In theprevious Hizikia cultivation, holdfasts were threw into the sea after harvesting in May; the young thalli(5$\~$10cm in length) of Hizikia are annually collected from natural bed by seed collectors for the cultivation, resulting in a ruined natural populations. Therfore, the reuse method of holdfasts by regeneration capability of Hizikia fusiformis, was investigated. The effects of emergence on the growth of regenerated thalli from holdfasts over 6 months of outdoor culture from May to November, 1995. The vegetative growth from the holdfasts was good under the emergence of 3hrs/day on the air than 0, 1 and 2hr/day. The regeneration of holdfasts was determined by measuring total length, number of stipe and weight. The growth was facilitated under the exposure condition of 1$\~$3 hrs/day on the air. Outdoor cultivation for the comparsion of to artifical natural seeds were conducted from December 1995 to May 1996. There was no significant differences(0.05< P) between the two kinds of seeds. Therefore, artificial seed maybe used as a replacement for the natural seed in Hizikia cultivation. From the results, an useful method was established to obtain young fronds for the cultivation using the reuse method of holdfast, to conserve the natural population of Hizikia.
To investigate the possibility of using alkalophilic Bacillus sp. K-11 as a host for molecular cloning, plasmid pUB110 and pBD64 were introduced into alkalophilic Bacillus sp. K-17 by protoplast transformation system. Protoplasts of Bacillus sp. K-11 were prepared by treatment with 200 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ Iysozyme in SMM buffer containing 0.4M sucrose. Optimal temperature, pH and culture time for protoplast formation were 4$0^{\circ}C$, 7.0 and 4hrs, respectively. Cell wall was regenerated efficiently on DM3 medium containing 0.8% agar and 0.5M sodium succinate. Under these conditions for protoplast formation and regeneration, the highest transformation efficiency was obtained with cells incubated for 4hrs, and using 30%(V/V) of 40%(W/V) PEG6,000, In characteristics of transfer-mants, plasmid pUB110 was more stable than plasmid pBD64 in Bacillus sp. K-17. Maximum xylanase production of both transformants carrying pUB110 and pBD64, respectively was similar, but under the same conditions, enzyme secretion by transformant carrying pUB110 was earlier than that of transformant carrying pBD64.
Purple passion fruit (Passiflora edulis Sims) is one of the introduced tropical plants, an increasing interest has arisen due to its distinctive taste and attractive flavor. It is expected that passion fruit production and planted area will increase gradually in the years ahead because of high profitability and consumer's demands of healthful ingredients. So we tried to investigate the effect of plant growth regulators and antioxidants on in vitro plant regeneration and callus induction from leaf explants of passion fruit for an establishment of optimal mass propagation system. Young leaf explants of purple passion fruit were cultured in Murashige and Skoog (MS) medium containing different growth regulators and antioxidant additives to induce the shoot organogenesis. After 8 weeks, the highest embryogenic callus formation rate was obtained in MS medium supplemented with $1mg{\cdot}L^{-1}$ 6-benzylaminopurine (BAP) and $2mg{\cdot}L^{-1}$ 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D), furthermore, the shoot development via organogenesis was also observed. Silver nitrate ($AgNO_3$), which was added into the medium to minimize the adverse effects of leached phenolics, was effective for reduction of medium browning and sudden explant death. In the medium supplemented with $1mg{\cdot}L^{-1}$ BAP and $1mg{\cdot}L^{-1}$ gibberellic acid ($GA_3$), shoots were most vigorously regenerated and elongated. Most shoots rooted successfully in half strength medium with $1mg{\cdot}L^{-1}$ indol-3 acetic acid (IAA), and more than 90% of plantlets survived after 4-month acclimatization period.
