Objectives : The purpose of this study was to investigate the effects of Angelicae acutilobae Radix Water Extract (AA) on the production of cytokines in RAW 264.7 cell stimulated with lipopolysaccharide (LPS). Method : RAW 264.7 cells were cotreated with AA (50 and $100{\mu}g/mL$) and lipopolysaccharide (LPS; $1{\mu}g/mL$) for 24 hours. After 24 hours treatment, using bead-based multiplex cytokine assay, concentrations of various cytokines such as interleukin(IL)-6, tumor necrosis factor-alpha(TNF-${\alpha}$) granulocyte colony-stimulating factor(G-CSF), granulocyte macrophage colony-stimulating factor(GM-CSF), and macrophage inflammatory protein(MIP)-$1{\alpha}$ were measured. Result : AA significantly inhibited LPS-induced production of IL-6 and MIP-$1{\alpha}$ from LPS-stimulated RAW 264.7 cells at the concentration of $50{\mu}g/mL$. AA significantly inhibited LPS-induced production of TNF-${\alpha}$ from LPS-stimulated RAW 264.7 cells at the concentration of $100{\mu}g/mL$. AA significantly inhibited LPS-induced production of G-CSF and GM-CSF in RAW 264.7 cells at the concentrations of 50 and $100{\mu}g/mL$. Conclusion : These results suggest that AA has anti-inflammatory effect related with its inhibition of proinflammatory cytokines such as IL-6, TNF-${\alpha}$, G-CSF, GM-CSF, and MIP-$1{\alpha}$ in LPS-induced macrophages.
Cerarmide acts as a lipid second messenger in the cellular signal transduction and is involved in mediating a variety of cell functions such as proliferation, differentiation, growth arrest, and apoptosis. In the present study, we have investigated the effect of ceramide on cellular cytotoxity and reactive oxygen species (ROS) to understand the relationship between them. Ceramide treatment significantly increased cell death in RAW 264.7 murine macrophages activated with lipopolysaccharide (LPS) and interferon-g (IFN-g). (omitted)
Abies nephrolepis(Pinaceae) extracts were tested for determined immune system regulating activity based on antiinflammatory activity, antioxidant activity and anti-proliferative effect on HeLa cell line. The A. nephrolepis extracts increased dose-dependently anti-proliferation of HeLa cell line. The DM fraction of the extracts having anti-proliferatative effects of HeLa cell line was fractionalized four subfractions($D1{\sim}D4$). Inflammation-induced NO production was inhibited by D2 and D4 in LPS-activated RAW264.7 macrophages. And also, this fractions showed antioxidant activity examined by DPPH radical scavenging effects. These results suggest that the potential use of DM fraction of A. nephrolepis in chemoprevention and regulation overproduction of NO on pathogenic conditions. The mechanism of the inflammatory effects, however, must be evaluated through various parameters in the induction cascade of NO production.
The Journal of Korean Medicine Ophthalmology and Otolaryngology and Dermatology
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v.20
no.1
s.32
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pp.1-15
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2007
Objectives : RVC has long been used for a useful natural agent ameliorating inflammation related symptoms in the folk medicine recipe. This study was performed to investigate effects of RVC on the inflammation and oxidation in RAW 264.7 cells. Methods : The RVC was extracted with 80% ethanol and sequentially partitioned with solvents in order to increase polarity. With the various fractions, we determined the activities on the inflammation and oxidation in RAW 264.7 cells. Results : 1. Among the various solvent extracts of RVC, the butanol fraction showed the most powerful inhibitory ability against nitric oxide (NO) production in lipopolysaccharide (LPS)-induced RAW 264.7 cells without affecting cell viability. 2. Butanol fraction showed a oxidation inhibition effect by decreasing the DPPH and OH radicals. 3. Butanol fraction exhibited the inhibitory avilities against iNOS and COX-2. 4. Reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) and Westem blotting analysis revealed that the BuOH fraction provided a primary inhibitor of the iNOS protein and mRNA expression in LPS-induced RAW 264.7 cells. Among the up-regulater molecules of iNOS and COX-2, the BuOh fraction of RVC was shown the inhibitory activity of phoshporylation of c-Jun N-terminal kinase (JNK) 1/2 and threonine protein kinase (AKT), the one of the MAPKs pathway. Conclusion : Thus, the present study suggests that the response of a component of the BuOH fraction to NO generation via iNOS expression provide a important clue to elucidate anti-inflammatory and anti-oxidation mechanism of RVC.
