Infectious hematopoietic necrosis virus (IHNV) is s significant viral pathogen affecting cultured rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) in Korea. In this study, five monoclonal antibodies (mAbs) (IHNV-1, 2, 3, 4, and 5) were produced using purified IHNV. Reactivities of these mAbs were analyzed by western blot (WB), enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), and indirect fluorescent antibody test (IFAT). These mAbs recognized glycoprotein (69 kDa, IHNV-1), nucleocapsid protein (39 kDa, IHNV-3, 4, and 5), or phosphoprotein (27 kDa, IHNV-2) of IHNV by WB analysis. ELISA results indicated that these five mAbs were specific to IHNV without showing any cross-reactivity against other fish viruses (hirame rhabdovirus, infectious pancreatic necrosis virus, and viral hemorrhagic septicemia virus). IFAT demonstrated specific fluorescence signals of IHNV-infected epithelioma papulosum cyprini (EPC) cells, whereas no reactivity of normal EPC cells was observed. These mAbs can be very useful for immuno-diagnosis of IHNV infection.
건국대학교 축산대학 부설 양어장에서 사육중인 50마리의 무지개 송어 수컷에서 채취된 정액을 각각 1989년 12월부터 1990년 12월까지 $-20^{\circ}C$와 $-40^{\circ}C$에서 1년 1989년 12월부터 2월까지 2개월동안 $-196^{\circ}C$인 액체질소탱크내에서 그리고 1990년 12월부터 2월까지 $-20^{\circ}C,\;-40^{\circ}C,\;-70^{\circ}C$에서 2개월 동안 동결보존후, $-13^{\circ}C$ 냉수에 해동시켜 20분간 원심분리기에서 정자를 분리시킨 다음 Tyrode 용액으로 50배 정도 희석시킨 후의 정자의 생존율 및 운동성과 신선한 난자와 인공수정시킨 후의 수정률 및 부화율을 조사한 결과는 다음과 같다. 동결보존전과 해동후의 정자의 생존율을 비교해 볼 때 전반적으로 생존전과 큰 차이 없이 생존율이 높게 나타났다. 3가지의 항동해제로 동결보존시킨 후 해동된 정자가 포함된 희석액으로 인공수정시킨 후의 수정률은 모두 $99\%$ 이상으로서 이러한 수치는 $99\%$ 이상을 나타내는 대조구와 차이가 없었고, $-20^{\circ}C,\;-40^{\circ}C,\;-70^{\circ}C$\;-196^{\circ}C와 같이 서로 다른 온도에서도 수정률은 대조구와 큰 차이 없이 나타났다. 1M의 DMSO의 항동해제로 $-196^{\circ}C$에서 2개월 동안 동결보존시킨 후 해동된 정자가 포함된 희석액으로 인공수정시킨지 24일 이후의 수정률 및 부화율은 BSA가 포함된 희석액이 각자 $96\%$ 및 $8\%$ 이고, 포함되지 않은 희석액은 각각 $98\%,\;10\%\;$로서 BSA가 포함되지 않은 경우에서 부화율이 약간 높게 나타났다. 1M DMSO의 항동해제로 2개월동안 동종보존시킨 후 해동된 정자가 포함된 희석액으펄 인공수정 시킨지 24일 이후의 부화율은 각각 $-196^{\circ}C$에서 $10\%,\;-40^{\circ}C$에서 $34\%,\;-70^{\circ}C$에서 $35\%$로 나타났다. 1M의 methanol의 항동해제 동결보존시친 후 해동된 정자가 포함된 희석액으로 인공수정시킨지 24일 이후의 부화율은 각각 $-20^{\circ}C$에서 $22\%,\;-70^{\circ}C$에서 $28\%$로 나타났다. 1M glycerol의 항동해제로 동결보존시킨 후 해동된 정자가 포함된 희석액으로 인공수정시킨지 24일 이후의 부화율은 각각 $-20^{\circ}C$에서 $22\%,\;-70^{\circ}C$에서 $33\%$로 나타났다. 1.5M DMSO의 항동제로 2개월동안 동결보존 시킨 후 해동된 정자가 포함된 희석액으로 인공수정시킨지 24일 이후의 부화율은 각각 $-20^{\circ}C$에서 $27\%,\;-40^{\circ}C$에서 $36\%,\;-70^{\circ}C$에서 $35\%$로 나타났다. 1.5M glycerol의 항동해제로 2개월동안 동결보존시킨 후 해동된 정자가 포함된 희석액으로 인공수정시킨지 24일 이후의 부화율은 각각 $-20^{\circ}C$에서 $34\%,\;-40^{\circ}C$에서 $31\%,\;-70^{\circ}C$에서 $31\%$로 나타났다. 1.5M methane의 항동해제로 2개월동안 동결보존시킨후 해동된 정자가 포함된 희석액으로 인공수정시킨지 24일 이후의 부화율은 각각 $-20^{\circ}C$에서 $28\%-40^{\circ}C$에서 $29\%-70^{\circ}C$에서 $28\%$로 나타났다. 신선한 정자의 중편부는 2본의 중앙섬유소, 9본의 외측조대섬유, 미토콘드리아초로 구성되어 있다. 동결보존시 정자는 편모의 구부러짐, 정자경부의 핵막의 이탈, 핵내용물이 유출되는 손상을 입었다.
