본 연구에서는 기능성 홍삼 엑기스 제조를 위해 추출용매, 압력, 온도, 추출시간을 조절하여 가속 용매 추출한 후 기능성 홍삼제품의 지표성분인 진세노사이드 함량, 총페놀화합물 및 벤조피렌 함량 등을 조사하였다. 홍삼 가속 용매 추출 최적화를 위한 독립변수 선택을 위해 에탄올 농도, 압력, 온도 및 추출시간에 따른 기능성 홍삼제품의 지표성분인 진세노사이드 Rb1, Rg1 및 Rg3(20S) 함량의 합을 분석하여 진세노사이드 추출에 가장 최적의 용매를 50% 에탄올로 하고, 영향이 다소 작았던 요인인 압력을 2,500 psi로 설정하였으며, 온도와 추출시간을 독립변수로 설정하였다. 추출 온도 및 시간을 독립변수로 하여 고온고압 처리한 홍삼의 진세노사이드 Rb1, Rg1 및 Rg3(20S) 함량의 합, 총 페놀성 화합물 및 벤조피렌 함량을 측정한 결과, 벤조피렌이 검출되지 않는 조건에서 진세노사이드 Rb1, Rg1 및 Rg3(20S)의 함량 합이 최적화된 조건은 $158^{\circ}C$, 20분임을 확인할 수 있었다. 최적화된 조건에서의 가속 용매 추출 시 초음파 및 환류냉각 추출에 비해 적은 용매로 단시간 추출하면서 진세노사이드 Rb1, Rg1 및 Rg3(20S) 함량 합 및 총폴리페놀 함량이 각각 1.5~2배 및 2.2~5배 높게 추출할 수 있어 효율적인 추출방법이 될 것으로 생각된다.
추출용매와 조작순서를 달리하여 원료인삼 및 압출성형 가공시 인삼의 사포닌 함량 및 항산화 정도의 변화를 알아보기 위하여 인삼과 압출성형한 가공 인삼의 80% 에탄올 엑기스, 에틸아세테이트 분획, 수포화 부탄올 분획, 수층 분획을 각각 얻은 후 LC/MASS를 사용하여 사포닌 함량을 조사하고 기존의 여러 가지 항산화 작용 측정 방법들의 오류를 없애고 더욱 정확한 결과를 낼 수 있는 대처 방안으로 선정된 ORAC 분석법에 의해 항산화 활성을 검토하였다. 검체 인삼 중 사포닌은 ginsenoside Rb1과 Rg1 및 Re를 주요 성분으로 다량 함유하고 있었으며, Rb2, Rc, Rd 등이 뒤를 이었고, 그밖에도 Rg3, Rh1가 미량 분포하고 있었다. 압출 성형 인삼의 경우 원료 인삼에 비해 전반적으로 사포닌 함량이 높았으며, 주로 ginsenoside Re와 Rb1 및 Re가 많았고, 그밖에 Rc, Rb2, Rg1, Rh, Rd 등이었으며, 특히 원료인삼에서 미량 존재하던 Rh1과 Rg3가 많이 증가함을 보였다. 이러한 현상은 압출인삼의 에틸아세테이트층과 부탄올층에서도 같은 경향을 보였다. 원료 인삼의 에틸아세테이트층에서는 Rg1 함량이 높았고, 압출인삼에서는 Rh1과 Rg3가 많이 용출되었으며, Rg1, Re, Rb1 등이 용출되었다. ORAC 분석법에 의한 항산화 활성 연구에서 원료인삼 중의 여러 생리활성 성분이 많이 함유되어 있는 80% 에탄올 추출 분획과 일반적으로 극성의 사포닌 성분을 많이 함유한 수포화 부탄올층의 항산화 활성은 에틸아세테이트층과 수층에 비해 높았으나, 압출성형과정을 거치더라도 유의성 있는 증가는 없었다. 그러나 압출성형과정을 거친 압출 인삼의 에틸아세테이트층과 수층 분획이 대조 원료인삼의 각각의 분획들에 비해 모두 유의성($p$ >0.05)있는 증가를 보였다. 또한 원료인삼과 압출 인삼의 80% 에탄올 추출 엑기스, 에틸 아세테이트 분획, 수포화 부탄올 분획, 수층 분획 모두에서 일정 수준의 항산화 활성을 나태내고 있음을 확인할 수 있었고, 특히 인삼사포닌을 거의 함유하지 않은 원료인삼과 압출 인삼의 수층에서도 항산화 활성을 나타내었다. 이는 인삼 중 항산화 활성은 에틸아세테이트 층으로 이행되는 폴리페놀 계통 성분 및 일부 비극성의 사포닌에 의한 것으로 추측되고 있으나, 모든 분획에서 나타난 것으로 보아 이들 외에 산성 다당체, 당단백질, 수용성 다당류, 말톨 등 다른 생리 활성 물질에 대한 연구가 요구된다.
