The Drosophila protein, Rbp9, is homologous to human Hu, which is reported to be involved in small cell lung cancer. Rbp9 functions in cystocyte differentiation, and mutations in Rbp9 cause ovarian tumors. Here we show that the antimicrobial peptide, Attacin, is upregulated in Rbp9 mutants, especially in ovaries where tumors form. Upregulation seems to result from activation of the NF-${\kappa}B$ pathway since we detected nuclear localization of Relish in Rbp9 mutant ovaries but not in wild type ovaries. Inactivation of NF-${\kappa}B$ in the Rbp9 mutant allows prolonged survival of malformed egg chambers. We conclude that Drosophila initiates an anti-tumor defense response via activation of NF-${\kappa}B$.
효율적인 형질전환 누에 시스템 구축을 위해서는 새로운 전이인자의 개발과 함께 선발을 위한 마커 유전자 및 transposase 발현을 효과적으로 조절할 수 있는 다양한 유전자 프로모터 개발이 필수적이다. 이와 관련하여 선행연구를 통해 누에 후부실샘으로부터 고발현하는 RNA binding protein-1 homologue(RBP-1) 유전자를 선발한 바 있다. 본 연구에서는 RBP-1유전자의 누에 발육시기별 및 유충 조직별 발현양상을 Northen blot hybridization 방법으로 분석한 결과, RBP-1 유전자는 유충기로부터 번데기 후기까지의 전기간에 걸쳐 발현하였으며, 두부, 표피, 중장, 지방체 및 견사선 등 실험한 모든 유충 조직에서 고발현 하는 것으로 관찰되었다. 또한, 누에 게놈 유전자은행을 제작한 후 RBP-1 cDNA 유전자를 탐침으로 5'-UTR 영역을 클로닝하고 luciferase assay 방법으로 RBP-1 유전자 프로모터의 활성을 분석하였다. 실험 결과, RBP-1 cDNA를 탐침으로 RBP-1 유전자 ORF와 5'-UTR이 포함된 약 1,660 bp 영역의 게놈 유전자를 클로닝하였다. RBP-1 유전자 프로모터 활성검정을 위해 전사 개시점(+ 30)으로부터 상류의 -740 bp 영역을 PCR로 분리한 후 pGL3 basic vector에 도입하여 luciferase 활성 측정을 위한 전이벡터, pGL-RBP1를 제작하였다. 제작된 pGL-RBP1는 곤충 세포주(Sf9)에 transfection 한 후 luciferase 발현량을 측정한 결과, 기존의 BmA3 유전자 프로모터 대비 10% 가량 높은 발현 효율을 확인할 수 있었다.
Fu, Teng;Park, Gi-Chang;Han, Joon Hee;Shin, Jong-Hwan;Park, Hyun-Hoo;Kim, Kyoung Su
The Plant Pathology Journal
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제35권6호
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pp.564-574
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2019
Like many fungal pathogens, the conidium and appressorium play key roles during polycyclic dissemination and infection of Magnaporthe oryzae. Ran-binding protein microtubule-organizing center (RanBPM) is a highly conserved nucleocytoplasmic protein. In animalia, RanBPM has been implicated in apoptosis, cell morphology, and transcription. However, the functional roles of RanBPM, encoded by MGG_00753 (named MoRBP9) in M. oryzae, have not been elucidated. Here, the deletion mutant ΔMorbp9 for MoRBP9 was generated via homologous recombination to investigate the functions of this gene. The ΔMorbp9 exhibited normal conidial germination and vegetative growth but dramatically reduced conidiation compared with the wild type, suggesting that MoRBP9 is involved in conidial production. ΔMorbp9 conidia failed to produce appressoria on hydrophobic surfaces, whereas ΔMorbp9 still developed aberrantly shaped appressorium-like structures at hyphal tips on the same surface, suggesting that MoRBP9 is involved in the morphology of appressorium-like structures from hyphal tips and is critical for development of appressorium from germ tubes. Taken together, our results indicated that MoRBP9 played a pleiotropic role in polycyclic dissemination and infection-related morphogenesis of M. oryzae.
