• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제25권12호
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• pp.2135-2145
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• 2015

VP7, an outer capsid protein of grass carp reovirus (GCRV), was expressed and displayed on the surface of Saccharomyces cerevisiae for developing an efficient vaccine against hemorrhagic disease of grass carp. The result of flow cytometry analysis indicated that protein VP7 could be displayed on the surface of yeast cells after inducing with galactose. The expression of VP7 was confirmed by western blot analysis and further visualized with confocal microscopy. The specific antibodies against VP7 generated from mice were detectable from all immune groups except the control group, which was immunized with untransformed yeast cells. The displaying VP7 on glycosylation-deficient strain EBYΔMnn9 was detected to induce a relatively low level of specific antibody amongst the three strains. However, the antiserum of EBYΔM9-VP7 showed relative high capacity to neutralize GCRV. Further neutralization testing assays indicated that the neutralizing ability of antiserum of the EBYΔM9-VP7 group appeared concentration dependent, and could be up to 66.7% when the antiserum was diluted to 1:50. This result indicates that appropriate gene modification of glycosylation in a yeast strain has essential effect on the immunogenicity of a yeast-based vaccine.

• 한국동물위생학회지
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• 제34권2호
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• pp.139-148
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• 2011

Avian reovirus (ARV) and fowl adenovirus (FAdV) were evaluated for pathogenicity in specific pathogen free (SPF) chickens. ARV was isolated from the broilers with history of malabsorption syndrome (MAS). FAdV was isolated from the layer breeders with inclusion body hepatitis and hydropericardium syndrome. Total 6 inoculated groups including 1 un-inoculated group were organized and inoculated with the ARV and/or FAdV by oral route. The minimal pathological lesions and lower viral gene detection rates were present in the ARV inoculated groups compared to those of FAdV or ARV/FAdV inoculated groups. Common gross lesions in the ARV inoculated group were distended intestine with foamy contents and in the FAdV group there were foamy cecal contents and hydropericardium among the evaluation methods such as gross and histological lesion, viral gene detection, body weight and serum chemistry, histopathological lesion score was reliable especially in the liver lesions such as hepatic necrosis and lymphocytic infiltration. However, we did not success to evaluate the synergetic effect of mixed infection of ARV and FAdV in this study. Therefore, we need further study to reproduce malabsorption syndrome of ARV infection using different viral agent such as rotavirus and using different dose of virus.

• 한국동물위생학회지
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• 제29권1호
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• pp.9-18
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• 2006

The ELISA titers to avian pneumovirus (APV) and avian reovirus (ARV) were surveyed to sera of 38 breeder farms (78 blocks, 1,560 hens) in Jeonbuk province during February to October, 2005. In APV, the positive ELISA were detected 36 (94.7%) breeders, 71 (91.0%) blocks, 1,057 (67.8%) hens, and their S/P ratio was 1.940. Regionally, the positivity of 24 breeders farms in the Jeonju, Jeongeup, Namwon, and Jangsu were noted as 100%, whereas 85.7% in Iksan. The positivity to species such as Cobb (20), Ross (13) and Hanhyup-3 (5), all of the breeding farms were detected as positive, 40 (86.9%), 17 (94.4%) and 14 (100.0%) in blocks, 553 (60.1%), 285 (79.2%) and 219 (78.2%) in hens, and their mean S/P ratio were 1.677, 1.769 and 2.254, respectively. The positivity of the breeders vaccinated with ARV, all of the 9 breeder farms (38 blocks) were noted as 100%, but 627 (82.5%) in hens, and its mean S/P ratio was 1.273. Whereas nonvaccinated with ARV were 28 (96.5%) in breeders farms, 38 (95.0%) in blocks, 660 (82.5%) in hens, and the mean S/P ratio was 1.612. In species which were vaccinated with ARV, 11 breeder farms (38 blocks) were noted as 100%, but 82.5% in hens, and their mean S/P ratio were 1.315. Whereas in nonvaccinated with ARV, 25 (92.6%) in farms, 38 (95.0%) in blocks and 660 (82.5%) in hens were positive, and their mean S/P ratio was 1.532.

