Objectives : In this study, we made an effort to investigate the protective mechanism of Ukgan-san (UGS) extracts on hypoxia-induced C6 glial cell death. Methods : The cell viability was assessed by 3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyl tetrazolium bromide (MMT) assay and cell morphological changes were analysed with microscope after staining with crystal violet (CV). Reactive oxygen species (ROS) formation was assessed by flow cytometer after staining with 2'7'-dichlorofluorescein diacetate (DCF-DA). We also analyzed expression of hypoxia-inducible factor-1 alpha (HIF-$1{\alpha}$) and p53, processing of procaspase-3 and procyclic acidic repetitive protein (PARP) by western blot method. Results : We estimated the elevated cell viability by UGS extract on $CoCl_2$-induced C6 glial cells. UGS attenuated $CoCl_2$-induced ROS formation in C6 glial cells and also showed a protective activity compared to antioxidants and exhibited abrogation of LDH-released by $CoCl_2$. UGS suppressed the typical apoptotic cell death markers, caspase-3 and PARP activation. UGS inhibited $CoCl_2$-induced HIF-1${\alpha}$ expression which is known as a major regulator for hypoxia-induced cell death, and suppressed p53 expression. Conclusions : These results suggest that UGS extract contains protective constituents for hypoxia-induced C6 glial cell death.
Background: Cell cycle deregulation is a major component of carcinogenesis. The p53 tumor suppressor gene plays an important role in regulating cell cycle arrest, and mouse double minute 2 (MDM2) is a key regulator of p53 activity and degradation. Abnormal expression of p53 and MDM2 occurs in various cancers including lung cancer. Methods: We investigated the distribution of the p53 Arg72Pro (rs1042522) and MDM2 SNP309 (rs2279744) genotypes in patients and healthy control subjects to assess whether these single nucleotide polymorphisms (SNPs) are associated with an increased risk of lung adenocarcinomas in Chinese female non-smokers. Genotypes of 764 patients and 983 healthy controls were determined using the TaqMan SNP genotyping assay. Results: The p53 Pro/Pro genotype (adjusted OR = 1.55, 95% CI = 1.17-2.06) significantly correlated with an increased risk of lung adenocarcinoma, compared with the Arg/Arg genotype. An increased risk was also noted for MDM2 GG genotype (adjusted OR = 1.68, 95% CI = 1.27-2.21) compared with the TT genotype. Combined p53 Pro/Pro and MDM2 GG genotypes (adjusted OR = 2.66, 95% CI = 1.54-4.60) had a supermultiplicative interaction with respect to lung adenocarcinoma risk. We also found that cooking oil fumes, fuel smoke, and passive smoking may increase the risk of lung adenocarcinomas in Chinese female non-smokers who carry p53 or MDM2 mutant alleles. Conclusions: P53 Arg72Pro and MDM2 SNP309 polymorphisms, either alone or in combination, are associated with an increased lung adenocarcinoma risk in Chinese female non-smokers.
Bone remodeling results from the combined process of bone resorption and new bone formation which is regulated in part by some of the polypeptide growth factors such as platelet derived growth factor(PDGF), which has been known to be an important local regulator of bone cell activity and participate in normal bone remodeling. This process includes strictly regulated gene expression of several bone matrix proteins such as type I collagen and osteopontin, a 44 kDa phosphorylated glycoprotein, which has important roles in bone formation. The purpose of this study is to evaluate the effecs of PDGF-BB on the mRNA expression of bone matrix protein, type I collagen and osteopontin, in MC3T3- E1 cell culture. Cells were seeded at $5{\times}10^5$ cells in 10 ml of minimum essential medium alpha(${\alpha}-MEM$) containig 10% fetal bovine serum, 10 mM beta glycerophosphate. 0.1, 1, 10 ng/ml PDGF-BB were added to the cells for the day 3, 7, 14, 21, 28 and cultured for 24 hours. Type I collagen cDNA, Hf677, and osteopontin cDNA were used as probes for northern blot analysis. Total cellular RNA was purified at indicated day and northern blot analysis was performed. The results were as follows : Type I collagen mRNA expressions were higher at the day 3 and 7, and lower in the day 14, 21 in the control groups. In the experimental groups, mRNA expressions were increased when 0.1 ng/ml PDGF-BB were added on the day 3, 7, 21, and decreased in dose-dependent manner on the day 14, decreased at all added dose on the day 28. Osteopontin mRNA expressions were highest in the day 21 groups and lowest in the day 14 groups in the control groups. Interesting results were shown in the day 14 and 21 groups. We found that osteopontin mRNA level was increased in dose dependent manner in the day 14 groups, and decreased dose dependent manner in the day 21 groups. In conclusion, PDGF-BB may have various control effects on type I mRNA expression in the growth and differentiation process of MC3T3-E1 cells and may have contrary regulatory effects on osteopontin mRNA expression. For examples, when the baseline level of osteopontin mRNA was low, as in the day 14, PDGF-BB up-regulated osteopontin mRNA expression in dose dependent manner, and when the baseline level was high as in the day 21, PDGF-BB down-regulated dose dependent manner. Thus, it may be useful for clinical application in periodontal regeneration procedure if further study were performed.
