In this study, we investigated the effect of the extracts of Cyrtomium fortunei J.Sm. (CFJ) on lipopolysaccharide (LPS) induced inflammation in mouse BV-2 microglial cells. Nitric oxide (NO) production and cell viability were measured using the Griess reagent and the (3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-Diphenyltetrazolium Bromide) (MTT) assay. Inflammatory cytokines were detected by quantitative polymerase chain reaction (qPCR) in BV-2 microglial cells with and without CFJ extracts. Subsequently, mitogen-activated protein kinases (MAPKs) and antioxidant markers were assessed by western blot analysis. It was found that the CFJ extract significantly decreased the production of pro-inflammatory cytokines (interleukin [IL]-6, tumor necrosis factor [TNF]-α, and IL-1β) and NO in BV-2 microglial cells that were stimulated with LPS. In addition, the expression levels of the phosphorylation of the MAPK family (p38, c-Jun N-terminal kinases [JNK], and extracellular-signal regulated kinase [ERK]) were reduced by CFJ. Also, treatment with CFJ significantly increased the activities of superoxide dismutase type 1(SOD1) and Catalase in BV-2 microglial cells. Our results indicate that CFJ has a potent suppressive effect on the pro-inflammatory responses of activated BV-2 microglia. Therefore, CFJ has the potential to be an effective treatment for neurodegenerative diseases, as it can inhibit the production of inflammatory mediators in activated BV-2 microglial cells.
Jianfeng Shan;Yuanxiao Liang;Zhili Yang;Wenshan Chen;Yun Chen;Ke Sun
The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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제28권3호
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pp.265-273
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2024
This study aims to explore possible effect of RNA polymerase I subunit D (POLR1D) on proliferation and angiogenesis ability of colorectal cancer (CRC) cells and mechanism herein. The correlation of POLR1D and Yin Yang 1 (YY1) expressions with prognosis of CRC patients in TCGA database was analyzed. Quantitative realtime polymerase chain reaction (qRT-PCR) and Western blot were applied to detect expression levels of POLR1D and YY1 in CRC cell lines and CRC tissues. SW480 and HT-29 cells were transfected with si-POLR1D or pcDNA3.1-POLR1D to achieve POLR1D suppression or overexpression before cell migration, angiogenesis of human umbilical vein endothelial cells were assessed. Western blot was used to detect expressions of p38 MAPK signal pathway related proteins and interaction of YY1 with POLR1D was confirmed by dual luciferase reporter gene assay and chromatin immunoprecipitation (ChIP). TCGA data showed that both POLR1D and YY1 expressions were up-regulated in CRC patients. High expression of POLR1D was associated with poor prognosis of CRC patients. The results showed that POLR1D and YY1 were highly expressed in CRC cell lines. Inhibition or overexpression of POLR1D can respectively suppress or enhance proliferation and angiogenesis of CRC cells. YY1 inhibition can suppress CRC progression and deactivate p38 MAPK signal pathway, which can be counteracted by POLR1D overexpression. JASPAR predicted YY1 can bind with POLR1D promoter, which was confirmed by dual luciferase reporter gene assay and ChIP. YY1 transcription can up-regulate POLR1D expression to activate p38 MAPK signal pathway, thus promoting proliferation and angiogenesis ability of CRC cells.
Won Chul Shin;Chae Woon Lee;Jiyeon Ha;Kyoung Ja Lim;Young Lan Seo;Eun Joo Yun;Dae Young Yoon
Korean Journal of Radiology
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제23권8호
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pp.835-845
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2022
Objective: To analyze the characteristics and trends of scientific publications on thyroid ultrasound (US) from 2001 to 2020, specifically examining the differences among disciplines. Materials and Methods: The MEDLINE database was searched for scientific articles on thyroid US published between 2001 and 2020 using the PubMed online service. The evaluated parameters included year of publication, type of document, topic, funding, first author's specialty, journal name, subject category, impact factor, and quartile ranking of the publishing journal, country, and language. Relationships between the first author's specialty (radiology, internal medicine, surgery, otorhinolaryngology, and miscellaneous) and other parameters were analyzed. Results: A total of 2917 thyroid US publications were published between 2001 and 2020, which followed an exponential growth pattern, with an annual growth rate of 11.6%. Radiology produced the most publications (n = 1290, 44.2%), followed by internal medicine (n = 716, 24.5%), surgery (n = 409, 14.0%), and otorhinolaryngology (n = 171, 5.9%). Otorhinolaryngology and internal medicine published significantly more case reports than radiology (p < 0.001, each). Radiology published a significantly higher proportion of publications on imaging diagnosis (p < 0.001 for all) and a significantly lower proportion of publications on biopsy (p < 0.001 for all) than the other disciplines. Publications produced by radiology authors were less frequently published in Q1 journals than those from other disciplines (p < 0.005 for internal medicine and miscellaneous disciplines and < 0.01 for surgery and otorhinolaryngology). China contributed the greatest number of publications (n = 622, 21.3%), followed by South Korea (n = 478, 16.4%) and the United States (n = 468, 16.0%). Conclusion: Radiology produced the most publications for thyroid US than any other discipline. Radiology authors published more notably on imaging diagnosis compared to other topics and in journals with lower impact factors compared to authors in other disciplines.