• 한국어병학회지
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• 제23권3호
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• pp.335-342
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• 2010

2008년 3월 인도네시아로부터 수입된 paradise fish에서 대량폐사가 발생하여 병원체 검사를 실시한 결과, megalocytivirus 및 Mycobacterium sp.가 검출되었으며, CHSE-214세포에서 미동정 바이러스가 분리되었다. 본 연구에서는 미동정 바이러스의 특성을 조사하였으며, 또한 병원성 실험을 통해 paradise fish의 대량 폐사와의 연관성을 조사하였다. 분리 바이러스는 CHSE-214, BF-2, GF, SSN-1, FSP 및 FFN 세포에서 합포체의 세포변성효과를 나타내었고 IUdR 및 chloroform 처리에 감염성이 상실되지 않으며, 산 (pH 3), 알카리 (pH 11) 및 열 ($56^{\circ}C$, 30분)에 안정하였다. 핵산 분석 결과에서는 적어도 10개의 segment (0.7-3.6 kb)를 지닌 RNA 바이러스로 확인되었으며, 전자현미경 관찰 결과, 약 65 nm 크기로 인벨롭이 없으며 2중의 capsid를 지닌 바이러스가 세포질에서 관찰되었다. 이상의 결과는 Reoviridae family에 속하는 바이러스의 전형적인 특성과 일치하므로 paradise fish에서 분리된 바이러스는 reovirus로 확인되었다. Reovirus를 사용한 감염실험에서는 병원성이 나타나지 않아, reovirus는 paradise fish의 대량 폐사의 직접적인 원인이 아닐 것으로 사료되었다.

• 한국가금학회지
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• 제35권1호
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• pp.85-99
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• 2008

국내 육계 농장에서 avian reovirus의 감염 여부를 확인하기 위한 ELISA 검사법을 이용한 혈청 검사와 바이러스 분리 및 2개 농장에서 분리된 바이러스를 SPF 닭에 공격 접종하여 병원성을 확인한 결과, 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. 1일령 육계 병아리에서 avian reovirus에 대한 모체이행 항체 역가 검사를 통하여 육용종계에서 avian reovirus에 대한 항체 보유 상태가 매우 다양하며, 이로 인해 후 대 병아리의 항체 수준도 매우 불균일하게 분포된다는 것을 알 수 있었다. 2. 육계에서 avian reovirus에 대한 모체 이행 항체 역가는 14일령 전에 대부분 소실되며, 그 이후 혈청 역가가 상승하는 것이 확인되어 국내 육계 농장에서도 avian reovirus가 감염이 되는 것을 확인할 수 있었으며, 각 농장의 감염 상황 및 계군의 면역 정도에 따라 혈청 역가가 다양하게 분포함을 알 수 있었다. 3. RT-PCR을 이용한 avian reovirus 확인 결과, 1일령 병아리에서 모두 음성으로 확인되었고, 14일령과 출하 일령에 2개 농장에서 양성으로 나타나, 국내 육계 농장에서 avian reovirus 감염은 주로 14일령 이후에 나타나는 것으로 판단되었다. 4. 본 실험에서 실시한 ELISA, RT-PCR, 전자현미경 관찰을 통하여 국내 육계 농가에서의 ARV 감염과 존재를 확인할 수 있었다. 그러나 검사 방법간의 결과가 불일치한 것은 avian reovirus의 분리가 감염된 농장의 상황, 닭의 감염 일령 및 분리 장기에 따라 차이가 있음을 알 수 있었다. 5. 9일령 SPF 부화란 접종을 통해 2개의 육계 농장에서 avian reovirus가 분리되었고 분리된 바이러스를 3주령 SPF 닭에 공격 접종 시 혈청 역가의 상승 및 주요 조직에서 바이러스가 확인되었으나, 특이적인 임상 증상은 관찰되지 않았다. 이는 닭의 연령에 따라 avian reovirus에 저항성이 있는 것으로 여겨지며 ARV의 조직 내 잔존은 감염 장기에 따라 다르다는 것을 알 수 있었다.

