본 연구에서는 내분비계 장애물질으로 알려져 있고, 플라스틱 제품의 가소제로 사용되고 있는 di-(2-ethylhexyl) phthalate (DEHP)가 흰쥐의 간세포 미세구조와 간조직내 metallothionein (MT)의 발현 양상에 미치는 영향을 조사하였다. DEHP는 흰쥐 간세포의 미세구조와 MT 발현에 영향을 주었다. 실험군의 경우 조면소포체가 발달하고, 미토콘드리아가 증가하며 리소솜 혹은 퍼옥시좀들이 증가하는 경향을 나타냈다. 한편, MT 발현의 변화를 면역세포 화학적 방법과 western Blot을 수행한 결과 저농도 투여군에서는 약 1.5배, 고농도 투여군에서는 약 2배 가량 증가하는 결과를 나타냈다. 결론적으로 DEHP는 흰쥐 간세포의 구조와 기능에 영향을 주는 것으로 판단되며, 이러한 세포내 스트레스가 MT 발현 증가 현상과 연관이 있을 것으로 판단된다.
이 연구는 $CCl_4$로 유도된 간독성에 노두 사포닌의 간 보호 효과를 연구하기 위해 수행되었다. SD-Rat를 2주 동안 노두 사포닌 100 mg/kg이 되도록 복강 내에 투여하였다. 14 일째, $CCl_4$를 투여하고 12시간 후에 에테르 마취 후 간과 혈청을 분리했다. AST, ALT는 대조군에 비해서 노두 사포닌군이 65.56%와 59.04%로 억제되었다. MDA 수치는 대조군과 비교해서 노두 사포닌군의 간 homogenate에서 53.74% 억제되엇고 미토콘드리아에서는 89.86% 억제 되었다. SOD의 활성은 대조군과 비교해서 노두 사포닌군의 간 homogenate에서 42.51 % 억제되었고, 미토콘드리아에서는 38.42% 억제되었다. GPx의 활성은 대조군과 비교해서 노두 사포닌 군의 간 homogenate에서 72.74% 억제되었고, 미토콘드리아에서는 72.68% 억제되었다. $CCl_4$으로 나타난 간세포의 괴사와 울혈이 노두 사포닌군 에서는 조직실험결과 감소되는 것으로 나타났다. 모든 데이터는 $CCl_4$로 유도된 간독성을 노두 사포닌이 보호하는 결과를 보였으며, 이는 간독성에 대한 보호효과를 가진 약물 소재 개발에 이용될 수 있다.
이유한 Sprague Dawley 종의 암컷 흰쥐를 두군으로 나누어 각각 pyridoxine이 충분한 식이 (22mg/kg diet)와 pyridoxine이 부족한 식이 (1.2mg/kg diet0로 성장시킨후, 적절한 시기에 임신시켰다. 태어난 새끼가 이유할 때 결핍식이군을 둘로 나누어, 한쪽은 pyridoxine이 충분한 식이로 바꾸어준후, 세군의 쥐를 생후 10-주까지 성장시켰다. 각 군의 새끼쥐가 각각 0, 3, 7, 10 주 되었을대, 간의 mitochondria 및 cytosolic fraction 에 있는 Asparate aminotransferase [ EC 2.6.1.1] activity 및 pyridoxal phosphate의 함량을 측정하였다. 결핍군의 간 aspartate aminotransterase activity는 mitochondria 및 cytosolic fraction에서 각각 대조군에 비해 유의적으로 낮았으며 10-4 M pyridoxal phosphate를 첨가한 후 측정한 total enzyme activity 는 거의 대조군과 비슷하였다. 3 주이후 pyridoxine 이 충분한 식이로 바구어준 회복군에서도 대조군에 비해 유의적으로 낮았으나, 결핍군보다는 높았다. 이두 fraction 에서의 pyridoxal phosphate 함량은 결핍군이 대조군보다 현저히 낮았으며, 회복군은 대조군과 비슷하였다. 이로써, 장기간에 걸친 pyridoxine결핍이간의 aspartate aminotransferase activity 및 pyridoxal phosphate에 현저한 영향을 미치며 이유기 이후의 식이보충에 의해서도 enzyme activity는 쉽게 회복되지 않음을 알 수있다.
본 연구는 지질의 과산화에 대한 항산화 효과를 조사하기 위하여 엉겅퀴(Silybum marianum)로부터 silymarin 및 silybin을 정제하여 실험하였다. Silymarin 및 silybin은 xanthine oxidase system에서 superoxide anion의 생성을 억제하였다. 쥐의 간 mitochondria에서는 silymarin 및 silybin은 reduced nicotinamide adenine dinucleotide phosphate(NADPH)에 의해 효과적 또는 ascorbic acid 또는 Fenton's reagent에 의하여 비효소적으로 유도되는 지질의 과산화를 억제하였다. 또 mitochondria의 지질과산화도 silymarin 및 silybin에 의하여 억제되었고 NADPH 의존 cychrome P-450 reductase에 의한 Fe2+의 산화도 silymarin 및 silybin에 의하여 억제되었다. Silymarin 및 silybin은 microsome의 효소 시스템 및 linoleic acid hydroperoxide induced peroxidation system에서 지질의 과산화의 연쇄반응에서 유리기의 억제효과가 있었다.