Kim ,Kwang-Soo;Sung, Nak-Sool;Kim, Myung-Won;Pyo, Byung-Sik;Hwang, Baik
Korean Journal of Plant Tissue Culture
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v.24
no.6
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pp.357-360
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1997
Multiple shoot formation was obtained from excised axillary buds of Achyranthes japonica NAKAI cultured on MS media containing various growth regulators such as auxin and cytokinin. The highest average number of shoots was obtained in 1 mg/L NAA and 2 mg/L BA after 6 weeks (25.8 adventitious shoots per node). Although the regeneration rate was less than the former condition, optimal combination for the production of more shoots with a suitable size was 0.5 mg/L NAA and 1 mg/L BA (19.7 adventitious shoots per node). Roots were induced from regenerated shoots after 3 weeks culture, transferred to 1/2 MS medium supplemented with 0.1 mg/L IBA. Micropropagated plants were successfully transferred to soil.
Iris dichotoma Pall. is an important endangered plant belonging to the family Iridaceae. A method was developed for the rapid micropropagation of I. dichotoma through plant regeneration from leaf, rhizome, and root explant-derived calli. Leaf, rhizome, and root segments were cultured on Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 2,4-dichlorophenoxy acetic acid (2,4-D; $0-3.0mg{\cdot}L^{-1}$) for callus induction. Callus production was highest at $1.0mg{\cdot}L^{-1}$ 2,4-D, where 73.8% and 45.5% of cultured rhizome and root cuttings, respectively, produced calli. The viable calli were maintained at an induced concentration of 2,4-D ($3.0mg{\cdot}L^{-1}$). They were then transferred to MS medium supplemented with various concentrations of 2,4-D ($0-3.0mg{\cdot}L^{-1}$) in combination with 6-benzyladenine (BA: 0, 1.0 and $3.0mg{\cdot}L^{-1}$) for adventitious shoot regeneration. The addition of a low concentration of 2,4-D into BA-containing medium significantly increased the frequency of shoot regeneration in leaf, rhizome, and root-derived calli. The highest number of adventitious shoots (26.4 per callus) formed at $0.5mg{\cdot}L^{-1}$ 2,4-D and 1.0 mg/l BA. For rooting of the shoots, half- strength MS medium supplemented with different concentrations of indole 3-butyric acid (IBA) $0-3.0mg{\cdot}L^{-1}$ was tested. The optimal results were observed using half-strength MS medium supplemented with $1.0mg{\cdot}L^{-1}$ IBA, on which 98% of the regenerated shoots developed roots with an average of 3.5 roots per shoot within 45 days. The plantlets raised in vitro were acclimatized and transferred to soil with 95% success. This in vitro propagation protocol will be useful for conservation and mass propagation of this endangered plant.
Anthers of two hot pepper cultivars, Milyang-jare and Geryongsan-jare, were cultured on MS medium containing 0.1 mg/L 2,4-D and 0.1 mg/L kinetin. The influence of pretreatment at 4$^{\circ}C$ and 32$^{\circ}C$ on induction of microspore embryo was investigated. Milyang-jare was superior to the Geryongsan-jare in microspore embryo induction. The 32$^{\circ}C$ pretreatment increased embryo induction compared to the 4$^{\circ}C$ pretreatment while the 4$^{\circ}C$ pretreatment stimulated callus induction. Microspore embryos were regenerated to plantlets in the same medium or hormone free medium at 32$^{\circ}C$ treatment but most embryos failed to develop directly into plantlets at 4$^{\circ}C$ treatment. The optimal period of the 32$^{\circ}C$ pretreatment was 3 days in Milyang-jare and 6 days in Geryongsan-jare. The 32$^{\circ}C$ pretreatment was essential for induction and growth of microspore embryo in pepper.
Since there is no report about more than one gene expression simultaneously in a single mitochondria, this report is very important to novel type of eukaryotic gene expression. In this study, investigated whether mitochondrial expressed gene and GFP that expression in mitochondria of plant expressed to mitochondria. Expression vector (pBin) containing AtBI-1 (mitochondrial expressed gene) and GFP driven by 35S promoter was bombarded by gene gun to leaves and cotyledon of tobacco. Regenerated shoot confirmed expression of AtBI-1 in mitochondria by GFP expression, PCR, and Southern analysis. Successful mitochondria of plant cell transformation in this report implies possible eukaryotic mitochondrial transformation including plants and animals, and moreover two or more gene expression which can be excellent applicable protocols to pharmaceutical field including antibody production.
