The Epstein-Barr virus-transformed lymphoblastoid cell line (LCL) is one of the major genomic resources for human genetics and immunological studies. Use of LCLs is currently extended to pharmacogenetic studies to investigate variations in human gene expression as well as drug responses between individuals. We evaluated four common internal controls for gene expression analysis of selected hematopoietic transcriptional regulatory genes between B cells and LCLs. In this study, the expression pattern analyses showed that TBP (TATA box-binding protein) is a suitable internal control for normalization, whereas GAPDH (glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase) is not a good internal control for gene expression analyses of hematopoiesis-related genes between B cells and LCLs at different subculture passages. Using the TBP normalizer, we found significant gene expression changes in selected hematopoietic transcriptional regulatory genes (downregulation of RUNX1, RUNX3, CBFB, TLE1, and NOTCH2 ; upregulation of MSC and PLAGL2) between B cells and LCLs at different passage numbers. These results suggest that these hematopoietic transcriptional regulatory genes are potential cellular targets of EBV infection, contributing to EBV-mediated B-cell transformation and LCL immortalization.
Hui-Won Park;Sun-Hee Park;Hyeon-Ju Jo;Tae-Gyu Kim;Jeong Hyun Lee;Seung-Goo Kang;Young-Saeng Jang;Pyeung-Hyeun Kim
IMMUNE NETWORK
/
v.20
no.5
/
pp.38.1-38.12
/
2020
Dendritic cells (DCs) are professional antigen-presenting cells (APCs) that initiate both T-cell responses and tolerance. Tolerogenic DCs (tDCs) are regulatory DCs that suppress immune responses through the induction of T-cell anergy and Tregs. Because lactoferrin (LF) was demonstrated to induce functional Tregs and has a protective effect against inflammatory bowel disease, we explored the tolerogenic effects of LF on mouse bone marrow-derived DCs (BMDCs). The expression of CD80/86 and MHC class II was diminished in LF-treated BMDCs (LF-BMDCs). LF facilitated BMDCs to suppress proliferation and elevate Foxp3+ induced Treg (iTreg) differentiation in ovalbumin-specific CD4+ T-cell culture. Foxp3 expression was further increased by blockade of the B7 molecule using CTLA4-Ig but was diminished by additional CD28 stimulation using anti-CD28 Ab. On the other hand, the levels of arginase-1 and indoleamine 2,3-dioxygenase-1 (known as key T-cell suppressive molecules) were increased in LF-BMDCs. Consistently, the suppressive activity of LF-BMDCs was partially restored by inhibitors of these molecules. Collectively, these results suggest that LF effectively causes DCs to be tolerogenic by both the suppression of T-cell proliferation and enhancement of iTreg differentiation. This tolerogenic effect of LF is due to the reduction of costimulatory molecules and enhancement of suppressive molecules.
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
/
v.22
no.4
/
pp.821-828
/
2008
Onchungeum, a herbal formula, which has been used for treatment of anemia due to bleeding, discharging blood and skin disease. In the present study, it was examined the effects of extract of Onchungeum (OCE) on the growth of human hepatocarcinoma cell lines Hep3B (p53 null type) and HepG2 (p53 wild type) in order to investigate the anti-proliferative mechanism by OCE. Treatment of Hep3B and HepG2 cells to OCE resulted in the growth inhibition in a dose-dependent manner, however Hep3B cell line exhibited a relatively strong anti-proliferative activity to OEC. Flow cytometric analysis revealed that OCE treatment in Hep3B cells caused G1 phase arrest of the cell cycle, which was associated with various morphological changes in a dose-dependent fashion. RT-PCR and immunoblotting data revealed that treatment of OCE caused the down-regulation of cyclin D1 expression, however the levels of cyclin E expression were not changed by OCE. The G1 arrest of the cell cycle was also associated with the induction of Cdk inhibitor p27 by OCE. Because the p53 gene is null in Hep3B cells, it is most likely that the induction of p21 is mediated through a p53-independent pathway. Moreover, p27 detected in anti-Cdk4 and anti-Cdk2 immunoprecipitates from the OCE-treated cells, suggesting that OCE-induced p27 protein blocks Cdk kinase activities by directing binding to the cyclin/Cdk complexes. Furthermore, OCE treatment potently suppresses the phosphorylation of retinoblastoma proteins and the levels of the transcription factor E2F-1 expression. Taken together, these results indicated that the growth inhibitory effect of OCE in Hep3B hepatoma cells was associated with the induction of G1 arrest of the cell cycle through regulation of several major growth regulatory gene products.