Plasmodium falciparum can invade all stages of red blood cells, while Plasmodium vivax can invade only reticulocytes. Although many P. vivax proteins have been discovered, their functions are largely unknown. Among them, P. vivax reticulocyte binding proteins (PvRBP1 and PvRBP2) recognize and bind to reticulocytes. Both proteins possess a C-terminal hydrophobic transmembrane domain, which drives adhesion to reticulocytes. PvRBP1 and PvRBP2 are large (>326 kDa), which hinders identification of the functional domains. In this study, the complete genome information of the P. vivax RBP family was thoroughly analyzed using a prediction server with bioinformatics data to predict B-cell epitope domains. Eleven pvrbp family genes that included 2 pseudogenes and 9 full or partial length genes were selected and used to express recombinant proteins in a wheat germ cell-free system. The expressed proteins were used to evaluate the humoral immune response with vivax malaria patients and healthy individual serum samples by protein microarray. The recombinant fragments of 9 PvRBP proteins were successfully expressed; the soluble proteins ranged in molecular weight from 16 to 34 kDa. Evaluation of the humoral immune response to each recombinant PvRBP protein indicated a high antigenicity, with 38-88% sensitivity and 100% specificity. Of them, N-terminal parts of PvRBP2c (PVX_090325-1) and PvRBP2 like partial A (PVX_090330-1) elicited high antigenicity. In addition, the PvRBP2-like homologue B (PVX_116930) fragment was newly identified as high antigenicity and may be exploited as a potential antigenic candidate among the PvRBP family. The functional activity of the PvRBP family on merozoite invasion remains unknown.
To investigate the influence of the prolactin receptor 3 (PRLR3) gene and the retinol-binding protein 4 (RBP4) gene on the production traits of swine, genotyping was performed on 156 and 141 Berkshire pigs, respectively, that were carefully selected for economic traits. The frequencies of allele A in the PRLR3 locus and allele B in the RBP4 locus were 0.50 and 0.42, respectively. Neither locus was in the Hardy-Weinberg equilibrium. After a genotype was assigned to the individuals whose parents had the homozygous genotype, a statistical analysis was conducted for 291 pigs. The animals with the PRLR3 and RBP4 genotypes included 182 and 227 head, respectively. Even though the genotypic effects of PRLR3 (p<0.05) and RBP4 (p<0.01) had a significant influence on the pigs' back fat thickness, the interaction of both genes was not highly significant in terms of the back fat thickness (p = 0.1235). While the estimated epistasis effects of aaBB and aaBb decreased the back fat thickness and reduced the growth rate, the effects of AAbb and aabb increased the growth rate. Despite the insignificant difference in the PRLR genotypes in terms of the days to 90 kg and the average daily gain, the back fat thickness showed a significant difference (p<0.05), and the additive effect of allele A and the dominant effect of the hetero-genotype were -0.377 and 1.206 mm, respectively. The RBP4 genotypes had a very significant effect (p<0.01) on the back fat thickness, the days to 90 kg, and the average daily gain. The additive effects of allele B of the RBP4 locus on the back fat thickness, the days to 90 kg, and the average daily gain were 0.70 mm, -1.3 days and 6.2 g, respectively. Moreover, the dominant effects of the heterozygote for those traits were 0.63 mm, 9.9 days and -45.0 g, respectively. Allele A of the PRLR3 locus favorably influenced the back fat thickness, the days to 90 kg of the body weight, and the average daily gain and its dominant effect unfavorably influenced those traits. Allele B of RBP4 showed an incremental growth rate and back fat thickness, which could lower the lean meat percentage in the carcass. The RBP4 hetero-genotype negatively affected the pork production. These results strongly imply that the selection of allele A of PRLR3 and allele B of RBP4 would produce highly productive pigs in the Berkshire breed. Careful selection of allele B of RBP4 is required because of the increase in the back fat thickness.
