Min, Hong Gi;Seong, Seung Hye;Jung, Sung Mun;Shin, Jin Woo;Gwak, Mi Jung;Leem, Jeong Gill;Lee, Cheong
The Korean Journal of Pain
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v.18
no.2
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pp.107-112
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2005
Background: Nerve ligation injury may produce mechanical allodynia, but this can be reversed after an intrathecal administration of adenosine analogues. In many animal and human studies, ATP-sensitive potassium channel blockers have been known to reverse the antinociceptive effect of various drugs. This study was performed to evaluate the mechanical antiallodynic effects of spinal R-PIA (Adenosine A1 receptor agonist) and the reversal of these effects due to pretreatment with glibenclamide (ATP-sensitive potassium channel blocker). Thus, the relationship between the antiallodynic effects of R-PIA and ATP-sensitive potassium channel were investigated in a neuropathic model. Methods: Male Sprague Dawley rats were prepared by tightly ligating the left lumbar 5th and 6th spinal nerves and implantation of a chronic lumbar intrathecal catheter for drug administration. The mechanical allodynia was measured by applying von Frey filaments ipsilateral to the lesioned hind paw. And the thresholds for paw withdrawal assessed. In study 1, either R-PIA (0.5, 1 and $2{\mu}g$) or saline were administered intrathecally for the examination of the antiallodynic effect of R-PIA. In study 2, glibenclamide (2, 5, 10 and 20 nM) was administered intrathecally 5 min prior to an R-PIA injection for investigation of the reversal of the antiallodynic effects of R-PIA. Results: The antiallodynic effect of R-PIA was produced in a dose dependent manner. In study 1, the paw withdrawal threshold was significantly increased with $2{\mu}g$ R-PIA (P < 0.05). In study 2, the paw withdrawal threshold with $2{\mu}g$ R-PIA was significantly decreased almost dose dependently by intrathecal pretreatment of 5, 10 and 20 nM glibenclamide (P < 0.05). Conclusions: These results demonstrated that an intrathecal injection of ATP-sensitive potassium channel blockers prior to an intrathecal injection of adenosine A1 receptors agonist had an antagonistic effect on R-PIA induced antiallodynia. The results suggest that the mechanism of mechanical antiallodynia, as induced by an intrathecal injection of R-PIA, may involve the ATP-sensitive potassium channel at both the spinal and supraspinal level in a rat nerve ligation injury model.
Rice blast, caused by the fungal pathogen Magnaporthe oryzae, is one of the most destructive diseases of rice worldwide. The rice - M. oryzae pathosystem has become a model in the study of plant - fungal interactions due to its economic importance and accumulating knowledge. During the evolutionary arms race with M. oryzae, rice plants evolved a repertoire of Resistance (R) genes to protect themselves from diseases in a gene-for-gene fashion. M. oryzae secretes a battery of small effector proteins to manipulate host functions for its successful infection, and some of them are recognized by host R proteins as avirulence effectors (AVR), which turns on strong immunity. Therefore, the analysis of interactions between AVRs and their cognate R proteins provide crucial insights into the molecular basis of plant - fungal interactions. Rice blast resistance genes Pik, Pia, Pii comprise pairs of protein-coding ORFs, Pik-1 and Pik-2, RGA4 and RGA5, Pii-1 and Pii-2, respectively. In all three cases, the paired genes are tightly linked and oriented to the opposite directions. In the AVR-Pik/Pik interaction, it has been unraveled that AVR-Pik binds to the N-terminal coiled-coil domain of Pik-1. RGA4 and RGA5 are necessary and sufficient to mediate Pia resistance and recognize the M. oryzae effectors AVR-Pia and AVR1-CO39. A domain at the C-terminus of RGA5 characterized by a heavy metal associated domain was identified as the AVR-binding domain of RGA5. Similarly, physical interactions among Pii-1, Pii-2 and AVR-Pii are being analyzed.
In Jun-Gyo;Lee Bum-Soo;Kim Eun-Jeong;Choi Kwan-Sam;Han Seung-Ho;Shin Cheol-Woo;Yang Deok-Chun
Korean Journal of Plant Resources
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v.19
no.1
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pp.161-168
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2006
To investigate the origin of backyeoncho (Opuntia ficus-indica var. saboten), we isolated 685 bp clone using ITS primer pairs. The rDNA consists of the genes coding for the partial 54 bp 185, 162 bp 5.8S, and partial 56 bp 26S. The coding regions are interrupted by two internal transcribed spacers, 193 bp ITS1 and 220 bp ITS2. The ITS2 of backnyeoncho in length was shorter than that previously registered in Cucurbitoideae plants. The GC contents was 66.8% in ITS1, and 67.7% in ITS2. The rDNA of backnyeoncho matched to the previously reported genes and showed a high similarity with the 95% identity with Pereskiopsis porteri (L708037). In the phylogenetic analysis, the backnyeoncho rDNA was clustered with Pereskiopsis porteri (L708037).
