Periodontal therapy has dealt primarily with attempts at arresting progression of disease. however, more recent techniques have focused on regenerating the periodontal ligament having the capacity to regenerate the periodontium. Recombinant human bone morphogenetic protein-7(rhBMP-7) can differentiate the osteoprogenitor cells and induce bone formation. The purpose of this study was to evaluate the effect of BMP-7 on rat periodontal ligament cells differentiation, in vitro. In the control group, cells was cultured with DMEM media. In the experimental groups, cells were cultured with rhBMP-7 in concentration of 10, 25, 50 and 100 ng/ml. Each group was characterized by examining alkaline phosphatase activity at 3 and 5 days of culture and the ability to produce mineralized nodules of rat calvarial cells at 14 days of culture. Synthesis of type I collagen(COL-I), osteocalcin(OCN), and bone sialoprotein(BSP) was evaluated by RT-PCR at 7 days of culture. Activation of Smad proteins and p38 MAP kinase was determined by western blot analysis of the cell lysates. Alkaline phosphatase activity was significantly increased in the concentration of BMP-7 50 ng/ml and 100 ng/ml compared to the control(p<0.05). The mineralized bone nodule formation was greater with addition of 50 ng/ml and 100 ng/ml BMP-7 than the control(p<0.01). In 7 days' culture, the expressions of COL-I, BSP, and OCN was increased by BMP-7 in concentration of 10 $ng/ml{\sim}100$ ng/ml. In western blot analysis, BMP-7 treated culture cells expressed Smad 1,5,8 in dose-dependent manner, whereas BMP-7 did not activate phosphorylated form of p38 MAP kinase. These result suggested that BMP-7 stimulate rat periodontal ligament cells to differentiate toward osteoblast phenotype and increase bone matrix production by activation of BMP-Smad pathway.
Aim of the study: Scaffolds are crucial to tissue engineering/regeneration. Biodegradable polymer/ceramic composite scaffolds can overcome the limitations of conventional ceramic bone substitutes such as brittleness and difficulty in shaping. In this study, poly(L-lactide)/hydroxyapatite(PLLA/HA) composite scaffolds were fabricated for in vivo bone tissue engineering. Material & methods: In this study, PLLA/HA composite microspheres were prepared by double emulsion-solvent evaporation method, and were evaluated in vivo bone tissue engineering. Bone marrow mesenchymal stem cell from rat iliac crest was differentiated to osteoblast by adding osteogenic medium, and was mixed with PLLA/HA composite scaffold in fibrin gel and was injected immediately into rat cranial bone critical size defect(CSD:8mm in diameter). At 1. 2, 4, 8 weeks after implantation, histological analysis by H-E staining, histomorphometric analysis and radiolographic analysis were done. Results: BMP-2 loaded PLLA/HA composite scaffolds in fibrin gel delivered with osteoblasts differentiated from bone marrow mesenchymal stem cells showed rapid and much more bone regeneration in rat cranial bone defects than control group. Conclusion: This results suggest the feasibility and usefulness of this type of scaffold in bone tissue engineering.
Purpose: This study was designed to evaluate whether magnetic resonance imaging (MRI) is appropriate for detecting early changes in the mandibular bone marrow and pulp tissue of rats after high-dose irradiation. Materials and Methods: The right mandibles of Sprague-Dawley rats were irradiated with 10 Gy (Group 1, n=5) and 20 Gy (Group 2, n=5). Five non-irradiated animals were used as controls. The MR images of rat mandibles were obtained before irradiation and once a week until week 4 after irradiation. From the MR images, the signal intensity (SI) of the mandibular bone marrow and pulp tissue of the incisor was interpreted. The MR images were compared with the histopathologic findings. Results: The SI of the mandibular bone marrow had decreased on T2-weighted MR images. There was little difference between Groups 1 and 2. The SI of the irradiated groups appeared to be lower than that of the control group. The histopathologic findings showed that the trabecular bone in the irradiated group had increased. The SI of the irradiated pulp tissue had decreased on T2-weighted MR images. However, the SI of the MR images in Group 2 was high in the atrophic pulp of the incisor apex at week 2 after irradiation. Conclusion: These patterns seen on MRI in rat bone marrow and pulp tissue were consistent with histopathologic findings. They may be useful to assess radiogenic sclerotic changes in rat mandibular bone marrow.