Kim, Eun-Ah;Kim, Kyeoung-Hwa;Lee, Hyun-Seo;Lee, Su-Yeon;Kim, Eun-Young;Seo, You-Mi;Bae, Jee-Hyeon;Lee, Kyung-Ah
Development and Reproduction
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v.15
no.1
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pp.61-69
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2011
Previously, we have shown that Bcl2l10 as a member of Bcl-2 family, key regulators of the apoptotic process, is dominantly expressed in oocytes of ovary but several member of the Bcl-2 family are not expressed in oocytes. Recent our studies had been processed about roles and regulatory mechanisms of Bcl2l10 in oocytes. Microinjection of Bcl2l10 RNAi into the cytoplasm of germinal vesicle oocytes resulted in metaphase I (MI) arrest and exhibited abnormalities in their spindles and chromosome configurations (Yoon et al., 2009). The present study was conducted to elucidate the downstream genes regulated by Bcl2l10 and signaling networks in Bcl2l10 RNAi microinjected oocytes by using microarray analysis. Surprisingly, we found that a large proportion of genes regulated by Bcl2l10 RNAi were involved in the cell cycle and actin skeletal system regulation as important upstream genes of Bcl2l10. Among the transcripts with highly significant fold changes more than 2-fold, Tpx2 and Cep192 are 16.1- and 8.2-fold down regulated respectively by Bcl2l10 RNAi. Tpx2 and Cep192 are known as cofactors that control Aurora A kinase activity and localization. Therefore, we concluded that Bcl2l10 may have important roles during oocyte meiosis as functional upstream regulator of Tpx2 and Cep192.
Some experiments were conducted to utilize the raphanus test as a bioassay method for plant growth regulaters and hormonal herbicides. Among seven radish cultivars, the response of Jangbaegminong was the most sensitive and quantitative to ${\alpha}$-NAA and its coefficient of variation value was the lowest. The optimum application time of test compounds was estimated seven to nine days after seeding. After ${\alpha}$-NAA treatment the curvature angle of radish cotyledonary petiols was sharply increased to the maximum value at 24 hours after and was changed by light and temperature conditions. The curvature response was observed by application of ${\alpha}$-NAA, phenoxy and indole compounds but often plant growth regulators, $GA_3$ benzyladenine, ABA and homobrassinolide was not detected by this method. So this bioassay was useful to evaluate the activity of a compound as an auxin or a hormonal herbicide.
The circadian clock is a self-sustaining 24-hour timekeeper that allows organisms to anticipate daily-changing environmental time cues. Circadian clock genes are regulated by a transcriptional-translational feedback loop. In Arabidopsis, LATE ELONGATED HYPOCOTYL (LHY) and CIRCADIAN CLOCK-ASSOCIATED 1 (CCA1) transcripts are highly expressed in the morning. Translated LHY and CCA1 proteins repress the expression of the TIMING OF CAB EXPRESSION 1 (TOC1) transcripts, which peaks in the evening. The TOC1 protein elevates the expression of the LHY and CCA1 transcripts, forming a negative feedback loop that is believed to constitute the oscillatory mechanism of the clock. In mammals, the transcription factor protein CLOCK, which is a central component of the circadian clock, was reported to have an intrinsic histone acetyltransferase (HAT) activity, suggesting that histone acetylation is important for core clock mechanisms. However, little is known about the components necessary for the histone acetylation of the Arabidopsis clock-related genes. Here, I report that DET1 (De-Etiolated1) functions as a negative regulator of a key component of the Arabidopsis circadian clock gene LHY in constant dark phases (DD) and is required for the down-regulation of LHY expression through the acetylation of histone 3 (H3Ac). However, the HATs directly responsible for the acetylation of H3 within LHY chromatin need to be identified, and a link connecting the HATs and DET1 protein is still absent.