Kang, Sang Mee;Jang, Eunkyeong;Paik, Doo-Jin;Jang, Young-Ju;Youn, Jeehee
Molecules and Cells
/
v.25
no.1
/
pp.64-69
/
2008
Although the arthritis symptoms observed in the K/BxN model have been shown to be dependent on the functions of T and B cells specific to the self antigen glucose-6-phosphate isomerase, less is known about the in vivo roles of $CD4^{+}CD25^{+}$ regulatory T($T_{reg}$) cells in the pathology of K/BxN mice. We determined the quantitative and functional characteristics of the $T_{reg}$ cells in K/BxN mice. These mice contained a higher percentage of $Foxp3^+\;T_{reg}$ cells among the $CD4^+$ T cells than their BxN littermates. These $T_{reg}$ cells were anergic and efficiently suppressed the proliferation of $na\ddot{i}ve$$CD4^+$ T cells and cytokine production by effector $CD4^+$ T cells in vitro. Antibody-mediated depletion of $CD25^+$ cells caused K/BxN mice to develop multi-organ inflammation and autoantibody production, while the symptoms of arthritis were not affected. These results demonstrate that despite the inability of the $T_{reg}$ cells to suppress arthritis development, they play a critical role protecting the arthritic mice from systemic expansion of autoimmunity.
Quercetin can suppress osteosarcoma cell growth and metastasis. However, other effects of quercetin on osteosarcoma remain largely unknown. This research aims to evaluate the effects of quercetin in combination with cisplatin as treatment for osteosarcoma and investigate its regulatory mechanism. Cell viability and apoptosis in 143B cell line were determined after treatment with quercetin and/or cisplatin. RT-PCR and Western blot analysis were performed to determine the RNA or protein expression levels. Moreover, transwell assay was used to evaluate metastasis. Furthermore, rescue experiments were performed to investigate the potential regulatory mechanism of the treatment. Results showed that quercetin with concentration that was equal to or greater than $10{\mu}M$ inhibited 143B proliferation, while $5{\mu}M$ quercetin enhanced the cisplatin sensitivity of 143B cells. Expression of miR-217 was upregulated after quercetin and/or cisplatin treatment, while its target KRAS was downregulated both at mRNA and protein levels. MiR-217 knockdown led to the loss of enhanced cisplatin sensitivity while miR-217 overexpression showed the opposite effects, indicating that quercetin regulated cisplatin sensitivity by modulating the miR-217-KRAS axis. In conclusion, $5{\mu}M$ quercetin enhanced the cisplatin sensitivity by modulating the miR-217-KRAS axis. This finding suggests that quercetin may be administered with cisplatin to improve the treatment for osteosarcoma.