The sex differentiation of fishes occurs under the control of genetic and various environmental factors. DM-domain containing genes are novel zinc finger transcription factors and play key roles in sex determination. In order to isolate the wrasse DMRT (wDMRT) cDNA from the protogynous wrasse (Halichoeres tenuispinnis), the wrasse testis cDNA library was screened using the $^{32}$ P-labeled PCR products, which were amplified with the degenerate primers from conserved DM-domain regions of several DMRT genes. Among a few positives obtained through screening, the full length wDMRT cDNA of 2.9kb size encoding a predicted 300 amino acid residues was isolated. The sequence analysis exhibited 60%, 43% sequence identity with rainbow trout and tilapia DMRT1, respectively. RT-PCR assay showed that wDMRT was expressed specifically in male testis. Also, wDMRT gene was strongly expressed in May during reproductive season, when the reproductivity of wrasse is most active. This results suggested that wDMRT gene function in testis differentiation The conserved DM-domain regions were amplified using PCR from DMRT genes of several species among Labridae, and their sequences were determined. The sequence of DM-domain region of Halichoeres. tenuispinis was identical to those of Pseudolabrus japonicus, Pteragogus flagellifera, and showed 94% identity with that of Halichoeres poecioptrerus.
최첨단 연구로 성장하고 있는 해양생물공학 연구 중 염색체공학 연구의 배수체 조작, 성분화, 자성 발생, 형질전환 어류와 유전자 조작에 관한 최근의 연구 동향을 분석하고 향후 발전 방향에 관하여 살펴보았다. 배수체 연구 중 3배체 어류 생산 연구는 20여종의 어류들 중 무지개 송어와 메기가 물리적 충격을 이용한 실험법으로 산업적으로 이용 가능한 수준에 있다. 성분화를 포함한 약 15종의 고급 어종이 방사선 투사법에 의해 자성 발생 2배체를 생산 유도하였다. 형질전환 어류는 1985년 이래 약 40여종의 어류가 외래 유전자를 미세 조작이나 전기충격법에 의해 형질전환되고 있다. 최근에 역바이러스성 벡터들에 의한 외래 유전자를 이용한 형질전환 어류가 생산되었으며 이러한 형질전환 어류는 기초과학 육성은 물론 해양생물공학 연구의 발전이 기대되고 있다.
There are some critical drawbacks in the use of biomarkers for a global assessment of the toxicological impacts many chemicals and environmental pollutants have, primarily due to an individual biomarker's specificity for an explicit chemical or toxicant. In other words, the biomarker-based assessment methodology used to analyze toxicological effects lacks a high-throughput capability. Therefore, eco-toxicogenomics, or the study of toxicogenomics with organisms present within a given environmental locale, has recently been introduced with the advent of the so-called "-omics" era, which began with the creation of microarray technologies. Fish are comparable with humans in their toxicological responses and thus data from toxicogenomic studies performed with fish could be applied, with appropriate tools and implementation protocols, to the evaluation of environments where human or animal health is of concern. At present, there have been very active research streams for developing expression sequence tag (EST) databases (DBs) for zebra fish and rainbow trout. Even though few reports involve toxicogenomic studies with fish, a few groups have successfully fabricated and used cDNA microarrays or oligo DNA chips when studying the toxicological impacts of hypoxia or some toxicants with fish. Furthermore, it is strongly believed that this technology can also be implemented with non-model fish. With the standardization of DNA microarray technologies and ample progress in bioinformatics and proteomic technologies, data obtained from DNA microarray technologies offer not only multiple biomarker assays or an analysis of gene expression profiles, but also a means of elucidating gene networking, gene-gene relations, chemical-gene interactions, and chemical-chemical relationships. Accordingly, the ultimate target of eco-toxicogenomics should be to predict and map the pathways of stress propagation within an organism and to analyze stress networking.