Lee, Ye Eun;Park, Hong Jin;Park, Chung-berm;Hwang, Seung-mi
Korean Journal of Food Science and Technology
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v.53
no.2
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pp.115-120
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2021
Scutellaria baicalensis has been used as a traditional medicine for diarrhea, dysentery, hypertension, hemorrhaging, insomnia, inflammation, and respiratory infections. This study examined the anti-inflammatory effect of Scutellaria baicalensis water extract (SWE) in lipopolysaccharide (LPS)-induced RAW 264.7 cells. To evaluate the anti-inflammatory effect of SWE, RAW 264.7 macrophages were stimulated with LPS to induce the production of inflammation-related factors, which were measured by western blotting. In RAW 264.7 cells, SWE inhibited the production of nitric oxide (NO) without causing cell toxicity. SWE also reduced the expression of inducible NO synthase and cyclooxygenase-2 protein, as well as the production of pro-inflammatory cytokines (such as tumor necrosis factor-α). The phosphorylation levels of the mitogen-activated protein kinase family members, such as JNK and p38, were also reduced by SWE. Thus, SWE could be used as a potential anti-inflammatory agent.
Objectives : This research aimed at studying the immuno modulating activity of Fermented Epimedii Herba (EHS). Method : The impacts on the cell viability, hydrogen peroxide and nitric oxide (NO) generation in cells, and cytokines such as tumor necrosis factor-alpha (TNF-${\alpha}$), interleukin (IL)-6, IL-$1{\beta}$, monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1) level have been measured by using Raw 264.7 cells with the specimen EHS as the fermented extract of Epimedii Herba with Saccharomyces cerevisiae STV89. Result : As a result of MTT assay to confirm the cytotoxicity of extracts from fermented Epimedii Herba, the toxicity was not excessively induced in Raw 264.7 cells when EHS were processed by concentration. EHS increased hydrogen peroxide generation in Raw 264.7 cells. EHS suppressed NO generation in Raw 264.7 cells while they significantly suppressed the increase of NO generation induced by LPS in macrophage. EHS significantly decreased the generation amount of TNF-${\alpha}$ and IL-6 induced by LPS in Raw 264.7 cells at $25{\mu}g/mL$ or more. Conclusion : It appeared that the fermented extract of Epimedii Herba manufactured from Epimedii Herba significantly has the immuno modulating acitivity as it did not excessively trigger cytotoxicity to Raw 264.7 cells, increased hydrogen peroxide generation in Raw 264.7 cells, decreased NO generation in macrophage, and especially, suppressed both TNF-${\alpha}$ and IL-6 generation in macrophage induced by LPS.
Seo, Min-gyu;Kang, Yun-Mi;Chung, Kyung-Sook;Cheon, Se-Yun;Park, Jong Hyuk;Lee, Young-Cheol;An, Hyo-Jin
The Korea Journal of Herbology
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v.32
no.2
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pp.17-24
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2017
Objective : This study was designed to evaluate candidate materials as anti-inflammation agent from extracts of various Korean Compositae herbs in Hwaak mountain. Among Korea medicinal herbs, Ainsliaea acerifolia (AA) belongs to the Compositae family, has been used for the treatment of rheumatic arthritis. However, AA has not been previously reported to have an anti-inflammatory effect. Therefore, we investigated the anti-inflammatory effects of AA and its underlying molecular mechanisms in lipopolysaccharide (LPS)-induced RAW 264.7 macrophages. Methods : Cell viability was determined by 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay in RAW 264.7 macrophages. Nitric oxide (NO) was measured with Griess reagent and pro-inflammatory cytokines were detected by enzyme immunoassay (EIA) kits in LPS-stimulated RAW 264.7 macrophages. Protein expressions of inducible nitric oxide synthase, and cyclooxygenase-2 (COX-2) and p65 subunit of nuclear $factor-{\kappa}B$ ($NF-{\kappa}B$) were determined by Western blot analysis. Results : Among 8 extracts of Korean Compositae herbs tested, AA showed the inhibition of NO production without cytotoxicity. Consistent with the observation, AA reduced the expression levels of iNOS and COX-2 proteins in LPS-simulated RAW 264.7 macrophages in dose-dependent manner. In addition, AA inhibited the productions of $TNF-{\alpha}$ and IL-6 in LPS-simulated RAW 264.7 macrophages. However, AA did not inhibit activation of p65 $NF-{\kappa}B$ in LPS-simulated RAW 264.7 macrophages. Conclusion : These results suggest that down-regulation of iNOS, COX-2 protein expression and $TNF-{\alpha}$ and IL-6 production by AA are responsible for its anti-inflammatory effects.