인삼이 강장제인 약용식물로 인식됨에 따라 세포에 대한 인삼 추출물의 효과를 연구하기 위해 미생물을 실험재료로 연구한 결과, 인삼이 두 단계로 세포 호흡에 영향을 미치는 것으로 관찰되었으며 (Tso and Fung, Microbios, Lett. 13 : $7{\~}12$., Tso, Acta Microbiologies sinica 21 : $53{\~}56$)이것은 세포 에너지 대사 변화에 중요한 역할을 할 수 있다는 것을 시사해 주었다. 이와 같은 결과로 인삼이 세포의 mitochondria 에 의한 산소 소모에 미치는 효과를 검토한 결과, 일정한 pH 조건하에서 인삼은 호흡을 촉진시켰으며, 일정농도 이상 투여하였을 경우 다소의 억제효과를 보였다. 위의 결과들은 세포의 mitochonbria 호흡에 미치는 인삼의 효과를 재확인하는 것으로 강장제로서의 인삼의 가치를 뒷받침해 주고 있다.
본 연구에서는 흰쥐 간장에 있어서 아실-CoA 합성효소 4의 세포내 소기관의 존재 여부를 확인함과 동시에 fasting, high fat diet, fat-free high sucrose diet, 퍼옥시솜 증식 인자인 DEHP [Di-(2-ethylhexyl)phthalate]를 급여한 흰쥐 간장에 있어서 ACS4의 발현에 대하여 조사하였다. ACS4는 ACSI과 마찬가지로 흰쥐 간장의 마이크로솜, 미토콘드리아와 퍼옥시솜에 존재하는 것으로 생각되며 미토콘드리아에서 가장 많은 단백질이 검출되었다. ACS4 mRNA는 절식하였을 때와 high fat diet, fat-free high sucrose diet을 급여하였을 때는 대조군에 비하여 2.3배 발현이 증가하였으며 DEHP을 급여하였을 때는 3.9배 mRNA의 증가를 나타내었다. 이러한 결과를 종합하여 보면 간장에 있어서 ACS4는 기본적인 $\beta$-산화뿐만 아니라 호르몬에 의한 조절과 간접적으로는 인슐린에 의한 조절도 받는 것으로 생각되며 다양한 기능을 수행하고 있음을 추측할 수 있다.
본 연구는 카드뮴으로 유발된 생쥐 간중독에 대한 키토산올리고당의 효과를 알아보기 위하여 시도되었다. Mouse를 대상으로 카드뮴 (5.0 mg/kg; i.p.) 단독투여군(group Cd), 카드뮴과 키토산올리고당 (0.5% solution) 동시투여군 (group Cd+Chi) 그리고 키토산올리고당 1주일 전처치군 (group Chi7+Cd)으로 구분한 후 간손상 억제효과를 알아보기 위해 혈청중 효소활성도와 glutathione peroxidase (GSH-Px)의 활성도 그리고 glutathione reductase (GR)의 활성도를 비교측정하였다. 또한 간조직의 형태학적 손상을 확인하기 위해 조직학적 관찰을 실시하였다. 혈청 효소활성결과, AST, ALT 그리고 LDH의 활성도는 키토산올리고당을 처치한 Cd+Chi군과 Chi7+Cd군이 Cd군보다 감소되었다. 그러나 TP와 Alb의 활성도는 키토산올리고당을 처치한 Cd+Chi군과 Chi7+Cd군이 Cd군보다 증가되었다. GSH-Px활성은 Cd군에 비해 Cd+Chi군과 Chi7+Cd군이 현저하게 증가되었다. GR활성은 Cd군에 비해 Cd+Chi군과 Chi7+Cd군이 현저하게 감소하였다. 광학현미경적 관찰 결과, Cd군은 카드뮴 독성에 의한 간세포의 괴사가 관찰되었다. Cd+Chi군과 Chi7+Cd군은 정상군과 유사한 소견을 보였다. 이상과 같은 결과로, 키토산올리고당이 생쥐 간조직에 미치는 카드뮴의 독성을 감소시킴을 알 수 있었다.