Bhin, Jinhyuk;Jeong, Hoe-Su;Kim, Jong Soo;Shin, Jeong Oh;Hong, Ki Sung;Jung, Han-Sung;Kim, Changhoon;Hwang, Daehee;Kim, Kye-Seong
Molecules and Cells
/
v.38
no.10
/
pp.895-903
/
2015
Non-coding microRNAs (miRNAs) regulate the translation of target messenger RNAs (mRNAs) involved in the growth and development of a variety of cells, including primordial germ cells (PGCs) which play an essential role in germ cell development. However, the target mRNAs and the regulatory networks influenced by miRNAs in PGCs remain unclear. Here, we demonstrate a novel miRNAs control PGC development through targeting mRNAs involved in various cellular pathways. We reveal the PGC-enriched expression patterns of nine miRNAs, including miR-10b, -18a, -93, -106b, -126-3p, -127, -181a, -181b, and -301, using miRNA expression analysis along with mRNA microarray analysis in PGCs, embryonic gonads, and postnatal testes. These miRNAs are highly expressed in PGCs, as demonstrated by Northern blotting, miRNA in situ hybridization assay, and miRNA qPCR analysis. This integrative study utilizing mRNA microarray analysis and miRNA target prediction demonstrates the regulatory networks through which these miRNAs regulate their potential target genes during PGC development. The elucidated networks of miRNAs disclose a coordinated molecular mechanism by which these miRNAs regulate distinct cellular pathways in PGCs that determine germ cell development.
Mitotic arrest deficient 2 like 2 (Mad2L2, also known as Mad2B), the human homologue of the yeast Rev7 protein, is a regulatory subunit of DNA polymerase ζ that shares high sequence homology with Mad2, the mitotic checkpoint protein. Previously, we demonstrated the involvement of Mad2B in the cisplatin-induced DNA damage response. In this study, we extend our findings to show that Mad2B is recruited to sites of DNA damage in human cancer cells in response to cisplatin treatment. We found that in undamaged cells, Mad2B exists in a complex with Polζ-Rev1 and the APC/C subunit Cdc27. Following cisplatin-induced DNA damage, we observed an increase in the recruitment of Mad2B and Cdc20 (the activators of the APC/C), to the complex. The involvement of Mad2B-Cdc20-APC/C during DNA damage has not been reported before and suggests that the APC/C is activated following cisplatin-induced DNA damage. Using an in vitro ubiquitination assay, our data confirmed Mad2B-dependent activation of APC/C in cisplatin-treated cells. Mad2B may act as an accelerator for APC/C activation during DNA damage response. Our data strongly suggest a role for Mad2B-APC/C-Cdc20 in the ubiquitination of proteins involved in the DNA damage response.
A2B adenosine receptor (A2BAR) is known to be the regulator of bone homeostasis, but its regulatory mechanisms in osteoclast formation are less well-defined. Here, we demonstrate the effect of A2BAR stimulation on osteoclast differentiation and activity by RANKL. A2BAR was expressed in bone marrow-derived monocyte/macrophage (BMM) and RANKL increased A2BAR expression during osteoclastogenesis. A2BAR stimulation with its specific agonist BAY 60-6583 was sufficient to inhibit the activation of ERK1/2, p38 MAP kinases and $NF-{\kappa}B$ by RANKL as well as it abrogated cell-cell fusion in the late stage of osteoclast differentiation. Stimulation of A2BAR suppressed the expression of osteoclast marker genes, such as c-Fos, TRAP, Cathepsin-K and NFATc1, induced by RANKL, and transcriptional activity of NFATc1 was also inhibited by stimulation of A2BAR. A2BAR stimulation caused a notable reduction in the expression of Atp6v0d2 and DC-STAMP related to cell-cell fusion of osteoclasts. Especially, a decrease in bone resorption activity through suppression of actin ring formation by A2BAR stimulation was observed. Taken together, these results suggest that A2BAR stimulation inhibits the activation of ERK1/2, p38 and $NF-{\kappa}B$ by RANKL, which suppresses the induction of osteoclast marker genes, thus contributing to the decrease in osteoclast cell-cell fusion and bone resorption activity.