To investigate the influences of candidate genes on the birth weight and the early stages of life, genotyping of the prolactin receptor 3 (PRLR3) and retinol-binding protein 4 (RBP4) genes was performed in 156 and 141 Berkshire pigs, respectively. The frequency of both PRLR3 alleles A and a was 0.50. The frequencies of the RBP4 alleles B and b were 0.42 and 0.58, respectively. Neither locus was in Hardy-Weinberg equilibrium. No significant associations of the PRLR3 alleles with birth or weaning weights and of the RBP4 alleles with birth weight were observed. The proportions of the phenotype variances due to the genotypes of PRLR3 in the feeder weights was 4.0% and those of RBP4 in the weaning and feeder weights were 11.9 and 3.3%, respectively (P < 0.05). The dominance effect of PRLR3 and RBP4 on feeder weights was 2.40 and -1.86 kg, respectively (P < 0.01). The additive and dominance effects of RBP4 on weaning weights were 0.332 and -0.682 kg, respectively (P < 0.01). Even if no significant epistasis of PRLR3 and RBP4 was detected, a considerable trend of consistent positive epistasis estimates of AA/BB and Aa/Bb was observed for all traits. The results of this study may have a considerable impact on early-stage growth by both loci, and a selection strategy should be designed separately for each marker in Berkshire pigs.
The purpose of this study was to determine biochemical parameters related to protein and immunity. Subjects were 125 preschool children(M:69, F:56) residing in low income area of Seoul. Mean serum total protein of the children aged 6 was 7.3g/dl which was significantly higher than 6.6g/dl of the group aged 3. The mean serum albumin was 4.7g/dl for 3, 4, 5 age group, and 4.9g/dl for 6 age group and there was no significant difference. Serum retinol binding protein(RBP) is used as a sensitive indicatior of protein, because it tends to fall rapidly in response to protein status and respond to quickly dietary treatment. Mean RBP for each group(3, 4, 5 and 6 age group) were $2.5\mu{g}$/dl, $2.9\mu{g}$/dl, $2.7\mu{g}$/dl, $3.0\mu{g}$/dl. The Proportion of children whose RBP was than $2.6\mu{g}$/dl was 15.9%, 19.2%, 24.3% and 16.7%, respectively. The 24-hour urinary excretion of hydroxyproline was 7.9mg, 14.6mg, 11.7mg and 11.8mg for each group and the mean excretion of all children was 12.2mg/day. Children aged 3 were excreting significantly lower amount of hydroxprolinc per day than the children aged 4. The mean hydroxyproline index were 2.18, 2.39, 2.52, 2.80 for each age group and the mean of a group aged 6 was significantly higher than that of the group aged 3. The proportion of children assessed as malnourished and impaired growth(hydroxyproline index <2.0) was 18.8%, 4.9%, 2.5% and 4.3%, respectively. The nutrients which showed significant relationship with protein and immunity parameters were niacin, vitamin C and calcium. Vitamin C showed significant positive relationship(p<0.05-p<0.01) with serum RBP, total protein and globulin. The triceps skinfold thickness was significantly and positively correlated with serum globulin. Serum IgG showed significant positive relationship with height, weight, girth of chest and midarm circumference(p<0.05-p<0.01).
