBA-LUV was identified by TEM and measuring of membrane function. The maximum amount of N-SLBA incorporated into liposome is up to about 15 mol%. Compared with control liposome (SA-LUV), N-SLBA-LUV showed lower encapsulation efficiency of MTX. It might due to the loss of positive surface charge of stearylamine. N-SLBA-LUV was similar to SA-LUV in aspect of osmotic behavior. N-SLBA-LUV prepared with N-SLBA would be expected to be a good carrier for active targeting to galactose receptor existing cell and tissue.
Multidrug resistance (MDR) is one of the most significant obstacles in cancer chemotherapy. One of the mechanisms involved in the development of MDR is the over-expression of P-glycoprotein (P-gp). It is widely known that natural compounds found in vegetables, fruits, plant-derived beverages and herbal dietary supplements not only have anticancer properties, but may also modulate P-gp activity. Therefore, the purpose of this investigation was to examine the effects of naturally occurring products on P-gp function in human breast cancer cell lines, MCF-7 (sensitive) and MCF-7/ADR (resistant). The accumulation of daunomycin (DNM), a P-gp substrate, was greater in the sensitive cells compared to the resistant cells, while the efflux of DNM was higher in the resistant cells compared to the sensitive cells over a period of 2h. The $IC_{50}$ value of DNM in the resistant cells was about 22 times higher than that in the sensitive cells, indicating an over-expression of P-gp in the resistant cells, MCF-7/ADR. All of the compounds tested, with the exception of fisetin, significantly decreased the $IC_{50}$ value of DNM. Biochanin A showed the greatest increase in $[^3H]-DNM$ accumulation, increasing by $454.3{\pm}19.5%$ in the resistant cells, whereas verapamil, the positive control, increased the accumulation by $229.4{\pm}17.6%$. Also, the accumulation of $[^3H]-DNM$ was increased substantially by quercetin and silymarin while it was reduced by fisetin. Moreover, biochanin A, silymarin, and naringenin significantly decreased DNM efflux from MCF-7/ADR cells compared with the control. These results suggest that some flavonoids such as biochanin A and silymarin may reverse MDR by inhibiting the P-gp function.
The present study aimed to examine the effect of allyl isothiocyanate (AITC) on chronic obstructive pulmonary disease and to investigate whether upregulation of multidrug resistance-associated protein 1 (MRP1) associated with the activation of the PARK7 (DJ-1)/nuclear factor erythroid 2-related factor 2 (Nrf2) axis. Lung function indexes and histopathological changes in mice were assessed by lung function detection and H&E staining. The expression levels of Nrf2, MRP1, heme oxygenase-1 (HO-1), and DJ-1 were determined by immunohistochemistry, Western blotting and reverse transcription-quantitative polymerase chain reaction. Next, the expression of DJ-1 in human bronchial epithelial (16HBE) cells was silenced by siRNA, and the effect of DJ-1 expression level on cigarette smoke extract (CSE)-stimulated protein degradation and AITC-induced protein expression was examined. The expression of DJ-1, Nrf2, HO-1, and MRP1 was significantly decreased in the wild type model group, while the expression of each protein was significantly increased after administration of AITC. Silencing the expression of DJ-1 in 16HBE cells accelerated CSE-induced protein degradation, and significantly attenuated the AITC-induced mRNA and protein expression of Nrf2 and MRP1. The present study describes a novel mechanism by which AITC induces MRP1 expression by protecting against CS/CSE-mediated DJ-1 protein degradation via activation of the DJ-1/Nrf2 axis.
