Khan, Raham Sher;Sjahril, Rinaldi;Nakamura, Ikuo;Mii, Masahiro
Plant Biotechnology Reports
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제2권1호
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pp.13-20
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2008
Potato (Solanum tuberosum L.), one of the most important food crops, is susceptible to a number of devastating fungal pathogens in addition to bacterial and other pathogens. Producing disease-resistant cultivars has been an effective and useful strategy to combat the attack of pathogens. Potato was transformed with Agrobacterium tumefaciens strain EHA101 harboring chitinase, (ChiC) isolated from Streptomyces griseus strain HUT 6037 and bialaphos resistance (bar) genes in a binary plasmid vector, pEKH1. Polymerase chain reaction (PCR) analysis revealed that the ChiC and bar genes are integrated into the genome of transgenic plants. Different insertion sites of the transgenes (one to six sites for ChiC and three to seven for bar) were indicated by Southern blot analysis of genomic DNA from the transgenic plants. Expression of the ChiC gene at the messenger RNA (mRNA) level was confirmed by Northern blot analysis and that of the bar gene by herbicide resistance assay. The results obviously confirmed that the ChiC and bar genes are successfully integrated and expressed into the genome, resulting in the production of bialaphos-resistant transgenic plants. Disease-resistance assay of the in vitro and greenhouse-grown transgenic plants demonstrated enhanced resistance against the fungal pathogen Alternaria solani (causal agent of early blight).
Objectives: Bok, Bcl-2-related ovarian killer, is a proapoptotic Bcl-2 family protein identified in the ovary based on its dimerization with the antiapoptotic protein Mcl-1. The present study examined the hormonal regulation and localization of Bok messenger RNA levels in the mouse ovary during the follicle development. Methods: The animals were implanted subcutaneously with Silastic brand capsules containing the synthetic estrogen, DES at $21{\sim}23$ days of age. Ovaries were collected $1{\sim}3$ days after implantation for RNA analysis and in situ hybridization. Some mice were removed capsule for $1{\sim}2$ days to induce ovarian follicle apoptosis. Ovaries were also collected from 26 day-old immature mice at various times after treatment with 10 IU PMSG. Some mice received a single intraperitoneal injection of 10 IU hCG to induce ovulation, and ovaries were obtained at different time intervals for Northern blot and in situ hybridization analysis, respectively. Results: Treatment of immature mice with diethylstilbestrol (DES) for $24{\sim}48$ h increased ovarian Bok mRNA levels. Bok mRNA was remained the same levels in mice removed DES for $24{\sim}48$ h to induce apoptosis. High signals of Bok mRNA after DES treatment were detected in granulosa cells of early antral follicles. Treatment of immature mice with PMSG for 12 h increased markedly ovarian Bok mRNA expression which was detected mainly in preantral and atretic follicles. Interestingly, low levels of Bok mRNA were also expressed in granulosa cells of preovulatory follicles. Treatment of PMSGprimed mice with hCG stimulated strongly ovarian Bok mRNA expression at $6{\sim}9$ h. At that time, Bok mRNA was expressed in granulosa cells of atretic and small growing follicles. Conclusion: These results demonstrate that Bok is one of proapoptotic Bcl-2 members expressed in early growing and atretic follicles during the ovarian follicular development. Gonadotropins induce a transient increase of Bok gene expression in granulosa cells of preantral and preovulatory follicles indicating some role in the ovulatory process.
Objective : We aimed to identify the dose-dependent inhibitory effects of Sabaek-san(瀉白散) and Sabaeksan plus Sasam(Adenophorae Radix) 瀉白散加沙蔘) on the mRNA expressions of Interleukin(IL)-6, IL-8 and granulocyte macrophage colony stimulating factor(GM-CSF) involved in the asthma model. Materials and Methods : Through this study, BEAS-2B cell lines, human epithelial cells were used. These cells were stimulated by tumor necrosis factor(TNF)-${\alpha}$, IL-1${\beta}$ and histamine for artificial inflammatory expression. ${\beta}$-action messenger RNA(mRNA) was used for standards. After each 24hours of Sabaeksan and Sabaeksan plus Sasam treatment, total cellular RNAs were collected by treating RNA zol directly on living cells, Then the transcriptional activities of IL-6, 8 and GM-CSF were measured by RT-PCR with electrophoresis, Results : The mRNA expressions of IL-6 are significantly inhibited compared to those of controlled group at 40 and 100ug/ml of Sabaeksan extract and $100{\mu}g/ml$ of Sabaeksan plus Sasam extract (p<0.05). The mRNA expressions of IL-8 are significantly inhibited compared to that of controlled group at 2.40 and 100 ug/ml of Sabaeksan extract and $40.100{\mu}g/ml$ of Sabaeksan plus Sasam extract(p<0.05) THe mRNA expressions of GM-CSF are significantly inhibited compared to those of the controlled group at $100{\mu}g/ml$ of Sabaeksan extract adn $40.100{\mu}g/ml$ of Sabaeksan plus Sasam extract.(p<0.05) Conclusions : This study shows that Sabaeksan and Sabaeksan plus Sasam have dose-dependent inhibitory effects on the mRNA expressions of IL-6, IL-8 and GM-CSF in human epithelial cells. Therefore, these types of herb medicine may inhibit the inflammatory process of asthma. Advanced studies are required to investigate the mechanisms of inhibition by herb medicine in the asthma model.