In order to develop the allogeneic bone implants instead of autogenous bone grafts for maxillofacial reconstruction, undemineralized freeze-dried human bone was processed. The freeze-dried human bone was implanted into the cranial and mandibular defects of the rabbits. The implants were evaluated clinically, roentgenographically and histomophometrically. And immunohistochemical evaluation of the implants was performed on the rat. The results were as follows : 1. When compared with control defects of $0.8{\times}0.8\;cm$, the implants on the rabbit defects displayed complete osseous bridging clinically and roentgenographically. Histomophometrically a minimal inflammatory cell infiltrate was present but the defects healed well clinically. 2. When compared with control grafts, the freeze-dried implants on the rat muscle displayed decreased antigenicity by immunohistochemical evaluation, due to freeze-drying process. 3. Undemineralized freeze-dried human bone in this study can be preserved as a bank bone in this study and seems to be applicable for clinical allogeneic bone grafts.
This study was done to evaluate the effect of dietary calcium level (a diet which met 100% or twice the calcium level in AIN-76 diet) on preventing bone loss in ovariectomized rats. Forty Sprauge-Dawley female rats(body weight 200$\pm$5g)were divided into two groups. One group were ovariecotomized (Ovx) while the others received sham operation(Sham). Thereafter, each rat group was further divided into normal calcium diet(0.52%) and high calcium diet(1.04%) subgroups. All rats were fed on experimental diet and deionized water ad libitum for 8 weeks. The total body, spine and femur bone mineral densities and bone mineral contents were measured by Dual Energy X-ray Absorptiometry, Eight weeks following operation, ovariectomized rats fed a high calcium diet had a significantly higher total bone mineral content, total bone calcium content, spine bone mineral density, spine bone mineral content and femur bone mineral content than ovariectomized rats fed control calcium diet. The correlation between dietary calcium intake level and spine bone mineral density were positive, but there was no correlation between dietary calcium intake and femur bone mineral density. The findings from the present study demonstrated that bone loss due to ovarian hormonal deficiency can be partially prevented by a high calcium diet. Futhermore, these findings support the strategy of the use of a high calcium diet in the prevention of estrogen depleted bone loss(postmenopausal osteoporosis)
This study was performed to evaluate the effect of HCB on the bone mass and its related factors in estrogen-deficient animal model. The model rats of osteoporosis showed a significant decrease in bone density, bone ash density, calcium content of femur bone. At the 14th day after ovariectomy-surgery, rats were administered with HCB, extract of Houyttnia cordata, per orally, and continued for 10 weeks. And osteoporosis related parameters were determined to investigate the effect of HCB. Osteoporotic rats showed lower serum estrogen level, higher body weight than normal rats, and showed atrophy of uterine horns.
골세포는 골대사에 영향을 미치는 다양한 성장인자와 싸이토카인을 생성하여 골 기질로 유리시킨다. 이 연구는 쥐의 장골 세포 배양 모델에서 recombinant human IL-$1\beta$가 $PGE_2$ 합성과 plasminogen activator의 활성 조절을 통한 골 흡수 유도 기전의 일단을 구명하고, 이와 동시에 TGF-$\beta$에 의한 골흡수 억제 기전을 해명하는데 그 목적이 있다. 쥐의 장골 세포를 배양하여 통법의 골모세포 phenotype을 발현하는 세포를 분리하고 세포 배양능, alkaline phosphatase assay, PG assay, 골흡수능 측정들을 시행하여 다음의 결과를 얻었다. 1. IL-$1\beta$는 쥐의 골모세포의 증식, $PGE_2$ 생성 및 palsmonogen activator의 활성을 촉진하였다. 2. IL-$1\beta$는 쥐의 골모세포에서의 alkaline phosphatase 활성을 감소시켰다. 3. rhIL-$1\beta$는 골 흡수를 촉진시켰다. 4. TGF-$\beta$는 쥐의 장골 세포에서 골의 흡수를 억제하였으며, Vitamin $D_3$에 의하여 유도된 골 흡수를 억제하였다. 이상의 연구 결과는 IL-$1\beta$에 의한 골 파괴의 병인과 관련하여 골 세포 대사의 병리학적 조절에 있어서의 IL-$1\beta$의 역할을 지지하며, 이와 동시에 골 흡수 억제에 있어서의 TGF-$\beta$의 역할을 확인시켜주는 것으로 생각된다.
