• 제목/요약/키워드: Quantitative cultures

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Agrobacterium-mediated Transformation via Somatic Embryogenesis System in Korean fir (Abies koreana Wil.), A Korean Native Conifer

  • Lee, Hyoshin;Moon, Heung-Kyu;Park, So-Young
    • 한국자원식물학회지
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    • 제27권3호
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    • pp.242-248
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    • 2014
  • This study was conducted to establish an efficient transformation system by using somatic embryogenesis in an important Korean native conifer, Korean fir (Abies koreana). Embryogenic masses were induced from mature zygotic embryos of the Korean fir on Schenk and Hildebrandt medium, which was supplemented with thidiazuron. For genetic transformation, the embryogenic masses were co-cultivated with a disarmed Agrobacterium tumefaciens strain C58/pMP90 containing the plasmid vector pBIV10 or LBA4404 containing the plasmid vector MP90. Both vectors contain the kanamycin resistance and beta-glucuronidase (GUS) reporter genes. A total of 48 lines of embryogenic masses were selected on mLV medium containing $50{\mu}g/mL$ of kanamycin after 4 weeks of culture, following 3 days of co-cultivation with A. tumefaciens strain C58/pMP90 carrying pBIV10 (none of the lines was cultivated with strain LBA4404 carrying MP90). Quantitative real-time PCR was performed, and high levels of GUS transcripts were observed in the 48 putative transgenic lines; however, the control (non-transgenic line) showed negative results. Results of histochemical staining showed that the expression of the GUS reporter gene was observed in somatic embryos that developed from the embryogenic masses of all 48 lines. Stably transformed cultures were successfully produced by co-cultivation with A. tumefaciens strain C58/pMP90 carrying pBIV10 in Korean fir. Here, we have reported an Agrobacterium-mediated gene transfer protocol via somatic embryogenesis that may be helpful in developing breeding and conservation strategies for the Korean fir.

Direct reprogramming of fibroblasts into diverse lineage cells by DNA demethylation followed by differentiating cultures

  • Yang, Dong-Wook;Moon, Jung-Sun;Ko, Hyun-Mi;Shin, Yeo-Kyeong;Fukumoto, Satoshi;Kim, Sun-Hun;Kim, Min-Seok
    • The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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    • 제24권6호
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    • pp.463-472
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    • 2020
  • Direct reprogramming, also known as a trans-differentiation, is a technique to allow mature cells to be converted into other types of cells without inducing a pluripotent stage. It has been suggested as a major strategy to acquire the desired type of cells in cell-based therapies to repair damaged tissues. Studies related to switching the fate of cells through epigenetic modification have been progressing and they can bypass safety issues raised by the virus-based transfection methods. In this study, a protocol was established to directly convert fully differentiated fibroblasts into diverse mesenchymal-lineage cells, such as osteoblasts, adipocytes, chondrocytes, and ectodermal cells, including neurons, by means of DNA demethylation, immediately followed by culturing in various differentiating media. First, 24 h exposure of 5-azacytidine (5-aza-CN), a well-characterized DNA methyl transferase inhibitor, to NIH-3T3 murine fibroblast cells induced the expression of stem-cell markers, that is, increasing cell plasticity. Next, 5-aza-CN treated fibroblasts were cultured in osteogenic, adipogenic, chondrogenic, and neurogenic media with or without bone morphogenetic protein 2 for a designated period. Differentiation of each desired type of cell was verified by quantitative reverse transcriptase-polymerase chain reaction/western blot assays for appropriate marker expression and by various staining methods, such as alkaline phosphatase/alizarin red S/oil red O/alcian blue. These proposed procedures allowed easier acquisition of the desired cells without any transgenic modification, using direct reprogramming technology, and thus may help make it more available in the clinical fields of regenerative medicine.