[ $3\beta-$ ]히드록시-$\Delta^5$-스테로이드 탈수소효소 ($3\betaβ-HSD,$$3\beta-hydroxy-\Delta^5-steroid\;dehydrogenase$$\Delta^5$-스테로이드$\rightarrow\Delta^4$-스테로이드로의 대사경로에 관여하는 효소)에 대하여 특이적 저해제인 cyanoketone과 trilostane의 저해 효과가 $^3H-pregnenolone$ 전구체를 이용하여 무지개송어 난소에서 분리한 여포층, 협막층(theca layers)을 대상으로 비교 관찰되었다. Pregnenolone으로부터 $17\alpha-hydroxyprogesterone$으로의 대사과정에서 주요 효소인 $(3\beta-HSD$ 활성은cyanoketone $10^{-6}$과 $10^{-5}\;M$, 그리고 trilostane $10^{-5}$과 $10^{-4}\;M$의 농도에서 억제되었으며, trilostane이 cyanoketone보다 더 효과적인 억제반응을 보이는 것으로 나타났다. Pregnenolone으로부터 $\Delta^4$-스테로이드 대사물 축적에 대한 trilostane의 저해작용은 사용한 농도 즉, $10^{-8}, 10^{-7}, 10^{-6}$ 그리고 $10^{-5}\;M$에 비례하여 나타났으나 완전한 저해효과는 보이지 않았다.
생물학적 복구법의 효율은 미생물 균수의 계수, 호흡율, 분해율 등으로 측정할 수 있으며 부작용 시험은 Daphnia,굴의 유충, 무지개 송어 를 사용하여 측정된다. On-Site처리에 있어서는 산소 전달이 문제가 되는데 이에는 과산화 수소가 사용될수 있으며(벤젠계통의 용매), 유류오염 방제시에는 친유화적 질소 및 인을 첨가할 수 있다. 접종균주는 혼합균주 또는 순수 균주가 사용되는데 후자에는 Pseudomonas와 Phaneochate 등이 있다. 때로는 효울을 높이기 위해 효소를 첨가 하거나 광분해법과 병용되기도 한다. 토양의 유류오염물질, 예컨대 폐윤활유, 기계유, 오일 슬러지들을 처리할때는 토양상부 15∼20cm를 갈고 유류오염물질을 5%의 농도로 주입한다. 이 때 적정 pH는 7∼8, 탄화수소 질소 = 100 : 1, 탄화수소 : 인 = 800 : 1이며 적절한 배수가 필요하다. 지하 유류오염물질의 처리에 있어서는 특히 다량의 산소가 필요하며 해양유류오염물질의 처리에 있어서는 친유화성 비료를 첨가하면 효과가 있다 생물학적 복구법에 의해 대기오염물질 특히, 악취 물질을 처리할 수 있는데 반응기로는 생물여과법과 생물세정기가 쓰인다.