Objective: The objective of this study was to compare the antioxidant effects among wild ginseng, cultivated wild ginseng, and ginseng extracts. Methods: In vitro antioxidant activities were examined by total antioxidant capacity (TAC), oxygen radical scavenging capacity(ORAC), total phenolic content, 1, 1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging activity, inhibition of induced lipid peroxidation using liver mitochondria, reactive oxygen species(ROS) scavenging effect using 2', 7'-dichlorofluorescein(DCF) fluorescence. Results: 1. TAC of 1.5 and 3.75 mg extracts was highest in cultivated wild ginseng, followed by wild ginseng and lowest in ginseng. 2. ORAC of 2, 10, and $20{\mu}g$ extracts was highest in cultivated wild ginseng, followed by wild ginseng and lowest in ginseng. 3. Total phenolic content of 0.375, 0.938, and 1.875 mg extracts was highest in cultivated wild ginseng, followed by wild ginseng and lowest in ginseng. 4. DPPH(1, 1 -Diphenyl-2-picrylhydrazyl) scavenging activity between wild ginseng and cultivated wild ginseng did not differ significantly (p>0.05). 5. Induced lipid peroxidation, measured by TBARS concentration in solution containing rat liver mitochondria incubated in the presence of $FeSO_4$/ascorbic acid was inhibited as amounts of wild ginseng, cultivated wild ginseng, and ginseng extracts increased. TBARS concentration of ginseng extracts were significantly (p<0.05) higher than wild ginseng or cultivated wild ginseng extracts. 6. DCF fluorescence intensity was decreased as concentrations of wild ginseng, cultivated wild ginseng, and ginseng extracts increased, demonstrating that ROS generation was inhibited in a concentrationdependent manner. Conclusions: In summary, the results of this study demonstrate that cultivated wild ginseng extracts had similar antioxidant activities to wild ginseng extracts and greater that of cultivated ginseng extracts.
본 연구는 상황버섯이 간 손상 물질을 투여한 흰주의 지질 대사에 미치는 영향을 조사하기 위해 수행되었다. 실험군은 $CCl_4$ 투여군, $CCl_4$와 고지방 식이군으로 분류하였고, 상황메탄올 추출물을 병용투여 함으로써 다음과 같은 결론을 얻었다. 실험동물의 체중 증가량, 사료 섭취량, 식이효율은 $CCl_4$투여로 감소되었으나, 추출물 병용투여로 증가되었다. 실험동물의 간의 무게는 $CCl_4$ 투여로 증가되었다. 이런 경향은 특히 $CCl_4$와 고지방 식이시 대조군에 비해 32% 증가하였으나 추출물 투여로 유의적인 감소를 보였다. 콜레스테롤, 중성지질, LDL 및 LDL-인지질은 $CCl_4$ 투여로 증가되었으나 상황추출물 투여로 인하여 감소를 보였다. 한편, 추출물의 투여는 간조직중 HDL-콜레스테롤의 함량을 증가시켰다. 추출물의 투여에 의한 간기능 지표효소인 GOT, GPT, AP 및 LDH의 활성이 감소되었다. 간의 전자현미경적 관찰에서 대조군은 ER이 골고루 분포하고 있으며 정상적인 cytosol의 구조를 하고 있으나, $CCl_4$ 투여군에서는 mitochondria와 ER의 분포가 국부적이고 균일하게 분포하지 않았으며, cytoplasmic matrix의 구조가 퇴화되는 양상을 나타내었다. 일부 조직에서는 fibrous filaments의 출현이 관찰되었다. 그러나, 추출물 투여군은 손상된 세포질의 회복현상이 나타났으며 mitochondria의 증가가 관찰되었다. 이상의 결과에서 상황 추출물이 흰쥐의 지질대사에 생리적인 활성효과를 가지고 있는 것으로 사료되며 간지질 대사의 개선 효과가 있어 고지혈증, 동맥경화, 고혈압 등 순환기계 및 심혈관계 질환의 예방과 치료에 효과가 있을 것으로 생각된다. 또한 건강기능성 식품으로서의 가치가 기대되며 추후 상품으로서의 개발 가치가 충분한 것으로 보인다.
영지 추출액의 항산화 활성을 thiocyanate method, TBA method, weighing method를 이용하여 검색한 결과 n-hexane 추출물, methanol 추출물에서 항산화활성이 나타났으며 그 중에서 n-hexane 추출물의 fraction V와 methanol 추출물의 methanol 불용성 fraction II에서 강한 활성을 나타내었다. 이들 항산화 활성을 나타내는 fraction 5와 fraction II를 rat의 간 균질액을 이용한 항산화 활성 검색에서 과산화 지질 생성억제를 TBA값으로 나타내어 inhibition ratio(I.R.)를 산출하였으며 그 결과 n-hexane 추출물의 fraction V는 l5%, methanol 추출물의 methanol 불용성 fraction II는 54.6%의 억제율을 나타내었다 이는 rat의 간 mitochondria에서 과산화지질 생성 억제율이 영지의 물 추출물은 16%, acetone 추출물은 23%인 것에 비하여 약간 높았으나, microsome에서 과산화지질 생성 억제율이 물 추출물은 44%, acetone 추출물은 75%인 것에 비하여 다소 낮은 활성을 보여주었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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