한옥의 전통적 요소를 도입한 한국형 아파트 실내디자인의 표현 경향에 관한 연구 - 한국 브랜드 아파트에 적용된 사례를 중심으로 - (A Study on Interior Design Expressional Tendency of Korean style Apartments introducing Traditional Hanok Factors - Focusing on the Cases applied to Korean Brand-name Apartments -)

  • 임보라;최상헌
    • 한국실내디자인학회논문집
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    • 제25권3호
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    • pp.121-128
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    • 2016
  • Focusing on the cases applied to korean brand-name apartments In 1960s, economical growth and introduction of western-type cultures led to a boom of apartment construction. After internationalization'in 1980s through Olympic games in 1988, korean culture has attracted attention and individual life quality has been improved. Since 1990s, changes in personal life style has affected the housing culture and the construction companies started moving from quantitative supply to developing their own differential characteristics. Differentiation scheme triggered by construction companies since mid-1990s mainly focused on various ideas for space deployment. Space plans include such things as a private ground, a kitchen in the south, etc. while interior plans include to provide selection of the korean traditional style, natural or casual one. 'korean traditional style' apartment is one of such theme of the brand-named apartment. Interests on 'Tradition' can be broken down into a social trend and media trend. Firstly, the former includes the designation of Bukchon as a reserving area, one of the governmental 'Hanok Survival Program', and traditional building promotion scheme on the basis of construction policy plans. Secondly, the latter covers the interests which attract through the media showing oriental cosmetics, korean culture export via Hallyu, popularity of korean dramas, etc. Thus, it seems worth studying on the apartments with traditional factors. And also, this study aims to setup the concept and trends of korean traditional style apartments through the interior expression on the korean-factor space developed by brand-name apartments so that it could correct such false knowledge out of misunderstood concept of traditional space which results from simple decoration or structure type not accompanying Korean emotion or spirit rendered by some misleading media.

Determining Osteogenic Differentiation Efficacy of Pluripotent Stem Cells by Telomerase Activity

  • Zhang, Siqi;Sun, Yuhua;Sui, Yi;Li, Yan;Luo, Zuyuan;Xu, Xiao;Zhou, Ping;Wei, Shicheng
    • Tissue Engineering and Regenerative Medicine
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    • 제15권6호
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    • pp.751-760
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    • 2018
  • BACKGROUND: Bone tissue engineering based on pluripotent stem cells (PSCs) is a new approach to deal with bone defects. Protocols have been developed to generate osteoblasts from PSCs. However, the low efficiency of this process is still an important issue that needs to be resolved. Many studies have aimed to improve efficiency, but developing accurate methods to determine efficacy is also critical. Studies using pluripotency to estimate efficacy are rare. Telomerase is highly associated with pluripotency. METHODS: We have described a quantitative method to measure telomerase activity, telomeric repeat elongation assay based on quartz crystal microbalance (QCM). To investigate whether this method could be used to determine the efficiency of in vitro osteogenic differentiation based on pluripotency, we measured the pluripotency pattern of cultures through stemness gene expression, proliferation ability and telomerase activity, measured by QCM. RESULTS: We showed that the pluripotency pattern determined by QCM was similar to the patterns of proliferation ability and gene expression, which showed a slight upregulation at the late stages, within the context of the general downregulation tendency during differentiation. Additionally, a comprehensive gene expression pattern covering nearly every stage of differentiation was identified. CONCLUSION: Therefore, this assay may be powerful tools for determining the efficiency of differentiation systems based on pluripotency. In this study, we not only introduce a new method for determining efficiency based on pluripotency, but also provide more information about the characteristics of osteogenic differentiation which help facilitate future development of more efficient protocols.

Evaluating the Usage of Social Medias in the Kingdom of Saudi Arabia: Methodological Limitations and Adjustments

  • Alghamdi, Deena
    • International Journal of Computer Science & Network Security
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    • 제22권1호
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    • pp.305-311
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    • 2022
  • This research aimed to provide a profound description of the practices of social media users in the Kingdom of Saudi Arabia (KSA), specifically the users of Facebook® (FB) and Snapchat® (SC), the reasons for these practices, decisions made, and the people involved. Such research would be of significant help to designers and policymakers of social media applications in understanding user practices when using social media applications and the reasons for such practices in the KSA. This better comprehension would be of significant help in improving current applications and creating new ones. According to the data analysis, there was a clear preference for SC over FB in the KSA. Most participants with SC accounts were described as very active users, accessing their accounts at least once a day compared to FB users. The users were led by this high preference for SC to create new words derived from the name of the application and use them in daily life. We showed our experience of carrying out a study in which the main objective was to collect factual empirical data from participants about their daily usage of social media applications while considering the unique cultural settings in the KSA. Mixed quantitative and qualitative methods were used to triangulate the data, increasing its trustworthiness and validity. Multiple perspectives were obtained using various data collection methods. Therefore, conclusions would not be confounded with limitations of any particular methodology or with conditions of any collection rounds. This research would constitute a valuable guide for researchers intending to use methods with male and female informants from different cultures, preparing them for potential challenges and suggesting possible solutions.