Herath, H.M.L.P.B;Priyathilaka, Thanthrige Thiunuwan;Elvitigala, Don Anushka Sandaruwan;Umasuthan, Navaneethaiyer;Lee, Jehee
Fisheries and Aquatic Sciences
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제18권3호
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pp.273-281
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2015
The follistatin (FST) gene encodes a monomeric glycoprotein that plays a role in binding and inhibiting the functions of members of the transforming growth factor (TGF)-${\beta}$ superfamily. Thus, FST facilitates a wide variety of functions, ranging from muscle growth, to inflammation and immunity. In this study, we sought to characterize an FST counterpart, RbFST, which was identified from rock bream Oplegnathus fasciatus. The RbFST cDNA sequence (2,419 bp) contains a 933-bp open reading frame (ORF) that encodes a putative amino acid sequence for RbFST (35 kDa). The putative amino acid sequence contains a Kazal-type serine protease inhibitor domain (51-98 residues) and an EF-hand, calcium-binding domain (191-226 residues). Additionally, this sequence shares a high identity (98.7%) with the Siniperca chuatsi FST sequence, with which it also has the closest evolutionary relationship according to a phylogenetic study. Omnipresent distribution of RbFST transcripts were detected in the gill, liver, spleen, head kidney, kidney, skin, muscle, heart, brain, and intestine of healthy animals, with significantly higher expression levels in the heart, followed by the liver tissue. Under pathogenic stress caused by two bacterial pathogens, Streptococcus iniae and Edwardsiella tarda, RbFST transcription was found to be significantly up-regulated. Altogether, our findings suggest the putative role of RbFST in immune related responses against pathogenic infections, further prefiguring its significance in rock bream physiology.
JUNG In Kyung;LEE Sook Yeon;PARK Il Ho;CHEONG Jae Hoon
Biomolecules & Therapeutics
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제13권3호
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pp.165-173
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2005
The main aim of this study was to investigate stress related activities of ginsenosides and their action mechanism. Control group and ginsenoside supplemented groups were exposed to stress while no-stress group was not done. Animals of each group (n=$8\~10$) were orally administerd 100 mg red ginseng extract (R-G), or 10 mg ginsenosides/kg body weight once a day. Animals were given materials for 5 days without stress, and then were given supplements for 5 days with restraint and electroshock stress. Mice were given materials for 5 days for experiments on anti-fatigue effect. After loading final stress, stress-related behavioral changes of experimental animals were examined and plasma corticosterone levels were measured. R-G and ginsenoside $Rb_{1}$ supplementation partially blocked the stress effects on locomotion and elevated plus-maze test in rats and mice. They also partially blocked stress induced behavioral changes such as freezing, smelling, face-washing, rearing behavior in rats. R-G and $Rb_{1}$ decrease adrenal gland size and plasma corticosterone level, which were increased by stress in rats. R-G increased enduring time on the Rota rod, cold water and horizontal wire, but $Rb_{1}$ didn't. Effects of $Rb_{1}$ on plusmaze test were inhibited by administration of flumazenil. These results suggest that $Rb_{1}$ is the main antistress principle in ginseng and it's effect is modulated by GABAnergic nervous system.
In this study, we evaluated the antiproliferative effects of Panax notoginseng, ginsenoside Rb1, and notoginsenoside R1 in the human breast carcinoma MCF-7 cell line. Our results indicated that both Panax notoginseng radix extract (NRE) and Panax notoginseng rhizoma extract (NRhE) possess significant antiproliferative activities in MCF-7 cells. Compared to control group (100%), at the concentrations of 0.05, 0.5, and 1.0 mg/ml NRE, cell growth was concentration-dependently reduced to 81.0 ${\pm}$ 6.1 (P < 0.01), 34.2 ${\pm}$ 4.8 (P < 0.001), and 19.3 ${\pm}$ 1.9 (P < 0.001), respectively. Similar results with NRhE at concentrations of 0.5 and 1.0 mg/ml were obtained in these MCF-7 cells. To identify the responsible chemical constituent, we tested the antiproliferation effects of two representative saponins, ginsenoside Rb1 and notoginsenoside R1, on the MCF-7 cells. The data showed that ginsenoside Rb1 was endowed with antiproliferative properties, while notoginsenoside R1 did not have an inhibitory effect in the concentrations tested. Our studies provided evidence that Panax notoginseng extracts and ginsenoside Rb1 may be beneficial, as adjuvants, in the treatment of human breast carcinoma.