• 미생물학회지
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• 제44권3호
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• pp.228-236
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• 2008

세포배양 유래 생물의 약품 생산 공정에서 다양한 바이러스가 오염된 사례가 있기 때문에 바이러스 안전성 검증이 필수적이다. Reovirus type 3 (Reo-3)는 동물 세포주와 동물 세포 배양 공정에 오염되는 대표적인 바이러스이다. 세포배양 유래 생물의약품의 Reo-3 안전성을 확보하기 위해, 세포주, 원료물질, 제조공정, 완제품에서 Reo-3를 정략적으로 검출하고, 제조공정에서 Reo-3 제거 검증을 위한 시험법으로 활용이 가능한 real-time RT-PCR 시험법을 확립하였다. Reo-3에 특이적인 primer를 선별하였으며, 형광염료 SYBR Green I을 사용하여 Reo-3 RNA 정략 검출 시험법을 최적화하였다. 세포배양법에 의한 감염역가와 비교한 결과 real-time RT-PCR 민감도는 $3.2{\times}10^0\;TCID_{50}/ml$이었다. 확립된 시험법의 신뢰성(reliability)을 보증하기 위해 시험법 검증을 실시한 결과 특이성(specificity)과 재현성(reproducibility)이 우수함을 확인하였다. 확립된 real-time RT-PCR을 생물의약품 제조공정 검증에 적용할 수 있는지 확인하기 위하여 인위적으로 Reo-3를 오염시킨 CHO 세포에서 Reo-3 검출 시험을 실시한 결과 Reo-3를 감염시킨 CHO 세포와 세포배양 상청액에서 Reo-3를 정략적으로 검출할 수 있었다. 또한 바이러스필터 공정에서 Reo-3제거 효과를 감염역가 시험법과 비교 검증한 결과 더 빠른 시간에 동일한 결과를 얻을 수 있었다. 위와 같은 결과에서 확립된 Reo-3 real-time RT-PCR 시험법은 생물의약품 안전성 보증을 위한 세포주 검증, 생물의 약품 생산 공정 검증, 바이러스 제거 공정 검증 등에서 감염 역가 시험법을 대신할 수 있는 신속하고, 특이성과 민감성이 우수한 시험법임을 확인하였다.

• Molecules and Cells
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• 제26권4호
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• pp.396-403
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• 2008

The first ORF of the ARV S1133 S1 segment encodes the nonstructural protein p10, which is responsible for the induction of cell syncytium formation. However, p10-dependent signaling during syncytium formation is fully unknown. Here, we show that dominant negative RhoA, Rho inhibitor C3 exoenzyme, ROCK/Rho-kinase inhibitor Y-27632 and Rac1 inhibitor NSC23766 inhibit p10-mediated cell fusion. p10 over-expression is concomitant with activation and membrane translocation of RhoA and Rac1, but not cdc42. RhoA and Rac1 downstream events, including JNK phosphorylation and transcription factor AP-1 and $NF-{\kappa}B$ activation, as well as MLC expression and phosphorylation are simultaneously activated by p10. p10 point mutant T13M possessed 20% fusion-inducing ability and four p10 fusion-deficient mutants V15M, V19M, C21S and L32A reduced or lost their ability to activate RhoA and Rac1 signaling. We conclude that p10-mediated syncytium formation proceeds by utilizing RhoA and Rac1-dependent signaling.