항생제를 사용하고 있었던 인공호흡기 연관 폐렴환자에서의 원인균 발견을 위한 소량 기관지폐포세척술의 진단적 효용성에 관한 연구 (Study for Diagnostic Efficacy of Minibronchoalveolar Lavage in the Detection of Etiologic Agents of Ventilator-associated Pneumonia in Patients Receiving Antibiotics)

  • 문두섭;임채만;배직현;김미나;진재용;심태선;이상도;김우성;김동순;김원동;고윤석
    • Tuberculosis and Respiratory Diseases
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    • 제47권3호
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    • pp.321-330
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    • 1999
  • 배경: 인공호흡기 연관 폐렴(ventilator-associated pneumonia, 이하 VAP)의 원인균 동정의 표준적인 방법으로는 기관지내시경을 통한 검체보호솔질법(protected specimen brush, 이하 PSB)이 인정되고 있다. 그러나 PSB가 고가이고 국내의 경우 전량 수입에 의존하고 있어 보편적으로 사용하기 어렵다. VAP의 진단에는 PSB외에 기관지폐포세척술(bronchoalveolar lavage, 이하 BAL)이 흔히 이용되나 호흡부전으로 인공호흡기를 사용하는 환자에서 다량의 BAL을 시행하기 어렵고, 시술 후 환자 상태가 악화될 수도 있다. 이에 저자들은 기왕에 항생제를 투여 받고 있던 중 VAP가 발생한 환자들을 대상으로 바이러스를 포함한 원인균의 동정 검사에 필요한 최소한의 BAL검체(25 ml) 만 채취하는 소량의 BAL(이하 miniBAL)을 시행하여 동일한 부위에서 시행한 PSB에 의한 세균 배양 검사 성적과 비교함으로써 miniBAL 검사의 진단적 효용성을 알아보고자 하였다. 방법: 연구는 1997년 5월 1일부터 1998년 8월 31일까지 서울 중앙병원 성인 중환자실에서 항생제를 투여 받고 있던 중 연속적으로 VAP가 발생한 38명(41 예)의 환자를 대상으로 하였다. 환자들의 평균연령은 $61{\pm}14$세이었으며 남녀 비는 3.6:1 이었다. PSB는 단순 흉부사진상 병변이 심한 부위에서 시행하였고, 동일부위에서 miniBAL을 연속적으로 시행하였다. miniBAL은 생리식염수를 50 ml씩 투여하여 총 25 ml가 모일 때까지 세척을 반복하였다. VAP 원인균의 판정 기준은 PSB와 BAL을 통해 얻은 검체를 정량 배양법으로 배양한 뒤 PSB는 $10^3cfu/ml$ 이상, BAL은 $10^4cfu/ml$ 이상인 경우에 양성으로 판정하였다. 결과: 25 ml BAL을 얻기 위해 기관지 내시경을 통해 주입한 생리 식염수의 양은 평균 $93{\pm}32ml$ 였다. PSB의 경우에는 총 41예 중 19예(46.3%), miniBAL의 경우 18예(43.9%)에서 원인균이 검출되었다. PSB와 miniBAL은 41예 중에서 35예에서 일치하는 결과를 나타내어 진단 일치율은 85.4%였다. VAP가 호전된 환자는 39명 중에서 19명(48.7%)이었고 miniBAL과 PSB를 통해 원인균이 발견된 환자들(12/19 명, 63.2%)이 발견되지 않았던 환자들(7/20명, 35%)에 비해 VAP 호전율은 높았으나 두 군사이의 통계학적 차이는 없었다(P>0.2). 검사 전, 검사 중 그리고 검사 후의 분당 평균 심 박동수는 각각 $111{\pm}22$회, $125{\pm}24$회, $111{\pm}26$회이었으며 동맥혈 산소분압은 각각 $97{\pm}3%$, $92{\pm}10%$, $95{\pm}3%$ 이었다. 검사 전파 검사 중의 심 박동수는 유의하게 증가되었으나 (p<0.05) 검사 전과 검사 10분 후의 심 박동수는 차이가 없었다(p>0.5). 검사 전과 비교하여 검사 중과 (p<0.05) 검사 후의 (p<0.005) 동맥혈 산소포화도는 유의하게 저하되었으나 모두 정상범위 내에 있었다. 검사 시행 중 저혈압 2예, 동맥 산소 분압의 저하 3 예의 부작용이 있었으나 검사 종료후 곧 회복되었고, 심방조동(atrial flutter)으로 l예에서 검사가 중단되었으나 8일 후에 문제 없이 miniBAL이 시행되었다. 결론: MiniBAL 배양검사의 결과는 PSB에 의한 결과와 높은 일치율을 보이고 비교적 안전한 검사방법이므로 VAP 의 원인균 규명에 PSB와 고식적인 BAL을 대치할 수 있는 진단 방법으로 사료된다.

