철의 대사과정에 관여하는 ferritin 단백질의 발현은 ferritin transcript의 5'-untranslated region에 위치한 iron-responsive element (IRE)와 철 농도 조절 단백질의 결합에 의해 조절된다. 이러한 ferritin의 생성에 관여하는 구조적인 요소를 밝히기 위해, RNA 이차구조인 IRE의 bulge 부분을 다른 염기로 변환시켜 철 농도 조절단백질에 의한 RNA 결합력과 ferritin 단백질의 생성의 저해정도를 비교 측정하였다. 측정된 결과로부터 IRE의 bulge 부분의 시토신 염기배열만이 RNA 이차구조의 형성에 중요한 작용을 하여 ferritin 합성을 조절할 수 있는 것을 보였다.
Small RNAs (sRNAs) are widespread and play major roles in regulation circuits in bacteria. Previously, we have demonstrated that transcription of esrE is under the control of its own promoter. However, the regulatory elements involved in EsrE sRNA expression are still unknown. In this study, we found that different cis-regulatory elements exist in the promoter region of esrE. We then screened and analyzed seven potential corresponding trans-regulatory elements by using pull-down assays based on DNA affinity chromatography. Among these candidate regulators, we investigated the relationship between the ferric uptake regulator (Fur) and the EsrE sRNA. Electrophoresis mobility shift assays (EMSAs) and β-galactosidase activity assays demonstrated that Fur can bind to the promoter region of esrE, and positively regulate EsrE sRNA expression in the presence of Fe2+.
The upstream regulatory region (URR) of bovine papillomavirus type 1 (BPV) contains promoters and a conditional transcriptional enhancer that is trans-activated by the viral E2 protein. After deleting the 5' and 3' ends of BPV URR, BamHI linkers were inserted into several positions of BPV URR without causing an addition or a deletion of URR sequences. Most linker scanning mutations did not show any effects on the transcription of P7940 and P89 promoters in BPV URR. However, several mutants showed reduced transcriptional activities. Based on our results we found that the AP-2 and Sp1 binding sites were important for basal level transcription of BPV URR in the absence of the E2 protein and that the CTF/NF-1 site is dispensable for E2 transactivation of BPV URR transcription.
The Vibrio vulnificus vuuA gene, of which expression is repressed by a complex of iron and ferric uptake regulator (Fur), was characterized to localize the Fur-binding site in its upstream regulatory region. In silico analysis suggested the presence of two possible Fur-binding sites; one is a classical Fur-box and the other is a previously reported distinct Fur-binding site. Site-directed mutagenesis and DNase I protection assays revealed the binding site for the iron-Fur complex, which includes an extended inverted repeat containing a homologous sequence to the classical Fur-box.
In evaluating current environmental protection policy, economists often note that current regulations are more costly than necessary to meet environmental quality standards. While the a priori case can be made that current regulatory approaches entail higher-than-necessary costs to attain environmental standards, there is relatively little empirical evidence to support this claim in Korea. The purpose of this analysis is to supply some of the missing evidence by presenting the results of one study that assesses some of the potential savings associated with implementing economic, rather than command-and-control regulatory approaches to abate one type of air pollution in one region, in Korea, Specifically, the analysis examine the costs of meeting a long-term standard for TSP under the alternative control strategies for stationary sources of TSP in Ulsan Industrial Complex region. The alternative strategies that are considered are current command-and-control and various marketable permit designs. The analysis shows that the most efficient policy of emissions control is economic approaches, supporting results of previous empirical studies conducted in other countries.