Kim, K.Y.;Sung, B.R.;Rim, Y.W.;Choi, G.J.;Lim, Y.C.;Jang, Y.S.;Seo, S.;Yoon, S.H.;Park, G.J.;Jo, J.
Journal of The Korean Society of Grassland and Forage Science
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v.21
no.3
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pp.151-156
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2001
This study was conducted to obtain the transformed alfalfa (Medicago sativa L.) plants with thermotolerance gene (BcHSP17.6) using Agrobacterium tumefaciens LBA4404 and we confirmed the transformed gene from the regenerated alfalfa plants. The expression vector, pBKH4, harboring BcHSP17.6 gene was used for production of transgenic alfalfa plants. In a process for transformation, the callus of alfalfa was cocultivated with Agrobacterium tumefaciens and transformed calli were selected on kanamycin-containing SH-3-kc medium to regenerate into into the plant. The complete transgenic alfalfa plants were produced by cultivation for about 4 months on several regeneration media, SH-nk-c, SH-l lb-c, SH-sp-c, and SH-IBA. The transgenic alfalfa plants were analyzed by isolation of genomic DNA and PCR/Southem blot.
Paederia foetida L. is an important medicinal plant that has been used for the treatment of various gastrointestinal related ailments by different tribal communities in India. This plant is also known for its use as a food. Due to overexploitation, P. foetida has been classified as a vulnerable plant in some states of India. The propagation of P. foetida by conventional methods is easy but very slow. Synthetic seed technology offers incredible potential for in vitro propagation of threatened and commercially valuable plants, and can also facilitate the storage and exchange of axenic plant material between laboratories. However, synthetic seed production for P. foetida has not yet been reported. Thus, to the best of our knowledge, the present study is the first attempt to produce synthetic seeds of P. foetida by calcium alginate encapsulation of in vitro regenerated axenic nodal segments. Sodium alginate (3%) and CaCl2 (100 mM) were found to be the optimal materials for the preparation of ideal synthetic seeds, both in terms of morphology and germination ability. The synthetic seeds showed the best germination (formation of both shoot as well as root; 83.3%) on ½ MS medium augmented with 0.5 mg/L indole-3-acetic acid. The plantlets obtained from these synthetic seeds could be successfully acclimatized under field conditions. We also studied the storage of these synthetic seeds at low temperature and their subsequent sprouting/germination. The seeds showed a germination rate of 63.3% even after 21 days of storage at 4 ℃; thus, they could be useful for transfer and exchange of P. foetida germplasm.
Jeong, Do Youn;Yang, Hee Jong;Jeong, Su Ji;Kim, Min Guk;Yun, Chi Young;Lee, Hak Yong;Lee, Yang Hee;Shin, Dong Yeop;Yang, Yea gin;Lee, Hae Seong;Park, Young Mi
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.33
no.1
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pp.48-55
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2019
Current studies have been reported that fruits such as berries may contain both antioxidant and antitumor polyphenols that may be important in this regard. We investigated the immunostimulatory effect of fermented blueberry (Vaccinium corymbosum L.) on cyclophosphamide-induced immunosuppression in animal model. Rats were administered blueberry yeast fermented powder (BYFP) at doses 30, 100, and 300 mg/kg for 4 weeks after cyclophosphamide (Cy) treatment, respectively. The immunomodulatory effect of BYFP were measured both in vitro and in vivo, and the changes of blood components were also analyzed. We found that BYFP recovered immunosuppression-mediated decreased liver, spleen, and thymus weights as well as up regulation of white blood cell, lymphocyte, and neutrophil in blood. Moreover, BYFP up-regulated IL-2, TNF-${\alpha}$, and IFN-${\gamma}$ pro-inflammatory cytokine production compared to immune suppressed control group, respectively. According to histological studies, BYFP regenerated significantly on Cy-mediated injured spleen at the high doses (BYFP 300) comparison with Cy-treated groups (immunosuppression). Collectively, these findings suggest that BYFP may have the potential as a dietary immunostimulatory agent.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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