LOX는 결합조직의 세포외기질에 존재하여 교원섬유와 탄성섬유의 교차결합을 촉진시키는 핵심적인 효소이다. 뼈세포에서 세포분화 및 세포이동과 관련된 LOX의 역할은 보고되었으나, 상아모세포 분화에서 LOX에 대한 직접적인 효과는 거의 알려지지 않았다. 이 연구에서는 인간치수세포에서 상아모세의 분화과정 동안 LOX의 역할에 대해 실험하였다. 치수세포에 저 혈청 분화유도 배지를 처리하여 0, 1, 3, 7, 14일 동안 배양하였다. 세포성장은 세포계수, 분화와 관련된 유전자들은 RT-PCR, 광물화는 alrizarin red S 염색으로 각각 실험하였다. LOX 유전자 발현은 RT-PCR로 측정하였고, LOX 효소활성은 고감도 형광분석을 시행하였다. 1. 세포성장은 저 혈청 분화유도 배지에서 시간 의존적으로 증가하였다. 2. 분화표지자인 ALP, OPN, OCN, DMP1, DSPP는 시간 의존적으로 발현되었으나 초기, 중기, 말기에 대한 차별화는 이루어지지 않았다. 3. 광물화는 3일부터 관찰되기 시작하여 14일까지 증가되었다. 4. LOX와 LOXL은 mRNA 발현이 7일까지 증가되었고, 14일에서 큰 감소를 보였다. 하지만, LOXL3와 LOXL4 mRNA는 낮은 발현을 보였고, LOXL2 mRNA는 발현되지않았다. 5. Collagen type I mRNA는 7일까지 증가하다가 14일에서 의미있게 감소를 보였고, collagen type IV는 낮은 mRNA 발현을 보였다. 6. LOX 효소 활성은 분화유도기간 중 7일에서 가장 많은 발현을 보였고, 교원질 1형 기질이 교원질 IV형 기질보다 두드러진 발현을 보였다. 이상의 결과를 종합해 볼 때, LOX isoform의 발현과 LOX 효소 활성은 인간치수세포에서 상아모세포 분화과정 동안 중요한 조절자로 사료된다.
Objectives : We aimed to identify the dose-dependent inhibitory effects of Cheonsagunja-tang(喘四君子湯), leech(Hirudo medicinalis/水蛭) roasted with Ephedrae Herba(麻黃) on the mRNA expression of IL-6, IL-16, GM-CSF involved in the asthma model. Methods : In the study BEAS-2B cell lines, human epithelial cells were used. These cells were stimulated with tumor necrosis factor(TNF)-${\alpha}$ for artificial inflammatory expression. ${\beta}$-actin messenger RNA(mRNA) was used by internal standard. After 24 hours of the Cheonsagunja-tang, leech-treatment, total cellular RNAs were collected treating RNA zol directly on the living cells. Then the transcriptional activities of IL-6, 16 and GM-CSF were measured by RT-PCR with electrophoresis. Results: In the Cheonsagunja-tang study, the mRNA expression of IL-6 showed 30% transcriptional inhibitory effect compared to the control group in the $100{\mu}l/ml$ category(p<0.005). In the IL-16, there was 26%, 31% and 31% transcriptional inhibitory effect compared to the control groups in the $4{\mu}l/ml$, $20{\mu}l/ml$ and $100{\mu}l/ml$ categories, respectively(p<0.05). In the GM-CSF, the experimental group had 56% transcriptional inhibitory effect compared to the control group in the $100{\mu}l/ml$ category(p<0.001). In other concentrations, there was no inhibitory effect. In the leech study, the mRNA expression of IL-6 showed 37% transcriptional inhibitory effect compared to the control group in the $100{\mu}l/ml$ category(p<0.001). In the IL-16, there was 63% and 67% transcriptional inhibitory effect compared to the control groups in the $20{\mu}/ml$ and $100{\mu}/ml$ categories, respectively(p<0.001). In the GM-CSF, there was 64% and 68% transcriptional inhibitory effect compared to the control groups in the $20{\mu}l/ml$ and $100{\mu}l/ml$ categories, respectively(p<0.001). In other concentrations, there was no inhibitory effect. Conclusions : This study shows that Cheonsagunja-tang and leech roasted with Ephedrae Herba have dose-dependent inhibitory effects on the mRNA expression of IL-6, IL-16 and GM-CSF in BEAS-2B cell lines, human epithelial cells.