Probing Streptomyces albus ATCC 21838 chromosomal DNA with a proline tRNA sequence resulted in an isolation of a putative integrating element in the 6.4-kb EcoRI fragment. It was found that Streptomyces lividans TK-24 transformed with a cloned DNA fragment on a multicopy plasmid, produced a higher level of spore pigment and mycelial red pigment on a regeneration agar. Furthermore, the transformant S. lividans TK-24 produced a markedly increased level of undecylprodigiosin in a broth culture. A nucleotide sequence analysis of the cloned region revealed several open reading frames homologous to the integrases of integrating plasmids or temperate bacteriophages, signal-transducing regulatory proteins with a conserved ATP-binding domain, oxidoreductases ($\beta$-ketoacyl reductase), and an AraC-like transcriptional regulator. To examine the effect on antibiotic production, each coding region was overexpressed separately from the other genes in the region in S. lividans TK-24 with; pJHS3044 for the expression of the signal-transducing regulatory protein homologue, pJHS3045 for the homologue of oxidoreductase, and pJHS3051 for the homologue of the AraC-like transcriptional regulator. Phenotypic studies of S. lividans TK-24 strains harboring plasmids for the overexpression of individual genes suggested the following effects of the genes on antibiotic production: The oxidoreductase homologue stimulated the production of actinorhodin and undecylprodigiosin, which was influenced by the culture conditions; the homologue of the AraC-like transcriptional regulator was the most effective factor in antibiotic production within all the culture conditions tested; the signal-transducing regulatory protein homologue repressed the effect due to the homologue of the AraC-like transcriptional regulator, however, the antibiotic production was derepressed upon entering the stationary phase.
Li, Yue;Jiang, Zhao-Zhao;Chen, Hai-Xu;Leung, Wai-Keung;Sung, Joseph J.Y.;Ma, Wei-Jun
BMB Reports
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제38권4호
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pp.500-506
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2005
HOX11 encodes a homeodomain-containing transcription factor which directs the development of the spleen during embryogenesis. While HOX11 expression is normally silenced through an unknown mechanism in all tissues by adulthood, the deregulation of HOX11 expression is associated with leukemia, such as T-cell acute lymphoblastic leukemia. The elucidation of regulatory elements contributing to the molecular mechanism underlying the regulation of HOX11 gene expression is of great importance. Previous reports of HOX11 regulatory elements mainly focused on the 5'-flanking region of HOX11 on the chromosome related to transcriptional control. To expand the search of putative cis-elements involved in HOX11 regulation at the post-transcriptional level, we analyzed HOX11 mRNA 3'-untranslated region (3'UTR) and found an AU-rich region. To characterize this AU-rich region, in vitro analysis of HOX11 mRNA 3'UTR was performed with human RNA-binding protein HuR, which interacts with AU-rich element (ARE) existing in the 3'UTR of many growth factors' and cytokines' mRNAs. Our results showed that the HOX11 mRNA 3'UTR can specifically bind with human HuR protein in vitro. This specific binding could be competed effectively by typical ARE containing RNA. After the deletion of the AU-rich region present in the HOX11 mRNA 3'UTR, the interaction of HOX11 mRNA 3'UTR with HuR protein was abolished. These findings suggest that HOX11 mRNA 3'UTR contains cis-acting element which shares similarity in the action pattern with RE-HuR interactions and may involve in the post-transcriptional regulation of the HOX11 gene.
Shin, Kyoung-Hwa;Choi, Boram;Park, Yang-Seo;Cho, Nam Jeong
Molecules and Cells
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제26권6호
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pp.554-557
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2008
Double-stranded RNA (dsRNA) induces gene silencing in a sequence-specific manner by a process known as RNA interference (RNAi). The RNA-induced silencing complex (RISC) is a multi-subunit ribonucleoprotein complex that plays a key role in RNAi. VIG (Vasa intronic gene) has been identified as a component of Drosophila RISC; however, the role VIG plays in regulating RNAi is poorly understood. Here, we examined the spatial and temporal expression patterns of VIG-1, the C. elegans ortholog of Drosophila VIG, using a vig-1::gfp fusion construct. This construct contains the 908-bp region immediately upstream of vig-1 gene translation initiation site. Analysis by confocal microscopy demonstrated GFP-VIG-1 expression in a number of tissues including the pharynx, body wall muscle, hypodermis, intestine, reproductive system, and nervous system at the larval and adult stages. Furthermore, western blot analysis showed that VIG-1 is present in each developmental stage examined. To investigate regulatory sequences for vig-1 gene expression, we generated constructs containing deletions in the upstream region. It was determined that the GFP expression pattern of a deletion construct (${\Delta}-908$ to -597) was generally similar to that of the non-deletion construct. In contrast, removal of a larger segment (${\Delta}-908$ to -191) resulted in the loss of GFP expression in most cell types. Collectively, these results indicate that the 406-bp upstream region (-596 to -191) contains essential regulatory sequences required for VIG-1 expression.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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