Joh, Seong Joon;Kweon, Chang Hee;Kim, Min Jeong;Kang, Min Su;Jang, Hwan;Kwon, Jun Hun
대한수의학회지
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제50권1호
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pp.29-35
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2010
Yersinia (Y.) ruckeri has been recognized as a serious bacterial pathogen to several kinds of fish, including rainbow trout. However, there are no reports about the characteristics and pathogenicity of Y. ruckeri isolated from farm-cultured eels. In this study, we isolated and characterized Y. ruckeri from the farm-cultured eel Anguilla japonica in Korea. We investigated the phenotypic and genotypic characteristics of Y. ruckeri and tested the virulence of Y. ruckeri isolates on experimentally infected eels. Examination of the flagellar morphology of Y. ruckeri by electron microscopy showed peritrichous flagella in its cell body. Biochemical reaction studies showed overall identical profiles between the isolates and the reference strain of Y. ruckeri in API 20E and API ZYM tests. We sequenced the 16S rRNA of the Y. ruckeri (1,505 bp) for the genotypic characterization (National Center for Biotechnology Information accession number EU401667). Comparison of the 16S rRNA sequences with previously reported Y. ruckeri strains revealed similar phylogenetic relationships. In the virulence assay of the Y. ruckeri on eels, the eels exhibited listlessness, but Y. ruckeri was reisolated from those of the gills and kidneys.
Munguti, Jonathan Mbonge;Kim, Jeong-Dae;Ogello, Erick Ochieng
Fisheries and Aquatic Sciences
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제17권1호
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pp.1-11
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2014
The Kenyan aquaculture sector is broadly categorized into freshwater aquaculture and mariculture. Whereas freshwater aquaculture has recorded significant progress over the last decade, the mariculture sector has yet to be fully exploited. The Kenyan aquaculture industry has seen slow growth for decades until recently, when the government-funded Economic Stimulus Program increased fish farming nationwide. Thus far, the program has facilitated the alleviation of poverty, spurred regional development, and led to increased commercial thinking among Kenyan fish farmers. Indeed, national aquaculture production grew from 1,000 MT/y in 2000 (equivalent to 1% of national fish production) to 12,000 MT/y, representing 7% of the national harvest, in 2010. The production is projected to hit 20,000 MT/y, representing 10% of total production and valued at USD 22.5 million over the next 5 years. The dominant aquaculture systems in Kenya include earthen and lined ponds, dams, and tanks distributed across the country. The most commonly farmed fish species are Nile tilapia Oreochromis niloticus, which accounts for about 75% of production, followed by African catfish Clarias gariepinus, which contributes about 21% of aquaculture production. Other species include common carp Cyprinus carpio, rainbow trout Oncorhynchus mykiss, koi carp Cyprinus carpio carpio, and goldfish Carassius auratus. Recently, Kenyan researchers have begun culturing native fish species such as Labeo victorianus and Labeo cylindricus at the National Aquaculture Research Development and Training Centre in Sagana. Apart from limited knowledge of modern aquaculture technology, the Kenyan aquaculture sector still suffers from an inadequate supply of certified quality seed fish and feed, incomprehensive aquaculture policy, and low funding for research. Glaring opportunities in the Kenyan aquaculture industry include the production of live fish food, e.g., Artemia, daphnia and rotifers, marine fish and shellfish larviculture; seaweed farming; cage culture; integrated fish farming; culture of indigenous fish species; and investment in the fish feed industry.
Kim, Ki-Hyuk;Baeck, Gun-Wook;Kim, Mu-Chan;Park, Chan-Il
한국어병학회지
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제22권2호
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pp.137-146
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2009
The black rockfish Sebastes schlegelii neutrophil cytosolic factor components p47 phox (phagocyte oxidase) cDNA was cloned. The sequence of the cDNA showed that rockfish p47 phox cDNA consisted of 1,952 bp contained open reading frame encoding predicted polypeptide of 420 amino acids. Additionally analysis of the p47 phox amino acid sequence showed two potential SH3 domains. The functional domains are highly conserved in many animals, though the sequence of the components of the black rockfish showed low homology with that of mammals. The deduced amino acid sequence of the black rockfish p47 phox was similar to those of the carp (60.4%), zebrafish (59,2%), rainbow trout (68.5%), xenopus (55.2%), mouse (54.2%), rabbit (54.5%), rat (53.7%), and chicken (50.9%). The expression of the rockfish p47 phox molecule was induced in peripheral blood leukocytes (PBLs) from 1 to 12 h following LPS stimulation, with a peak at 6 h after the stimulation, and which increased at 1, 3, and 12 h after treated with Poly I:C compared with the control. The rockfish p47 phox gene was expressed in various tissues of healthy fish. The level of p47 phox expression was high in the PBLs, kidney and spleen.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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