Objectives: In this study, the author aimed to evaluate the effect of EtOH extract of Ganoderma lucidum (GLE) on osteoblast proliferation in rat fetus calvarial cells. Methods: The osteoblast separated from rat fetus calvariae was cultivated for 6~21 days and evaluated the cell function. After the addition of GLE on the culture medium, we determined the effect of GLE on the cell viability, cell proliferation, bone matrix protein synthesis, alkaline phosphatase (ALP) activity, collagen synthesis and calcified nodule formation of the cultivated osteoblast. Results: GLE did not change the survival rate of rat calvarial osteoblast. GLE increased the proliferation of rat calvarial osteoblast. GLE increased ALP activity of rat calvarial osteoblast. GLE increased bone matrix protein synthesis of rat calvarial osteoblast. GLE increased collagen synthesis of rat calvarial osteoblast. GLE slightly affected calcified nodule formation of rat calvarial osteoblast. Conclusions: This study suggests that Ganoderma lucidum might improve the osteoporosis resulted from augmentation of osteoblast proliferation.
The effect of irradiation of x-ray to developing rat mandible in the gestation stage was focused on the study of mandible development and the side effect of x-ray irradiation. The author studied the effect of x-ray irradiation with the gestated rat and their off'springs. 100 rads, 200 rads, 300 rads and 400 rads of x-ray was irradiated in regular order schematically at the lower left abdomen of gestated rat. 18½days after conception, their off'springs were sacrificed and exaimined their developing mandible with histological findings. The results were as followed. 1. In the 100-200 rads irradiated rat off'springs, bony trabeclulation was revealed irregular shape. In combine with this finding, osteoblast and fibroblast were appeared shrunken of their nucleus and location of eccentric position. 2. In the 300-400 rads irradiated rat off'springs, decrease of fibroblast and osteoblast appearance in the periosteum were prominently observed and empty lacunae were frequently appeared in their bone matrix. 3. The advent of osteoclast and resorption of cortical bone were appeared in proportion to increasing of x-ray irradiation.
Seo, Hyun-Sung;Jung, Jong-Kwon;Lim, Mi-Hyun;Hyun, Dong-Keun;Oh, Nam-Sik;Yoon, Seung-Hwan
Journal of Korean Neurosurgical Society
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제46권4호
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pp.397-402
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2009
Objective : In this study, the authors assessed the ability of rat bone marrow derived mesenchymal stem cells (BMDMSCs), in the presence of a growth factor, fibroblast growth factor-4 (FGF-4) and hydroxyapatite, to act as a scaffold for posterolateral spinal fusion in a rat model. Methods : Using a rat posterolateral spine fusion model. the experimental study comprised 3 groups. Group 1 was composed of 6 animals that were implanted with 0.08 gram hydroxyapatite only. Group 2 was composed of 6 animals that were implanted with 0.08 gram hydroxyapatite containing $1{\times}10^6/60{\mu}L$ rat of BMDMSCs. Group 3 was composed of 6 animals that were implanted with 0.08 gram hydroxyapatite containing $1{\times}10^6/60{\mu}L$ of rat BMDMSCs and FGF-4 $1{\mu}G$ to induce the bony differentiation of the BMDMSCs. Rats were assessed using radiographs obtained at 4, 6, and 8 weeks postoperatively. After sacrifice, spines were explanted and assessed by manual palpation, high-resolution microcomputerized tomography, and histological analysis. Results : Radiographic, high-resolution microcomputerized tomographic, and manual palpation revealed spinal fusion in five rats (83%) in Group 2 at 8 weeks. However, in Group 1, three (60%) rats developed fusion at L4-L5 by radiography and two (40%) by manual palpation in radiographic examination. In addition, in Group 3, bone fusion was observed in only 50% of rats by manual palpation and radiographic examination at this time. Conclusion : The present study demonstrates that 0.08 gram of hydroxyapatite with $1{\times}10^6/60{\mu}L$ rat of BMDMSCs induced bone fusion. FGF4, added to differentiate primitive $1{\times}10^6/60{\mu}L$ rat of BMDMSCs did not induce fusion. Based on histologic data, FGF-4 appears to induce fibrotic change rather than differentiation to bone by $1{\times}10^6/60{\mu}L$ rat of BMDMSCs.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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