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조직배양(組織培養)된 마우스복강거식세포에서의 인나균증식실험(人癩菌增殖實驗) - 2. trypsin-정제인나균(精製人癩菌)을 사용(使用)한 in vivo infection-in vitro cultivation 실험(實驗) (Growth Experiment of Mycobacterium Leprae in Cultured Mouse Peritoneal Macrophages - 2. In vivo infection and in vitro cultivation of trypsin-purified Myco. Leprae)

  • 양용태;유준
    • 대한미생물학회지
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    • 제7권1호
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    • pp.29-41
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    • 1972
  • 조직배양(組織培養)을 이용(利用)한 마우스복강거식세포내 인나균증식실험(人癩菌增殖實驗)으로서 trypsin-정제인나균(精製人癩菌)을 사용하여 1) 인나균(人癩菌)의 마우스복강내접종(腹腔內接種)에 의(依)하여 야기(惹起)되는 복강거식세포내의 생체내(生體內) 인나균감염(人癩菌感染)에 대(對)한 동역학적양상(動力學的樣相), 2) in vivo infection-in vitro cultivation에 의(依)한 인나균(人癩菌)의 복강거식세포내 증식태도(增殖態度) 그리고 3) 인나균(人癩菌)의 복강내접종(腹腔內接種)으로 인(因)한 마우스비장조직(脾臟組織)의 병리학적변화(病理學的變化)를 구명(究明)코저 본연구(本硏究)를 실시(實施)하였으며 아래의 결론(結論)을 얻었다. 1. 인나균(人癩菌)의 마우스복강내접종후(腹腔內接種後) 복강거식세포배양실시까지의 기간(其間)이 연장(延長)됨에 따라 배양(培養)된 복강거식세포에 있어서 세포질내(細胞質內)에 식균된 항산균수(抗酸菌數)와 항산균(抗酸菌)을 식균한 거식세포수(細胞數)가 각각 계속적(繼續的)으로 현저(顯著)하게 감소(減小)되어감이 관찰(觀察)되었다. 2. 인나균(人癩菌)의 복강내접종후(腹腔內接種後) 5개월(個月)에 이르기까지 생체내(生體內)에 존재(存在)하는 마우스복강거식세포에 있어서의 인나균증식(人癩菌增殖)을 관찰(觀察)할 수 없었다. 3. 인나균(人癩菌)의 복강내접종후(腹腔內接種後) 24시간(時間) 및 1주(週)만에 실시(實施)된 복강거식세포배양을 2 내지(乃至) 3개월간(個月間) 그 배양상태(培養狀態)를 유지(維持)하였던바 배양(培養)된 거식세포(細胞)의 염색표본(染色標本)에서 거식세포내(細胞內) 항산균수(抗酸菌數)의 뚜렷한 증가양상(增加樣狀)을 관찰(觀察)할수 있었다. 4. in vivo infection-in vitro cultivation 수기(手技)로서 배양(培養)된 복강거식세포를 사용(使用)한 총항산균수측정실험(總抗酸菌數測定實驗)에서 조직배양개시(組織培養開始) 9 및 11주(週)에 이르러 배양(培養)된 거식세포내(細胞內) 항산균수증가(抗酸菌數增加)에 대한 양적증거(量的證據)를 얻을수 있었다. 5. 인나균(人癩菌)의 복강내접종(腹腔內接種)으로 야기되는 마우스비장조직(脾臟組織)의 병리학적소견(病理學的所見)은 주로 적수부위(赤髓部位)에 나타난 변성변화(變性變化)이었으며, 균접종후(菌接種後) 5개월(個月)에 이르기까지 마우스비장내(脾臟內)에 있어서의 인나균(人癩菌)의 증식양상(增殖樣狀)을 관찰(觀察)할 수 없었다.