Objectives : This study aimed to elucidate antioxidant activity of chrysin in polyinosinic-polycytidylic acid (poly-IC) and lipoteichoic acid-induced RAW 264.7 mouse macrophages. Methods : RAW 264.7 co-stimulated with poly-IC and lipoteichoic acid were incubated with chrysin at concentrations of 25 and 50 µM. Hydrogen peroxide production was measured with dihydrorhodamine 123 assay. Nitric Oxide (NO) production was evaluated by griess reagent assay. Results : For 16 h, 18 h, 20 h, 22 h, and 24 h incubation, chrysin at the concentration of 25 and 50 µM significantly suppressed hydrogen peroxide production in poly-IC and lipoteichoic acid-induced RAW 264.7. In details, production of hydrogen peroxide in 'poly-IC and lipoteichoic acid'-stimulated RAW 264.7 treated for 16 h with chrysin at concentrations of 25 and 50 µM was 83.84% and 79.3% of the control group treated with poly-IC and lipoteichoic acid only, respectively; the production of hydrogen peroxide for 18 h was 84.36% and 79.93%, respectively; production of hydrogen peroxide for 20 h was 85.68% and 80.22%, respectively; production of hydrogen peroxide for 22 h was 85.81% and 79.95%, respectively; production of hydrogen peroxide for 24 h was 86.01% and 80.18%, respectively. Additionally, chrysin at the concentration of 5, 10, 25, and 50 µM significantly inhibited NO production in THP-1 human monocytic cell line. Conclusions : Chrysin might have anti-oxidative activity related to its inhibition of hydrogen peroxide production in 'poly-IC and lipoteichoic acid'-stimulated RAW 264.7.
Lee, Yuan Yee;Saba, Evelyn;Kim, Minki;Rhee, Man Hee;Kim, Hyun-Kyoung
Biomedical Science Letters
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v.24
no.3
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pp.196-205
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2018
Reactive oxygen species (ROS) generated from metabolic reactions cause oxidative DNA damage, which results in oxidative tissue injury. Therefore, there is an increasing demand in the intake of high antioxidant sources in order to maintain a healthy environment in cells. In this study, we investigated the antioxidant and anti-inflammatory activities of Malus domestica (apple), Pyrus communis L. (pear), Daucus carota L. (carrot), Brassica oleracea var. (broccoli), Brassica oleracea var. capitata (cabbage), and Raphanus sativus L. (radish) obtained from the local market. Since these are common fruits and vegetables that are widely consumed, we aimed to investigate their beneficial properties, placing particular emphasis on their antioxidant and anti-inflammatory properties. The samples were processed via an indirect heating method and their properties were compared to their raw forms. Based on DPPH and ABTS assays, processed samples showed better antioxidant activities when compared to raw samples and processed pear samples exhibited the best antioxidant activity. The anti-inflammatory activities of the samples were also investigated in LPS-treated RAW 264.7 cells. mRNA expression of pro-inflammatory mediators and cytokines (iNOS, COX-2, $TNF-{\alpha}$, $IL-1{\beta}$, and IL-6) was assessed using RT-PCR. As expected, processed samples exhibited better iNOS inhibition when compared to their raw forms and processed broccoli and cabbage samples exhibited outstanding anti-inflammatory effects. The samples, up to 1 mg/mL concentration, did not exhibit cytotoxicity against RAW 264.7 cells as demonstrated by cell viability assays. Altogether, processed broccoli and cabbage samples exhibited the strongest anti-inflammatory properties.
Tak, Hyun-Min;Kang, Min-Jung;Kim, Kyoung Min;Kang, Dawon;Han, Sunkyu;Shin, Jung-Hye
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.43
no.10
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pp.1527-1534
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2014
In this study, we investigated the anti-inflammatory effects of Lactobacillus rhamnosus fermented black garlic (FBG) in lipopolysaccharide (LPS)-induced RAW 264.7 macrophages. FBG did not show cytotoxicity in RAW 264.7 cells at concentrations less than $800{\mu}g/mL$, and cell viability increased with FBG concentration. Nitric oxide (NO) and prostaglandin $E_2$ ($PGE_2$) production as well as tumor necrosis factor-${\alpha}$ (TNF-${\alpha}$), interleukin-$1{\beta}$ (IL-$1{\beta}$) and IL-6 formation decreased in an FBG concentration-dependent manner, in LPS-induced RAW 264.7 cells. Furthermore, activation of LPS-inducible nitric synthase (iNOS), cyclooxygenase-2 (COX-2), nuclear factor kappa B (NF-${\kappa}B$), and inhibitory kappa B ($I{\kappa}B$) protein expression was effectively inhibited by FBG treatment in LPS-induced RAW 264.7 cells. In contrast, heme oxygenase-1 (HO-1) protein expression significantly increased. These results indicate that the anti-inflammatory activity of FBG was due to activation of NF-${\kappa}B$, inhibition of cytokine production, and expression of iNOS and COX-2. From these results, we expect that FBG could contribute to the prevention and improvement of inflammatory disease.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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