Cytotoxic T lymphocyte antigen-4 (CTLA-4) is an immune checkpoint molecule that is mainly expressed on activated T cells and regulatory T (Treg) cells that inhibits T-cell activation and regulates immune homeostasis. Due to the crucial functions of CTLA-4 in T-cell biology, CTLA-4-targeted immunotherapies have been developed for autoimmune disease as well as cancers. CTLA-4 is known to compete with CD28 to interact with B7, but some studies have revealed that its downstream signaling is independent of its ligand interaction. As a signaling domain of CTLA-4, the tyrosine motif plays a role in inhibiting T-cell activation. Recently, the lysine motif has been shown to be required for the function of Treg cells, emphasizing the importance of CTLA-4 signaling. In this review, we summarize the current understanding of CTLA-4 biology and molecular signaling events and discuss strategies to target CTLA-4 signaling for immune modulation and disease therapy.
Siwon Jeong;Jiwoong Yoon;Woo-Jin Song;Jongtae Cheong;Young-min Yun;Gee Euhn Choi;Myung-Chul Kim
Journal of Veterinary Clinics
/
v.41
no.4
/
pp.215-222
/
2024
An adult female dog was presented for evaluation of rapid growth of mammary gland masses. Complete blood count, serum biochemistry, and diagnostic imaging results were unremarkable. Fine needle aspirates of the mammary masses indicated mammary carcinoma characterized by large globoid cells with finely granular eosinophilic globules or Melamed-Wolinska-like bodies. A regional mastectomy was performed on the masses. Subsequent histopathologic examination of the surgically resected masses resulted in a diagnosis of mammary comedocarcinoma with nodal metastasis and distinct perivascular immune infiltrates, which were subject to immunohistochemical and flow cytometric immunophenotyping. Immunohistochemical examination confirmed the infiltration of CD3+ T and PAX5+ B lymphocytes. Flow cytometric analysis demonstrated tumor-infiltrating CD4+CD25+FOXP3+ regulatory T, CD8+ T, CD11b+ myeloid, and CD21+ B cells. Of note, paired flow cytometric analysis of peripheral blood and tumor tissues showed a preferential tumor infiltration of regulatory T and B cells. Approximately two months after the mastectomy, the tumor reoccurred at the surgery site. The dog died due to deteriorating conditions. We report a rare case of canine mammary comedocarcinoma, providing clinical, clinicopathologic, histologic, and immunophenotypic characteristics. Our case is valuable in providing a rationale for basic research that maps the immune landscape of mammary comedocarcinoma to identify key immune subsets for cancer progression.
본 웹사이트에 게시된 이메일 주소가 전자우편 수집 프로그램이나
그 밖의 기술적 장치를 이용하여 무단으로 수집되는 것을 거부하며,
이를 위반시 정보통신망법에 의해 형사 처벌됨을 유념하시기 바랍니다.
[게시일 2004년 10월 1일]
이용약관
제 1 장 총칙
제 1 조 (목적)
이 이용약관은 KoreaScience 홈페이지(이하 “당 사이트”)에서 제공하는 인터넷 서비스(이하 '서비스')의 가입조건 및 이용에 관한 제반 사항과 기타 필요한 사항을 구체적으로 규정함을 목적으로 합니다.
제 2 조 (용어의 정의)
① "이용자"라 함은 당 사이트에 접속하여 이 약관에 따라 당 사이트가 제공하는 서비스를 받는 회원 및 비회원을
말합니다.
② "회원"이라 함은 서비스를 이용하기 위하여 당 사이트에 개인정보를 제공하여 아이디(ID)와 비밀번호를 부여
받은 자를 말합니다.
③ "회원 아이디(ID)"라 함은 회원의 식별 및 서비스 이용을 위하여 자신이 선정한 문자 및 숫자의 조합을
말합니다.
④ "비밀번호(패스워드)"라 함은 회원이 자신의 비밀보호를 위하여 선정한 문자 및 숫자의 조합을 말합니다.
제 3 조 (이용약관의 효력 및 변경)
① 이 약관은 당 사이트에 게시하거나 기타의 방법으로 회원에게 공지함으로써 효력이 발생합니다.