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지역웹툰 생태계 조성을 위한 방안 연구 (A Study on Measures to Create Local Webtoon Ecosystem)

  • 최승춘;윤기헌
    • 만화애니메이션 연구
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    • 통권51호
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    • pp.181-201
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    • 2018
  • 한국 만화산업은 출판만화시장의 축소와 만화대여점의 몰락 등으로 꾸준히 쇠퇴를 거듭하다 2000년대 이후 웹툰의 등장으로 급격한 질적 변화와 폭발적인 양적 성장을 가져왔다. 만화라는 단어는 웹툰의 광의적 의미로 해석되고 있으며, 웹툰은 만화의 포괄적인 개념까지 승계 받고 있다. 웹툰은 디지털기기를 사용하고 데이터화된 원고를 생산, 제공함으로서 콘텐츠의 지역적, 공간적, 물리적 한계를 뛰어 넘고 있다. 더구나 지역별 인적인프라가 꾸준히 성장하고 있는 상황 속에서 정부의 만화산업 지원정책과 맞물려 웹툰체험관, 웹툰캠퍼스, 웹툰창작센터 등의 창작인프라가 지역에 구축되어 활발한 움직임과 성과를 보여주고 있으며, 이에 웹툰은 지역 성장론과 지역분권에 맞는 산업적 모델로 인식받기 시작했다. 그럼에도 불구하고 여전히 수도권과 부천 중심으로 만화인프라가 심각하게 편중되어 불균형한 구조로 놓여있는 현실이다. 만화산업을 견인하고 있는 웹툰은 인터넷의 발달과 함께 성장한 짧은 만화역사를 가지고 있다. 지역웹툰 역시 성장의 초기단계에 진입했을 뿐이다. 만화의 인적인프라와 웹툰의 창작인프라로 활성화된 지역웹툰은 창작시설의 구축완료 이후 향후 성장 동력의 연구와 대안이 절실한 상태이며, 지속적 발전을 위해 새로운 패러다임이 필요한 시점이다. 결국, 웹툰이 지역발전의 새로운 방향인 '문화'로 지정되어 이와 더불어 지역 특성에 맞는 만화콘텐츠를 개발, 지역의 관광, 문화, 예술 산업과 연계하는 모델이 꾸준히 개발되어야 연착륙에 성공할 수 있을 것이다. 이로서 지역 웹툰이 지방분권과 지역산업 부흥의 작은 모멘텀으로 작용되길 바란다.

인체 상피 세포암의 일차 배양을 이용한 방사선 민감도 측정 (In Vitro Intrinsic Radiosensitivity Of Human Squamous Cell Carcinoma in Primary Culture)