Field experiment was carried out to investigate the effect of plant growth regulator (PGR); IAA, GA, Kinetin to regrowth of sorghum and pearlmillet according to variety and plant growth stage. Kinetin application after cut increased tiller number and decreased dry weight of regrowth, but its application on sorghum stubble in water stress increased tiller number and leaf elongation rate, consequently increased regrowth dry weight. GA application reduced tiller production in both species, but tiller formation in pearlmillet was decreased more than in sorghum by promoting leaf elongation of old tiller. Nonstructural carbohydrate (NSC) of stubble during regrowth was consumed less at anthesis than at stem elongation stage because of senescence of tiller primordia. GA treatment reduced NSC content more than other PGR in both plant species, by consuming reserve NSC and stimulating rapid elongation of old tiller after cut. Dry matter increase during regrowth had high correlation with tiller number and tiller elongation a week after cut, while it did not have any correlation with NSC at cutting stage or with consumption of NSC during regrowth. Therefore, regrowth in sorghum and pearmillet must depend upon activity of tiller primordia more than upon amount of reserved NSC.
${\delta}$-Aminolevulinic acid (ALA) is a compound which is widely present in the biosphere and plays an important role in the living body as an intermediate of the tetrapyrrole compound biosynthesis pathway that leads to heme in mammals and chlorophyll in plants. ALA is of interest as a biodegradable mediator, a growth regulator, a precursor of heme proteins, and an effective agent used in therapy of cancer. It has been recently reported that ALA is commonly used in dermatology, due to good effects of skin therapy. Although for the last few decades a substantial amount of research has been focused on the elucidation of the mechanism of ALA and the improvement of its therapeutic activity, it's effect on the cell functions and growth was not cleared. Here, we identified that ALA treatment could attenuate cell proliferation of HEK293T and HaCaT cells. In addition, ALA treatement could induce apoptosis of HeLa cells. These results suggest that apoptosis induced by ALA treatment might be responsible for inhibition of cell proliferation. These results propose the possibility of the improved therapeutic strategy making ALA one of the effective drugs used in human cancers.
Bone morphogenetic proteins (BMPs) are multifunctional cytokines that play important roles in a variety of cellular functions. Among BMP family members, BMP2 efficiently promotes osteoblast differentiation through Smad-mediated runt-related transcription factor 2 (Runx2) expression. Several recent studies suggest that BMPs are associated with clock genes, in particular Bmal1. Bmal1 protein heterodimerizes with Clock protein and then induces period 1 (Per1) expression. However, the role of Per1 on osteoblast differentiation remains unclear. In this study, we investigated whether Per1 is involved in osteoblast differentiation. MC3T3-E1 cells were treated with BMP2 for induction of osteoblastic differentiation. Osteogenic maker gene and Per1 mRNA expression were measured using real-time PCR. Interestingly, BMP2 treatment induced Per1 mRNA expression in MC3T3-E1 cells. To further investigate the function of Per1 on osteoblast differentiation, MC3T3-E1 cells were transiently transfected with pCMV-Per1. Per1 overexpression increased Runx2 mRNA and protein levels. Also, mRNA expression and promoter activity of osteocalcin were upregulated by Per1 overexpression. To investigate the effect of interaction between Per1 and osteogenic condition, MC3T3-E1 cells were cultured in osteogenic medium containing ascorbic acid and ${\beta}$-glycerophosphate. Osteogenic medium-induced ALP staining level and mineralization were synergistically increased by overexpression of Per1. Taken together, these results demonstrate that Per1 is a positive regulator of osteoblast differentiation.
Kim, Eun Ji;Uhm, Mi Jeong;Jung, Hyun Soo;Kim, Jong Yeob;Lee, Jun Gu
Journal of Bio-Environment Control
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v.29
no.3
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pp.252-258
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2020
The aim of this study was to investigate the effects of timing of collecting date and concentration of IBA and NAA, in order to enhance initial activity and seedling quality of domestic strawberry. Strawberry cuttings were separately taken twice, in June 7 and in July 5, and IBA and NAA were treated with the concentrations of 0.025, 0.05 and 0.1% at cutting date, respectively. The seedlings were evaluated for the percentage of survival during 18 days at 6 times after tunnel cultivation. The NAA treatment was inappropriate for strawberry cutting due to the high rate of seedling mortality, regardless of the collecting date. The vitality of the seedlings was highest at IBA 0.1% in June collecting and at IBA 0.05% in July collecting. The seedlings from June collecting had a higher quantum yield at IBA 0.1% and the seedlings from July collecting at IBA 0.05%. Therefore, IBA could be more effectively applied than NAA to promote the vitality and quality with the appropriate concentration of 0.1% at June collecting and 0.05% at July collecting, respectively.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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