• 제목/요약/키워드: RNA processing

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한국 인삼 성분들에 관한 생화학적 연구(II) 인삼 성분들이 RNA 중합효소의 활동성에 미치는 영향 (Biochemical Studies on the Chemical Components of Borean Ginseng (ll) Effects of Ginseng Components on the Activity of RNA Polymerase)

  • 장세희;박인원
    • Journal of Ginseng Research
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    • 제1권1호
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    • pp.25-28
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    • 1976
  • 몇 가지 유기용매를 사용하여 인삼 추출액을 분별 분리하여 몇 개의 분칠들을 얻어서 이들이 RNA중합효소의 활동성에 미치는 영향을 조사하였다. 백삼과 홍삼에서 모두 RNA 중합효소의 활동성에 양성적인 효과를 가진 분획들을 얻었다. 백삼의 경우 RNA 중합효소에 양성적인 효과를 미치는 성분들은 전체 메탄을 추출액 분획, 초산에틸 추 출모액 및 이 모액의 수용성 분획들에서 확인되었고 흥삼의 경우에는 전체 메탄을 추출액 분획과 에테르 분획들에서 확인되었다. 이 사실은 중합효소에 양성적인 효과를 나타내는 성분들이 무극성 및 극성 부분들로 이루어져 있으며, 그들이 홍삼의 가공과 정에서 두 부분으로 분해되었을 것이라는 것을 암시의 준다.

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RraB의 발현에 따른 대장균의 성장 저해의 원인 규명 (Implications of Growth Arrest Induced by Overproduction of RraB in Escherichia coli)

  • 류상미;염지현;고하영;신은경;이강석
    • 미생물학회지
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    • 제46권2호
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    • pp.223-227
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    • 2010
  • RNase E는 대장균 내에 있는 수많은 RNA의 분해와 가공에 관여하며, 또한 RNA 대사 작용에 관련된 거대한 단백질 복합체인 데그라도좀을 구성하는 중요한 효소로 알려져 있다. RraA와 RraB는 최근에 밝혀진 RNase E의 단백질 저해제이며, 진화적으로 잘 보존되어 있다. 이 연구에서는 RraA를 발현 시킬 때와는 달리 세포 내에서 RraB를 발현 시키면, RNase E의 과발현에 따른 세포의 성장 저해를 회복시키지 못하고 더 저해하는 것을 확인하였다. 이 현상이 RraA와 RraB가 세포내 RNase E의 기질들에 대해 특이적으로 영향을 미치기 때문인지를 알아보기 위해 세 개의 RNase E 기질을 분석하였다. 그 결과, ColE1-타입 플라스미드의 복제수를 조절하는 RNA I과 라이보좀 단백질 S15를 코딩하는 rpsO mRNA의 경우 RraA가 RraB 보다 효과적으로 RNase E의 활성을 저해하며, RNase P의 RNA 구성요소의 전구체인 pM1 RNA에 대한 RNase E의 효소 활성은 RraB가 저해하지 못하는 것을 관찰하였다. 이 결과는 RraB가 RraA보다는 높은 기질 특이적으로 RNase E의 효소활성을 저해하며, 이러한 이유로 RNase E의 과발현에 의한 세포의 성장 저해를 RraB의 과발현으로 극복할 수 없었다고 추론할 수 있다.

Kinesin-I과 직접 결합하는 STAR RNA 결합 단백질인 SAM68, SLM-1과 SLM-2의 규명 (The STAR RNA Binding Proteins SAM68, SLM-1 and SLM-2 Interact with Kinesin-I)

  • 석대현
    • 생명과학회지
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    • 제21권9호
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    • pp.1226-1233
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    • 2011
  • 키네신은 신경세포에서 미세소관 위를 따라 소포들을 운반하는 분자 motor 단백질로 4개의 단백질로 구성되어있다. 신경세포내에서 발현하는 KIF5C가 세포 내에서 어떤 특정소포를 이동시키는가는 신경세포성장에서 중요문제이다. 이에 본연구는 KIF5C와 결합하는 단백질을 동정하기 위하여 효모 two-hybrid 방법을 사용하여 KIF5C와 특이적으로 결합하는 $\underline{S}$am68-$\underline{l}$ike $\underline{m}$ammalian protein 2 (SLM-2)을 확인하였다. $\underline{S}$ignal $\underline{T}$ransducers and $\underline{A}$ctivators of $\underline{R}$NA (STAR) family의 한 종류이며 RNA processing에 관여하는 RNA 결합단백질인 SLM-2는 KIF5s의 C-말단과 결합하며, 또한 SLM-2의 C-말단은 KIF5s와 결합하는데 필수영역이였다. 이러한 단백질간의 결합은 Glutathione S-transferase (GST) pull-down assay를 통하여 SAM68, SLM-1, SLM-2은 특이적으로 Kinesin-I과 결합함을 확인하였으며, SAM68의 항체로 면역침강한 결과 KIF5s와 mRNA는 같이 침강하였다. 신경 세포의 말단에는 돌기형성에 필요한 단백질들의 주형인 mRNA가 다수 존재하며, 이러한 mRNA는 세포의 중앙에서 세포의 말단쪽으로 이동하여야 하는데, 이번 연구 결과는 Kinesin-I이 특이적으로 mRNA을 운반할 것으로 예상된다.