Jeon, Se Jin;Kim, Boseong;Ryu, Byeol;Kim, Eunji;Lee, Sunhee;Jang, Dae Sik;Ryu, Jong Hoon
Biomolecules & Therapeutics
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제25권3호
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pp.249-258
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2017
To examine the effect of biflorin, a component of Syzygium aromaticum, on memory deficit, we introduced a scopolamine-induced cognitive deficit mouse model. A single administration of biflorin increased latency time in the passive avoidance task, ameliorated alternation behavior in the Y-maze, and increased exploration time in the Morris water maze task, indicating the improvement of cognitive behaviors against cholinergic dysfunction. The biflorin-induced reverse of latency in the scopolamine-treated group was attenuated by MK-801, an NMDA receptor antagonist. Biflorin also enhanced cognitive function in a naïve mouse model. To understand the mechanism of biflorin for memory amelioration, we performed Western blot. Biflorin increased the activation of protein kinase C-${\zeta}$ and its downstream signaling molecules in the hippocampus. These results suggest that biflorin ameliorates drug-induced memory impairment by modulation of protein kinase C-${\zeta}$ signaling in mice, implying that biflorin could function as a possible therapeutic agent for the treatment of cognitive problems.
In post-genome period, the technique for identifying gene expression has been changed to high throughput screening. In the field of molecular nutrition, the need for this technique to clarify molecular function of the specific nutrient is essential. In this study, we have tested the zinc-regulated gene expression in zinc-deficient U937 cells, using cDNA microarray which is the cutting-edge technique to screen large numbers of gene expression simultaneously. The study result can be used for the preliminary gene screening data for clarifying, using monocyte U937 cell line, molecular Zn aspect in atherosclerosis. U937 cells were cultured in Zn-adequate (control, 12 $\mu$M Zn) or Zn-deficient (experimental, 0 $\mu$M Zn) ESMI media during 2 days, respectively. Cells were harvested and RNA was extracted. Total RNA was reverse-transcriptinized and synthesized cDNA probe labeled with Cy-3. fluorescent labeled cDNA probe was applied to microarray slide for hybridization slide, and after then, the slide was scanned using fluorescence scanner. ‘Highly expressed genes’ in Zn-deficient U937 cells, comparing to Zn-adequate group, are mainly about the genes for motility protein, immune system protein, oncogene and tumor suppressor and ‘Less highly expressed genes’ are about the genes for transcription, apoptosis associated protein, cell cycle, and several basic transcription factors. The results of this preliminary study imply the effectiveness of cDNA microarray for expression profiling of a singly nutrient deficiency, specially Zn. Furthur study, using tailored-cDNA array and capillary endothelial cell lines, would be beneficial to clarify molecular Zn function, more in detail.
Objective: To examine the regulatory effects of exercise on myokine expression in horse skeletal muscle cells, we compared the expression of several myokine genes (interleukin 6 [IL-6], IL-8, chemokine [C-X-C motif] ligand 2 [CXCL2], and chemokine [C-C motif] ligand 4 [CCL4]) after a single bout of exercise in horses. Furthermore, to establish in vitro systems for the validation of exercise effects, we cultured horse skeletal muscle cells and confirmed the expression of these genes after treatment with hydrogen peroxide. Methods: The mRNA expression of IL-6, IL-8, CXCL2, and CCL4 after exercise in skeletal muscle tissue was confirmed using quantitative-reverse transcriptase polymerase chain reactions (qRT-PCR). We then extracted horse muscle cells from the skeletal muscle tissue of a neonatal Thoroughbred. Myokine expression after hydrogen peroxide treatments was confirmed using qRT-PCR in horse skeletal muscle cells. Results: IL-6, IL-8, CXCL2, and CCL4 expression in Thoroughbred and Jeju horse skeletal muscles significantly increased after exercise. We stably maintained horse skeletal muscle cells in culture and confirmed the expression of the myogenic marker, myoblast determination protein (MyoD). Moreover, myokine expression was validated using hydrogen peroxide ($H_2O_2$)-treated horse skeletal muscle cells. The patterns of myokine expression in muscle cells were found to be similar to those observed in skeletal muscle tissue. Conclusion: We confirmed that several myokines involved in inflammation were induced by exercise in horse skeletal muscle tissue. In addition, we successfully cultured horse skeletal muscle cells and established an in vitro system to validate associated gene expression and function. This study will provide a valuable system for studying the function of exercise-related genes in the future.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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