• 대한수의학회지
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• 제61권2호
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• pp.13.1-13.8
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• 2021

Mammalian reovirus (MRV) causes respiratory and intestinal disease in mammals. Although MRV isolates have been reported to circulate in several animals, there are no reports on Korean MRV isolates from wildlife. We investigated the biological and molecular characteristics of Korean MRV isolates based on the nucleotide sequence of the segment 1 gene. In total, 144 swabs from wild animals were prepared for virus isolation. Based on virus isolation with specific cytopathic effects, indirect fluorescence assays, electron microscopy, and reverse transcription-polymerase chain reaction, only one isolate was confirmed to be MRV from a Korean roe deer (Capreolus pygargus). The isolate exhibited a hemagglutination activity level of 16 units with pig erythrocytes and had a maximum viral titer of 10^5.7 50% tissue culture infectious dose (TCID₅₀)/mL in Vero cells at 5 days after inoculation. The nucleotide and amino-acid sequences of the partial segment S1 of the MReo2045 isolate were determined and compared with those of other MRV strains. The MReo2045 isolate had nucleotide sequences similar to MRV-3 and was most similar (96.1%) to the T3/Bat/Germany/342/08 strain, which was isolated in Germany in 2008. The MReo2045 isolate will be useful as an antigen for sero-epidemiological studies and developing diagnostic tools.

• 상하수도학회지
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• 제22권6호
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• pp.665-672
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• 2008

It is necessary to implement the management plan for the production of safe and high quality drinking water from lake Paldang. To set up the plan, the water quality items such as BOD, T-P, SS and coliform were monitored for ten years, 1997~2006, and the influence of raw water quality on the drinking water treatment process and the treated water quality was also evaluated from 2004 to 2006. In conclusion, water quality items such as turbidity(SS), T-P(eutrophication), pathogens(fecal coliforms, enterovirus, reovirus, giardia, cryptosporidium), DOC(precursor of disinfection by-products), and micro-pollutants(phthalates, VOCs, heavy metals) are should be managed to get safe and high quality drinking water from lake Paldang.

• 대한수의사회지
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• 제46권8호
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• pp.726-735
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• 2010

전염성기관지염 바이러스(infectious bronchitis virus: IBV), 조류 뉴모 바이러스(Avian pneumovirus: APV), 뉴캣슬병 바이러스 (Newcastle disease virus: NDV), 조류인플루엔자 바이러스(avian influenza virus: AIV) 전염성 후두기관염 바이러스 (infectious laryngotracheitis virus: ILTV)는 닭의 호흡기에 직접 감염하여 호흡기질환을 일으키는 대표적인 바이러스로 알려져 있다. 그 밖에 아데노바이러스(adenovirus)와 레오바이러스 (reovirus)도 닭의 상부호흡기에 침투하여 피해를 입히는 이차적 원인체로 작용할 수 있다. 이들중 APV와 ILTV는 닭의 호흡기도에 국한되어 증식하지만 IBV, NDV, AIV의 경우 호흡기도 이외의 장기에서 증식이 가능하여 그 피해가 다양하게 나타나 문제 시 되기도 한다 (예: 산란장기 및 신장 (IBV), 소화기 (NDV, IBV, AIV), 중추신경계 (NDV, AIV)). 이외에도 상당수의 감염성 질환이 닭의 호흡기에 영향을 미칠 수 있으나, 해당 농장의 호흡기 피해가 어떤 질병에 의한 것인지 명확히 파악하지 못한 채 단순 항생제 처방에만 의지하는 경우가 많은 것이 현실이다. 따라서 국내 양계농가에서 문제시되는 주요 호흡기 질병과 이들의 감수성을 증대시키는 요인을 파악하는 것이 필요하고, 호흡기 질병의 피해에 대한 재인식과 아울러 호흡기 질병 피해 감소를 위한 진단과 예방노력이 하루속히 정착되어야 할 것이다. 본지에서는 대표적인 호흡기 질병 세가지(전염성기관지염, 조류뉴모바이러스감염증, 뉴캣슬병)의 최근 발생동향과 그 대처방안에 대하여 소개하고자 한다.