Functions of PUF Family RNA-Binding Proteins in Aspergillus nidulans

  • Son, Sung-Hun;Jang, Seo-Yeong;Park, Hee-Soo
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제31권5호
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    • pp.676-685
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    • 2021
  • RNA-binding proteins are involved in RNA metabolism and posttranscriptional regulation of various fundamental biological processes. The PUF family of RNA-binding proteins is highly conserved in eukaryotes, and its members regulate gene expression, mitochondrial biogenesis, and RNA processing. However, their biological functions in Aspergillus species remain mostly unknown in filamentous fungi. Here we have characterized the puf genes in the model organism Aspergillus nidulans. We generated deletion mutant strains for the five putative puf genes present in the A. nidulans genome and investigated their developmental phenotypes. Deletion of pufA or pufE affected fungal growth and asexual development. pufA mutants exhibited decreased production of asexual spores and reduced mRNA expression of genes regulating asexual development. The pufE deletion reduced colony growth, increased formation of asexual spores, and delayed production of sexual fruiting bodies. In addition, the absence of pufE reduced both sterigmatocystin production and the mRNA levels of genes in the sterigmatocystin cluster. Finally, pufE deletion mutants showed reduced trehalose production and lower resistance to thermal stress. Overall, these results demonstrate that PufA and PufE play roles in the development and sterigmatocystin metabolism in A. nidulans.

siMacro: A Fast and Easy Data Processing Tool for Cell-Based Genomewide siRNA Screens

  • Singh, Nitin Kumar;Seo, Bo Yeun;Vidyasagar, Mathukumalli;White, Michael A.;Kim, Hyun Seok
    • Genomics & Informatics
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    • 제11권1호
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    • pp.55-57
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    • 2013
  • Growing numbers of studies employ cell line-based systematic short interfering RNA (siRNA) screens to study gene functions and to identify drug targets. As multiple sources of variations that are unique to siRNA screens exist, there is a growing demand for a computational tool that generates normalized values and standardized scores. However, only a few tools have been available so far with limited usability. Here, we present siMacro, a fast and easy-to-use Microsoft Office Excel-based tool with a graphic user interface, designed to process single-condition or two-condition synthetic screen datasets. siMacro normalizes position and batch effects, censors outlier samples, and calculates Z-scores and robust Z-scores, with a spreadsheet output of >120,000 samples in under 1 minute.

TRAPR: R Package for Statistical Analysis and Visualization of RNA-Seq Data

  • Lim, Jae Hyun;Lee, Soo Youn;Kim, Ju Han
    • Genomics & Informatics
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    • 제15권1호
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    • pp.51-53
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    • 2017
  • High-throughput transcriptome sequencing, also known as RNA sequencing (RNA-Seq), is a standard technology for measuring gene expression with unprecedented accuracy. Numerous bioconductor packages have been developed for the statistical analysis of RNA-Seq data. However, these tools focus on specific aspects of the data analysis pipeline, and are difficult to appropriately integrate with one another due to their disparate data structures and processing methods. They also lack visualization methods to confirm the integrity of the data and the process. In this paper, we propose an R-based RNA-Seq analysis pipeline called TRAPR, an integrated tool that facilitates the statistical analysis and visualization of RNA-Seq expression data. TRAPR provides various functions for data management, the filtering of low-quality data, normalization, transformation, statistical analysis, data visualization, and result visualization that allow researchers to build customized analysis pipelines.

THOC5의 분열효모 이종상동체가 생장 및 mRNA export에 미치는 영향 (Effects of fission yeast ortholog of THOC5 on growth and mRNA export in fission yeast)

  • 고은진;윤진호
    • 미생물학회지
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    • 제51권4호
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    • pp.435-439
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    • 2015
  • THO/TREX 복합체는 전사 신장, mRNA 가공 및 방출, 그리고 유전체 안정성에 중요한 역할을 담당한다. 분열효모 Schizosaccharomyces pombe에서 THO/TREX 복합체의 한 구성요소인 THOC5의 이종상동체를 암호화하고 있는 SPBC 577.04 유전자를 찾아, 그것의 기능을 분석하였다. S. pombe thoc5 (spthoc5) 유전자는 생장과 mRNA의 방출에 필수적이지는 않지만, 결실돌연변이는 야생형에 비해 생장 결함을 보였고 $poly(A)^+$ RNA도 핵 안에 약간 축적되는 현상을 보였다. 또한 정상적인 기능을 가진 spThoc5-GFP 단백질은 주로 핵안에 존재하였다. Co-immunoprecipitation 분석에서 진화적으로 잘 보존된THO/TREX 복합체의 주요 구성인자인 Hpr1(THOC1)는 또 다른 구성인자인 Tho2 (THOC2) 뿐만 아니라 spThoc5와도 상호작용을 하였다. 이와 같은 결과들은 S. pombe의 Thoc5 상동체도 THO/TREX 복합체의 구성인자로 mRNA 방출에 관여하고 있음을 시사한다.