② 당 사이트는 이 약관을 개정할 경우에 적용일자 및 개정사유를 명시하여 현행 약관과 함께 당 사이트의
초기화면에 그 적용일자 7일 이전부터 적용일자 전일까지 공지합니다. 다만, 회원에게 불리하게 약관내용을
변경하는 경우에는 최소한 30일 이상의 사전 유예기간을 두고 공지합니다. 이 경우 당 사이트는 개정 전
내용과 개정 후 내용을 명확하게 비교하여 이용자가 알기 쉽도록 표시합니다.
제 4 조(약관 외 준칙)
① 이 약관은 당 사이트가 제공하는 서비스에 관한 이용안내와 함께 적용됩니다.
② 이 약관에 명시되지 아니한 사항은 관계법령의 규정이 적용됩니다.
제 2 장 이용계약의 체결
제 5 조 (이용계약의 성립 등)
① 이용계약은 이용고객이 당 사이트가 정한 약관에 「동의합니다」를 선택하고, 당 사이트가 정한
온라인신청양식을 작성하여 서비스 이용을 신청한 후, 당 사이트가 이를 승낙함으로써 성립합니다.
② 제1항의 승낙은 당 사이트가 제공하는 과학기술정보검색, 맞춤정보, 서지정보 등 다른 서비스의 이용승낙을
포함합니다.
제 6 조 (회원가입)
서비스를 이용하고자 하는 고객은 당 사이트에서 정한 회원가입양식에 개인정보를 기재하여 가입을 하여야 합니다.
제 7 조 (개인정보의 보호 및 사용)
당 사이트는 관계법령이 정하는 바에 따라 회원 등록정보를 포함한 회원의 개인정보를 보호하기 위해 노력합니다. 회원 개인정보의 보호 및 사용에 대해서는 관련법령 및 당 사이트의 개인정보 보호정책이 적용됩니다.
제 8 조 (이용 신청의 승낙과 제한)
① 당 사이트는 제6조의 규정에 의한 이용신청고객에 대하여 서비스 이용을 승낙합니다.
② 당 사이트는 아래사항에 해당하는 경우에 대해서 승낙하지 아니 합니다.
- 이용계약 신청서의 내용을 허위로 기재한 경우
- 기타 규정한 제반사항을 위반하며 신청하는 경우
제 9 조 (회원 ID 부여 및 변경 등)
① 당 사이트는 이용고객에 대하여 약관에 정하는 바에 따라 자신이 선정한 회원 ID를 부여합니다.
② 회원 ID는 원칙적으로 변경이 불가하며 부득이한 사유로 인하여 변경 하고자 하는 경우에는 해당 ID를
해지하고 재가입해야 합니다.
③ 기타 회원 개인정보 관리 및 변경 등에 관한 사항은 서비스별 안내에 정하는 바에 의합니다.
제 3 장 계약 당사자의 의무
제 10 조 (KISTI의 의무)
① 당 사이트는 이용고객이 희망한 서비스 제공 개시일에 특별한 사정이 없는 한 서비스를 이용할 수 있도록
하여야 합니다.
② 당 사이트는 개인정보 보호를 위해 보안시스템을 구축하며 개인정보 보호정책을 공시하고 준수합니다.
③ 당 사이트는 회원으로부터 제기되는 의견이나 불만이 정당하다고 객관적으로 인정될 경우에는 적절한 절차를
거쳐 즉시 처리하여야 합니다. 다만, 즉시 처리가 곤란한 경우는 회원에게 그 사유와 처리일정을 통보하여야
합니다.
제 11 조 (회원의 의무)
① 이용자는 회원가입 신청 또는 회원정보 변경 시 실명으로 모든 사항을 사실에 근거하여 작성하여야 하며,
허위 또는 타인의 정보를 등록할 경우 일체의 권리를 주장할 수 없습니다.
② 당 사이트가 관계법령 및 개인정보 보호정책에 의거하여 그 책임을 지는 경우를 제외하고 회원에게 부여된
ID의 비밀번호 관리소홀, 부정사용에 의하여 발생하는 모든 결과에 대한 책임은 회원에게 있습니다.