This study was carried out to evaluate the manufacturing characteristics of organic liquid fertilizer with poultry manure, soybean meal, and rice bran at plastic house in Chungbuk Agricultural Research and Extension Service. Treatment was given 3 treatments; poultry manure+soybean meal (PM+SM), poultry manure+rice bran (PM+RB), and soybean meal+rice bran (SM+RB). The obtained results from this study were summarized as follows; The pH in liquid fertilizer was consistently increased in PM+SM treatment, and was increased after decreased at early season in PM+RB and SM+RB treatments. The electriacl conductivity(EC) in liquid fertilizer was rapidly increased from $2^{nd}$ weeks to $4^{th}$ weeks after fermentation in PM+SM and PM+RB treatments, and was rapidly increased from $4^{th}$ weeks to 6th weeks after fermentation in SM+RB treatment. The amount of $H_2S$ gas occurrence was the highest as $1,200\;mg{\cdot}kg^{-1}$ in early season, and was the lowest as $50\;mg{\cdot}kg^{-1}$ at $12^{th}$ weeks after fermentation of organic liquid fertilizer. The temperature of organic liquid fertilizer was stabilizing in $4^{th}$ weeks after fermentation. The yield of well of nitrogen, phosphate, and potassium was increased with increasing fermentation periods. It was not change from $4^{th}$ weeks after fermentation in content of calcium, magnesium and sodium in organic liquid fertilizer.
인삼의 주종 사포닌인 7종 사포닌($Rb_1,\;Rb_2,\;Rc,\;Rd,\;Re,\;Rf\;and\;Rg_1$)을 고속액체크로마토그라피로 분석하는 일반적인 방법인 순상 column에서 $Rg_1$, Re 및 Rf가 명확히 분리되지 않는 문제점을 개선하기위하여 본 연구를 수행하였다. 고속액체크로마토그라피를 이웅하여 역상 ${\mu}{\beta}ondapak$ ODS컬럼으로 인삼중 주종 사포닌인 7종 ginsenosides $Rg_{1},\;Re,\;Rf,\;Rb_{1},\;RC,\;Rb_{2}$ 및 Rd를 양호하게 분리하였다. 이때 분석 조건으로 이동상 용매 조성은 (A) $H_{2}O$, (B) methyl cyanaide을 (A) 90/(B) 10에서 (A) 0/(B) 100으로 기울기 용리를 이용하였으며, 기울기 용리 제어장치를 사용하여 용리시켰다. 용매 흐름속도는 1.5ml/min, 검출기는 UV detector(203nm)이었다. 이 방법은 분리능과 재현성 및 회수율이 양호하므로, 앞으로 인삼중 ginsenosides 분석에 응용될 수 있을 것으로 사료된다.
Background: Salvia miltiorrhiza (SM), a traditional oriental medicine, has been reported to have anti-tumor properties, but its exact mechanism remains to be elucidated. In this study, we investigated several of the molecular events that occur in human breast carcinoma MCF-7 cells and human pulmonary adenocarcinoma A549 cells. Methods: For this purpose, we evaluated the growth-inhibitory effect of SM in association with the expressions of p53, p21, cyclin D1, and pRb, which are known to be involved in cell cycle arrest. The extent of thymidine incorporation was also examined to assess G1/S phase cell cycle arrest in both cells by $^3H$-thymidine incorporation. Results: Our results show that SM inhibits the growth and the proliferation of MCF-7 and A549 cells. Furthermore, we also observed increased expression of p21 via a p53-dependent pathway in both cell lines after treating with SM. In addition, treatment with SM for 24 hours caused the suppression of hyperphosphorylated retinoblastoma protein (pRb) expression and the dephosphorylation of pRb. Conclusion: These findings suggest that the growth inhibitory and the anti-proliferation effects of SM on MCF-7 cells and A549 cells are mediated via the decreased expression and dephosphorylation of pRB by p21 up-regulation in a p53-dependent manner. To the best of our knowledge, this study is the first to report upon the molecular mechanisms involved in SM-induced tumor cell growth inhibition.
Previous studies have demonstrated that expression of galectin-3, a member of family of beta-galactoside-binding animal lectin, is associated with pathological conditions including cancer, atherosclerosis, and viral infection. An increase of this lectin has been observed after infection by Kirsten murine sarcoma, human T lymphotropic virus-l (HTLV-l), and human immunodeficiency virus-l (HIV-l). Viral transactivation protein Tax of HTLV-l mediates the increase in the lectin. In case of HIV-1, there are evidences that Tat would be related with increase in galectin-3. We investigated whether Tat directly induced galectin-3 expression in cells. We found that HIV-l tat gene activated galectin-3 promoter in RAW264.7 cells. To demonstrate direct induction of galectin-3 by HIV-l tat, we transfected the tat into a rabbit smooth muscle cell line (Rb1) and obtained RblTatCl-2, a clone of cell stably transfected with tat gene. The Rb1TatCl-2 cells exhibited activation of LTR promoter and up-regulation of galectin-3 transcript as well as protein. Our results indicate that HIV-l tat alone is sufficient to induce the expression of galectin-3. The Rb1TatCl-2 cells could be valuable for study of the effect of HIV-1 tat on expression of cellular genes.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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