미세호기성 조건에서 Escherichia coli 에놀라아제의 발현에 있어서 RNase G의 역할에 대한 연구 (Studies on the Functional Role of RNase G in the Regulation of Escherichia coli Enolase Expression Under Microaerobic Conditions)

  • 심세훈;김용학;심민지;임보람;이강석
    • 미생물학회지
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    • 제46권3호
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    • pp.229-232
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    • 2010
  • 에놀라아제는 대부분의 생명체에서 에너지 대사에 중추적인 기능을 하는 해당과정에 관여하는 효소이며, Escherichia coli에서 RNA 가공 및 분해에 중심적인 역할을 하는 RNase E와 PNPase, Helicase와 함께 RNA 분해 복합체를 형성한다고 알려져 있다. E. coli에서 에놀라아제의 mRNA는 RNase E의 동족체인 RNase G에 의해 잘려서 분해되어 조절 된다고 알려져있다. 산소가 없는 환경에서 과발현되는 것으로 알려진 에놀라아제의 발현에 있어서 RNase G의 역할을 알아보기 위하여, 연구를 수행한 결과, 미세호기성 조건에서는 에놀라아제와 RNase G의 발현양 사이에는 상관관계가 밝혀내었다. 이러한 연구결과는 미세호기성 조건에서는 RNase G 이외에 에놀라아제의 조절에 기여하는 다른 기작이 있을 수 있다는 것을 시사한다.

식물의 긴비암호화 RNA들의 생물학적 기능 (The Biological Functions of Plant Long Noncoding RNAs)

  • 김지혜;허재복
    • 생명과학회지
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    • 제26권9호
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    • pp.1097-1104
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    • 2016
  • 차세대 염기서열 분석기술의 발달로 대량의 전사수준의 단위체들이 발견되었는데, 이것들 중 대부분의 전사체들은 비암호화 RNA들이다. 이들 중 긴 비암호화 RNA (lncRNA)들은 200개 이상의 뉴클레오티드를 가지며 단백질로 번역이 되지 않는 기능적 RNA 분자들이다. 식물의 lncRNA들은 RNA Pol II, Pol III, Pol IV, Pol V에 의해 전사체가 만들어지고, 전사 후 이들 lncRNA들은 추가적인 splicing과 polyadenylation 과정이 일어난다. 식물의 lncRNA들은 그 발현수준이 매우 낮고, 조직 특이적으로 발현 되지만, 이들 lncRNA들은 외부자극에 의해 강한 발현이 유도된다. 환경스트레스를 포함한 각기 다른 외부자극에 의해 많은 식물 lncRNA들의 발현이 유도되었기 때문에 이들 lncRNA들은 식물의 다양한 생물학적 기능과 식물의 생장발달 과정에 있어 새로운 조절 인자로 고려되고 있다. 특히 후성유전학적인 유전자 억제, 크로마틴 변형, 타겟모방, 광형태형성, 단백질 재배치, 환경스트레스 반응, 병원균 감염등에 관련하여 기능을 한다. 또한 어떤 lncRNA들은 short RNA들의 전구체로 역할도 한다. 최근 식물에서 많은 lncRNA들이 분리 동정되었지만, 이들 lncRNA들의 생리학적인 기능에 대한 현재의 이해는 여전히 제한적이고, 이들의 세부적인 조절 메커니즘 연구는 지속적으로 이루어져야 할 것이다. 이 총설에서는 식물 lncRNA들의 생합성 및 조절 메커니즘과 현재까지 밝혀진 분자수준에서의 중요한 기능들을 요약 정리하였다.

Induction of ER-stress by Heat Shock in the Thyrocytes

  • ;;양영모
    • 대한의생명과학회지
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    • 제12권4호
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    • pp.435-438
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    • 2006
  • In eukaryotes, ER stress induces UPR (unfolded protein response) via IRE1 activation which sends a molecular signal for XBP1 mRNA splicing in the cytosol. During this mRNA splicing, 23 nt removed in which contains PstI site and then resulting XBP1 product is not digested with PstI restriction enzyme. In this study, using this XBP1 mRNA splicing mechanism, the effect of heat shock on thyrocytes is studied, because heat shock response in the thyrocytes needs more study to understand thyroid physiology under alternative environments. ER inducible drugs (tunicamycin, DTT, $Ca^{2+}$ ionopore A23187, BFA) induce ER stress in the thyrocytes. From 3 hours after heat shock, ER stress is induced and which is reversible when heat shock is without. While $Ca^{2+}$ ionopore A23187 is reversible from ER stress by washing out the drug, thapsigagin is irreversible. Other ER inducible drugs are not so sensitive to ER stress repairing. XBP1 mRNA splicing in a cell is very available method to detect ER stress. It needs only a small quantity of total RNA and processing also very easy.

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