③ 회원은 당 사이트 및 제 3자의 지적 재산권을 침해해서는 안 됩니다.
제 4 장 서비스의 이용
제 12 조 (서비스 이용 시간)
① 서비스 이용은 당 사이트의 업무상 또는 기술상 특별한 지장이 없는 한 연중무휴, 1일 24시간 운영을
원칙으로 합니다. 단, 당 사이트는 시스템 정기점검, 증설 및 교체를 위해 당 사이트가 정한 날이나 시간에
서비스를 일시 중단할 수 있으며, 예정되어 있는 작업으로 인한 서비스 일시중단은 당 사이트 홈페이지를
통해 사전에 공지합니다.
② 당 사이트는 서비스를 특정범위로 분할하여 각 범위별로 이용가능시간을 별도로 지정할 수 있습니다. 다만
이 경우 그 내용을 공지합니다.
제 13 조 (홈페이지 저작권)
① NDSL에서 제공하는 모든 저작물의 저작권은 원저작자에게 있으며, KISTI는 복제/배포/전송권을 확보하고
있습니다.
② NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 상업적 및 기타 영리목적으로 복제/배포/전송할 경우 사전에 KISTI의 허락을
받아야 합니다.
③ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 보도, 비평, 교육, 연구 등을 위하여 정당한 범위 안에서 공정한 관행에
합치되게 인용할 수 있습니다.
④ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 무단 복제, 전송, 배포 기타 저작권법에 위반되는 방법으로 이용할 경우
저작권법 제136조에 따라 5년 이하의 징역 또는 5천만 원 이하의 벌금에 처해질 수 있습니다.
제 14 조 (유료서비스)
① 당 사이트 및 협력기관이 정한 유료서비스(원문복사 등)는 별도로 정해진 바에 따르며, 변경사항은 시행 전에
당 사이트 홈페이지를 통하여 회원에게 공지합니다.
② 유료서비스를 이용하려는 회원은 정해진 요금체계에 따라 요금을 납부해야 합니다.
제 5 장 계약 해지 및 이용 제한
제 15 조 (계약 해지)
회원이 이용계약을 해지하고자 하는 때에는 [가입해지] 메뉴를 이용해 직접 해지해야 합니다.
제 16 조 (서비스 이용제한)
① 당 사이트는 회원이 서비스 이용내용에 있어서 본 약관 제 11조 내용을 위반하거나, 다음 각 호에 해당하는
경우 서비스 이용을 제한할 수 있습니다.
- 2년 이상 서비스를 이용한 적이 없는 경우
- 기타 정상적인 서비스 운영에 방해가 될 경우
② 상기 이용제한 규정에 따라 서비스를 이용하는 회원에게 서비스 이용에 대하여 별도 공지 없이 서비스 이용의
일시정지, 이용계약 해지 할 수 있습니다.
제 17 조 (전자우편주소 수집 금지)
회원은 전자우편주소 추출기 등을 이용하여 전자우편주소를 수집 또는 제3자에게 제공할 수 없습니다.
제 6 장 손해배상 및 기타사항
제 18 조 (손해배상)
당 사이트는 무료로 제공되는 서비스와 관련하여 회원에게 어떠한 손해가 발생하더라도 당 사이트가 고의 또는 과실로 인한 손해발생을 제외하고는 이에 대하여 책임을 부담하지 아니합니다.
제 19 조 (관할 법원)
서비스 이용으로 발생한 분쟁에 대해 소송이 제기되는 경우 민사 소송법상의 관할 법원에 제기합니다.
[부 칙]
1. (시행일) 이 약관은 2016년 9월 5일부터 적용되며, 종전 약관은 본 약관으로 대체되며, 개정된 약관의 적용일 이전 가입자도 개정된 약관의 적용을 받습니다.