  • 최은경;양광모;이병용;장혜숙;김상윤;남주현;유은실;이인철
    • Radiation Oncology Journal
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    • 제12권1호
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    • pp.27-31
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    • 1994
  • 종양의 조직학적 형태에 따라 또 같은 조직의 종양에서도 각 환자에 따라 방사선 치료에 대한 반응 정도에는 많은 차이가 관찰된다. 이러한 방사선 감수성을 예측하는 한 방법으로 각 환자에서 떼어낸 종양조직을 일차 배양하여 방사선 조사에 의한 세포 생존 곡선을 구한뒤 2Gy에서의 생존(SF2)을 얻었다. 방사선 치료가 계획된 두경부 종양과 자궁경부암 환자의 종양 조직을 얻어 기계적인 방법으로 미세절편으로 만든 후 collagenase type IV와 2시간 배양하여 단일 종양세포 혼탁액을 얻었다. Cell adhesive matix로 전처리된 24 well plate에 각 well당 일정수의 세포를 넣어 24시간 배양한뒤 각 열에 0, 1, 2, 3, 4. 6Gy의 방사선을 조사하였다. 13일간 배양후 crystal violet으로 염색한뒤 image analysis system을 이용하여 각 well의 광학밀도를 측정하여 세포 생존을 구한다. Linear quadratic model에 의한 생존 곡선을 얻은 뒤 2Gy에서의 생존율을 구하였다. 배양된 세포가 편평상 피암세포임을 확인하기 위하여 cytokeratin과 epithelial monoclonal 항체를 이용한 Immunocytochemical 염색을 하여 형광 현미경으로 관찰하였다. 5명의 두경부종양 환자와 20명의 자궁경부암 환자의 종양조직을 얻어 실험하여 15명(60$ \% $) 종양의 2Gy 생존을 얻는데 성공하였다. 10명의 일차 배양 실패의 원인은 단일 종양세포 혼탁액에 종양세포가 너무 적었거나 세포 이식후 배양이 잘 자라지 않은 것으로 판정되었다. 15편평 상피암 세포의 SF2의 평균은 0.55$\pm$0.17이었으며 범위는 0.20에서 0.79까지로 같은 편평상피암이라도 각 환자에 따라 SF2 간에 큰 차이를 보이는 것을 알 수 있었다. 이상에서 같은 부위에 생긴 같은 조직 유형의 종양이라도 각 환자마다 SF2 값의 차이가 큰 것으로 보아 방사선 치료의 효과를 예측할 수 있는 한 인자로 SF2 값을 이용할 수 있을 것으로 생각된다.

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벼와 담배의 원형질체 배양조건에 따른 식물호르몬의 변화 (Changes of Phytohormones in Rice and Tobacco Protoplasts under Different Cultural Conditions)

  • 황태익;민경수;임현옥;안장순
    • 한국작물학회지
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    • 제42권1호
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    • pp.33-41
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    • 1997
  • 작물 원형질체를 배양하면서 세포의 생존과 노화 그리고 고사의 상태를 대사적으로 정확히 판단이 가능한 marker물질을 확인하고 간편한 측정법을 확립하기 위하여 일련의 연구를 수행하였던 바 그 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 담배와 벼의 원형질체를 나출하여 MS와KM-8P를 기본배지로 하여 2,4-K와 CM을 첨가하였던 바, ABA는 경시적으로 감소하였으며 CM첨가에 의해서 더 많이 감소하였다. GA$_3$, IAA, zeatin은 반대로 증가하는 경향을 나타내었다. 특히 ABA의 감소율과 zeatin의 증가율이 가장 크게 나타났다. 2. Osmoticum(mannitol)을 적정 농도 이상으로 처리하였을 때 ABA는 일시적으로 증가되었다가 감소되었고, 다른 성장 호르몬은 모두 증가폭이 농도가 증가될수록 둔화되었다. 3. Supermine 10mM과 NaCl을 처리하였을 때 담배와 벼에서 각 호르몬의 증감은 서로 반대로 나타났다. 특히 담배는 NaCl의 stress가 크게 나타났다. 그리고 배양 후반기에는 원형질체의 분열이 중지되었다. 4. 원형질체의 배지 성분을 제거하고 32$^{\circ}C$로 고온 배양에 의해서 인위적으로 노화를 촉진시켰을 때 세포의 활력은 48시간 이후에 크게 감소되었다. 세포의 활력 상실과 반비례적으로 ABA는 배양 10일까지 크게 증가되었다. 이와 반대로 성장 호르몬들은 모두 증가되지 않고 감소가 이루어졌다. 특히 zeatin의 감소가 크게 나타났다. 5. 이상의 결과에 따라서 식물 호르몬은 원형질체가 처한 환경 요인이나 부여된 어떤 조건에 따라서 민감하게 변동하고 있음을 확인하였다.

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