본 연구는 항고혈압 활성이 있는 어육 단백질의 효소 가수분해물로부터 얻어진 peptide분말을 실험동물인 본태성 고혈압쥐(SHR)에게 음용수로 공급하여 혈압강하에 미치는 영향을 알아보기 위해 실시하였다. in vitro에서 멸치, 명태 그리고 고등어 가수분해물 500 ${\mu}g$을 첨가하여 각각 75, 81 그리고 35%의 ACE 저해활성을 보였던 펩타이드 분말 0.4167%을 희석하여 SHR에게 음용수로 공급한 후 생리적 변화를 관찰하기 위해 매 1주일 마다 총 섭취한 사료의 무게와 음수량을 측정하였다. 실험기간 중 SHR의 일당증체량은 명태(C)와 고등어처리군(D)이 각각 1.26 및 1.36 g으로 A군(0.78 g)과 B군(0.77 g) 보다 높았지만 유의적인 차이는 없었다. 사료섭취량은 $16.85{\sim}19.93$ g/day으로 거의 차이가 없었던 것으로 나타났다. 생후 13주령된 SHR를 대상으로 실험개시 전 측정한 기준혈압(RBP)은 실험군에서 평균 224mmHg 로 큰 차이가 없이 비슷하였다 어육 펩타이드 음용군(멸치, 동태, 고등어)은 경시적으로 감소경향을 나타냈으며 실험군 중 D군(고등어)의 수축기혈압은 투여 후 7일에 208mmHg로 측정되어 RBP 보다 15 mmHg가 감소하였고, 이 후 비슷한 수준을 유지하다가 28일에 191 mmHg로 실험군 중 가장 낮았다. C군(명태)은 투여 후 14일에 214mmHg로 측정되어 11 mmHg가 감소하였고, 28일에 202 mmHg로 나타났다. B군(멸치)은 투여 후 7일까지는 기준혈압(223 mmHg)과 비슷하였고, 이후 28일까지 203 mmHg로 일정한 수준을 유지하였다. 어육 펩타이드 대신 생수음용 대조군(A)은 실험기간 중 225-216 mmHg로 유의한 차이가 나타나지 않았다. 기준혈압(0일) 대비 28일의 혈압 감소치는 어육 펩타이드(멸치, 동태, 고등어) 음용군에서 각각 20, 23, 32 mmHg로 RBP대비 혈압감소율은 각각 9.0, 10.2, 14.3%로 나타났다.
Dongseob Lee;Jungwon Lee;Ki-Tae Koo;Yang-Jo Seol;Yong-Moo Lee
Journal of Periodontal and Implant Science
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제53권2호
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pp.157-169
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2023
Purpose: The aim of this study was to evaluate the impact of polydeoxyribonucleotide (PDRN) on histologic outcomes when implant placement and lateral sinus floor elevation are performed simultaneously. Methods: Three bimaxillary premolars (P2, P3, and P4) were extracted from 4 beagle dogs 2 months before lateral sinus floor elevation. After lateral elevation of the sinus membrane, each sinus was allocated to either the test or control group. Sinuses underwent either 1) collagenated synthetic bone graft with PDRN following lateral sinus floor elevation (test group) or 2) collagenated synthetic bone graft without PDRN after lateral sinus floor elevation (control group). Eight weeks after the surgical procedure, all animals were euthanised for a histologic and histomorphometric assessment. Augmented height (AH), protruding height (PH), and bone-to-implant contact in pristine (BICp) and augmented (BICa) bone were measured. The composition of the augmented area, which was divided into 3 areas of interest located in coronal, middle and apical areas (AOI_C, AOI_M, and AOI_A), was calculated with 3 parameters: the area percentage of new bone (pNB), residual bone graft particle (pRBP), and fibrovascular connective tissue (pFVT). Results: AH, PH, BICp, BICa total, BICa coronal, and BICa middle values were not significantly different between sinuses in the control and test groups (all P>0.05). The BICa apical of sinuses in the test group (76.7%±9.3%) showed statistically higher values than those of sinuses in the control group (55.6%±22.1%) (P=0.038). pNB, pRBP, and pFVT showed statistically significant differences between the 2 groups in AOI_A (P=0.038, P=0.028, and P=0.007, respectively). pNB, pRBP, and pFVT in AOI_C and AOI_M were not significantly different between samples in the control and test groups (all P>0.05). Conclusions: The histologic findings revealed that lateral sinus floor elevation with PDRN might improve early new bone formation and enable higher bone-to-implant contact.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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