방사선에 대한 방호와 면역기능 조절을 목적으로 새로운 생약복합조성물인 HemoHIM을 개발하였다. 식품 원료로 사용 가능한 생약재 3종 당귀, 천궁, 백작약의 에탄올 분획을 열수추출물에 첨가하여 HemoHIM을 제조하였다. HemoHIM의 항알레르기 효과를 검증하기 위하여 사람 비만세포주 HMC-1을 사용해 compound 48/80으로 유도되는 히스타민 분비량과 PMA/A23187로 유도되는 염증성 사이토카인의 분비량을 측정하였다. 히스타민의 양은 형광분석법으로, 염증성 사이토카인 IL-6, IL-8, TNF-$\alpha$, GM-CSF의 양은 효소결합 면역측정법으로 측정하였다. 저농도의 HemoHIM에 의해 히스타민 분비량이 억제되었고, 모든 농도에서 IL-6, TNF-$\alpha$, GM-CSF의 분비량은 억제되었지만 IL-8은 고농도에서만 억제되었다. 사이토카인의 mRNA 발현량은 HemoHIM의 농도 의존적으로 억제되었다. 그리고 c-kit와 Fc$\varepsilon$RI의 mRNA 발현량도 모든 농도에서 억제되었지만, tryptase의 mRNA 발현량은 저 농도에서만 억제되었다. 이상의 결과로 HemoHIM이 비만세포의 활성을 억제하는 효과가 있다는 것을 알 수 있었으며, 상대적으로 독성이 적은 항알레르기 제재로 개발할 가능성을 제시한 것으로 생각된다.
A chicken H2B histone gene was cloned and expressed in Rat 3 cell line. Its messenger RNA level was about 10 times higher during S phase than during $G_1$ phase. A chimeric chicken-yeast-chicken H2B histone gene was made to change some of wobble sequences of chicken H2B gene. When the chimeric H2B gene was transfected into the Rat 3 cell line, it showed a pattern of expression similar to that of the original chicken H2B gene. At least in this gene, it was concluded that the wobble sequences were not required for the cell-cycle regulated pattern of expression.
In order to screen ionizing radiation induced early-response genes, we employed subtractive hybridization method and isolated a metabolism associated gene. The gene expression was very sensitive to ionizing radiation as revealed by a rapid induction of its messenger RNA. We characterized the function of this gene in radiation response. This gene activated p53 and enhanced cell killing effect of ionizing radiation. This effect was attributable to p53 phosphorylation and transcriptional activation.
The emergence of vaccines for coronavirus disease 2019 (COVID-19) raises risk of possible adverse events from interaction between the vaccines and facial aesthetic care. A 47-year-old female with no medical comorbidities visited our emergency room due to midface painful swelling after 3 hours following receiving the second dose of the messenger RNA BNT162b2 COVID-19 vaccine. About 14 years ago, she underwent nonsurgical augmentation on the nasojugal groove with a calcium hydroxylapatite dermal filler. We performed incision and drainage under general anesthesia on the next day. During operation, yellowish pus-like materials bulged out. After an operation, we performed a combination therapy with antibiotics and methylprednisolone. Her symptoms improved day by day after surgery, and then a complete recovery was achieved at 3 weeks after the treatment. In conclusion, providers of aesthetic procedures are to be aware of the potential risks of such vaccines for patients who already had or seek to receive dermal filler injections.
Do Young Kim;Hyung Eun Yim;Min Hwa Son;Kee Hwan Yoo
Childhood Kidney Diseases
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제26권2호
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pp.91-96
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2022
The messenger RNA-based vaccine for the coronavirus disease 2019 (COVID-19) may induce glomerulonephritis, including immunoglobulin A nephropathy (IgAN). New-onset IgAN triggered by vaccination against COVID-19 has been reported rarely, especially in children. Herein, we report a pediatric case of newly diagnosed IgAN after administration of the Pfizer vaccine for COVID-19. A 12-year-old girl was referred to our hospital for evaluation of gross hematuria after inoculation with the second dose of Pfizer's COVID-19 vaccine; she had no adverse effects after the first dose. At the time of admission, she showed heavy proteinuria and persistent hematuria. Kidney biopsy revealed an IgAN, and she was treated with an oral steroid and an angiotensin-converting enzyme inhibitor. Four months after discharge, the proteinuria and hematuria resolved completely.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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