Adenosine receptors in rat adipose tissues have been reported to be of $A_{1}$ subclass, and their stimulation leads to inhibition of adenylyl cyclase, resulting in inhibition of lipolysis. In the present study we investigated changes in $A_{1}$ adenosine receptor-adenylyl cyclase system of adipocytes following induction of experimental diabetes in rats. One week following experimental diabetes were induced by intravenous injection of streptozotocin (50 mg/kg body wt.), adipocytes from rats $(170{\sim}230g)$ fed ad libitum were isolated using collagenase. When adipocytes were incubated for 1 h with 1 unit/ml adenosine deaminase and $1\;{\mu}M$ isoproterenol, and assayed for glycerol formation, it was found that the inhibition of lipolysis in diabetic adipocytes by $(-)-N^{6}-(R-phenylisopropyl)adenosine$ (PIA), an $A_{1}$, adenosine receptor agonist, was twice that of control adipocytes. In an effort to delineate the mechanism(s), $[^{3}H]PIA$ binding to adipocytic membranes from diabetic and control rats were determined. Neither the affinities nor numbers of $A_{1}$ adenosine receptor were significantly different from each other (Best fit parameters for the one-site model are: $K_{d}=0.51{\pm}0.09nM$ and $B_{max}=1.60{\pm}0.12\;pmoles/mg$ protein for control membranes; $K_{d}=0.54{\pm}0.21\;nM$ and $B_{max}=1.72{\pm}0.31\;pmoles/mg$ protein for diabetic membranes). However, the inhibiton by PIA of the isoproterenol-stimulated adenylyl cyclase activities was found to be 1.9 times higher in adipocytic membranes from diabetic rats than those from controls. These results suggest that the increased sensitivity of inhibition of lipolysis to PIA in adipocytic membranes from diabetic rats is due to changes in signal transduction pathways, rather than alterations of $A_{1}4 adenosine receptor molecules themselves.
Following the subcutaneous administration of $R(-)N^6-(2-phenylisopropyl)adenosine(600\;nmol/kg/hr)$ to rats for 1 week using t$Alzet^{\circledR}$ mini-osmotic pumps, $A_1$ adenosine receptor functions were determined using $[^3H]DPCPX$ binding, $[^{35}S]GTP_{\gamma}S$ binding, and adenylyl cyclase assays. $A_1$ adenosine receptor binding and the inhibition of adenylyl cyclase activity by PIA was not altered in cerebrocortical membranes prepared from PIA-treated rats. However, there was a significant decrease in the $A_1$ adenosine receptor-mediated stimulation of $[^{35}S]GTP_{\gamma}S$ binding to cerebrocortical membranes prepared from PIA-treated rats(22.0% decrease in basal activity; 19.7% decrease in maximal activity). These results suggest that the desensitization of $A_1$ adenosine receptors following chronic administration involves agonist-induced uncoupling of the receptors from G proteins rather than alteration of $A_1$ adenosine receptor molecules. It is also suggested that the determination of stimulation of $[^{35}S]GTP_{\gamma}S$ binding to G proteins is a suitable tool in studying the receptor regulation including desensitization
Kim, Jeong-Soon;Ahn, Sang-Nag;Hong, Sung-Jun;Kwon, Jin-Hyeuk;Kim, Yeong-Ki;Jee, Hyeong-Jin;Shim, Chang-Ki
KOREAN JOURNAL OF CROP SCIENCE
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v.56
no.4
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pp.329-341
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2011
The objective of this study was to determine the genetic diversities of major rice blast resistance genes among 84 accessions of aromatic rice germplasm. Eighty four accessions were characterized by a dominant 11 set of PCR-based SNP and CAPS marker, which showed the broad spectrum resistance and closest linkage to seven major rice blast resistance (R) genes, Pia, Pib, Pii, Pi5 (Pi3), Pita (Pita-2), and Pi9 (t). The allele specific PCR markers assay genotype of SCAR and STS markers was applied to estimate the presence or absence of PCR amplicons detected with a pair of PCR markers. One indica accession, Basmati (IT211194), showed the positive amplicons of five major rice blast resistance genes, Pia, Pi5 (Pi3), Pib, Pi-ta (Pi-ta2), and Pik-5 (Pish). Among 48 accessions of the PCR amplicons detected with yca72 marker, only five accessions were identified to Pia gene on chromosome 11. The Pib gene was estimated with the NSb marker and was detected in 65 of 84 accessions. This study showed that nine of 84 accessions contained the Pii gene and owned Pi5 (Pi3) in 42 of 84 accessions by JJ817 and JJ113-T markers, which is coclosest with Pii on chromosome 9. Only six accessions were detected two alleles of the Pita or Pita-2 genes. Three of accessions were identified as the Pi9 (t) gene locus.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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