Background and Objectives: The search for a suitable alternative for urethral defect is a challenge in the field of urethral tissue engineering. Induced pluripotent stem cells (iPSCs) possess multipotential for differentiation. The in vitro derivation of urothelial cells from mouse-iPSCs (miPSCs) has thus far not been reported. The purpose of this study was to establish an efficient and robust differentiation protocol for the differentiation of miPSCs into urothelial cells. Methods and Results: Our protocol made the visualization of differentiation processes of a 2-step approach possible. We firstly induced miPSCs into posterior definitive endoderm (DE) with glycogen synthase kinase-3𝛽 (GSK3𝛽) inhibitor and Activin A. We investigated the optimal conditions for DE differentiation with GSK3𝛽 inhibitor treatment by varying the treatment time and concentration. Differentiation into urothelial cells, was directed with all-trans retinoic acid (ATRA) and recombinant mouse fibroblast growth factor-10 (FGF-10). Specific markers expressed at each stage of differentiation were validated by flow cytometry, quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR) assay, immunofluorescence staining, and western blotting Assay. The miPSC-derived urothelial cells were successfully in expressed urothelial cell marker genes, proteins, and normal microscopic architecture. Conclusions: We built a model of directed differentiation of miPSCs into urothelial cells, which may provide the evidence for a regenerative potential of miPSCs in preclinical animal studies.
Background: MicroRNA (miRNA) plays a crucial role in neuropathic pain (NP) by targeting mRNAs. This study aims to analyze the regulatory function and mechanism of miR-382-5p/dual specificity phosphatase-1 (DUSP1) axis in NP. Methods: We utilized rats with chronic constriction injury (CCI) of the sciatic nerve as the NP model. The levels of miR-382-5p and DUSP1 were reduced by intrathecal injection of lentiviral interference vectors targeting miR-382-5p and DUSP1. The mRNA levels of miR-382-5p and DUSP1 in the dorsal root ganglions (DRGs) were measured by RT-qPCR assay. The pain behavior was evaluated by mechanical nociceptive sensitivity and thermal nociceptive sensitivity. The expression levels of interleukin-6 (IL)-6, IL-1β, and tumor necrosis factor-α in the DRGs were analyzed by ELISA assay. The targeting relationship between miR-382-5p and DUSP1 was verified by DLR assay and RIP assay. Results: Compared to the Sham group, the CCI rats exhibited higher levels of miR-382-5p and lower levels of DUSP1. Overexpression of miR-382-5p significantly decreased DUSP1 levels. Reducing miR-382-5p levels can lower the mechanical nociceptive sensitivity and thermal nociceptive sensitivity of CCI rats and inhibit the over-activation of pro-inflammatory factors. Reduced miR-382-5p levels decreased NP in CCI rats. DUSP1 is the target of miR-382-5p, and down-regulation of DUSP1 reverses the inhibitory effect of reduced miR-382-5p levels on NP. Conclusions: Down-regulation of miR-382-5p inhibits the over-activation of pro-inflammatory factors by targeting and regulating the expression of DUPS1, thereby alleviating NP.
본 연구는 고욤잎, 감잎 및 뽕잎을 단독으로 사용하기보다 혼합하여 사용할 경우 고욤잎, 감잎 및 뽕잎 복합추출물이 아토피 피부염(AD) 증상을 억제하는지 효과를 밝히고, 항염 효능을 나타내는 기능성 소재로서의 이용 가능성을 알아보고자 하였다. 그 결과 육안 평가를 통해 피부의 건조 상태, 스케일링, 미란, 찰과상 및 홍반 같은 아토피 피부염 증상이 AD 모델에서 증가하였지만, 고욤잎, 감잎 및 뽕잎 각각의 추출물과 복합추출물을 투여하였을 경우 완화되는 것을 확인할 수 있었으며, 복합추출물이 고욤잎, 감잎 및 뽕잎 각각의 추출물보다 더 뛰어난 효과를 나타내었다. 피부 두께와 염증세포 및 비만세포의 침윤은 AD 모델에서 크게 증가하였지만, 고욤잎, 감잎 및 뽕잎 단독추출물과 복합추출물을 투여하였을 경우 감소하는 것을 확인할 수 있었으며, 복합추출물이 단독추출물보다 더 뛰어난 효과를 나타내었다. 혈청중의 IgE와 IL-4의 수치를 측정한 결과 AD 모델에서 많이 증가하였으나, 고욤잎, 감잎 및 뽕잎 단독추출물과 복합추출물을 투여하였을 경우 감소하는 것을 확인할 수 있었으며, 복합추출물이 단독추출물보다 더 뛰어나게 억제하는 효과를 나타내었다. HMC-1 세포에 복합추출물을 처리하였을 경우 염증성 사이토카인인 $TNF-{\alpha}$와 IL-6의 생성량이 유의적으로 감소하였으며, 또한 RAW 264.7 세포에 복합추출물을 처리하였을 경우 염증 매개 인자인 $TNF-{\alpha}$, IL-6, $PGE_2$ 및 NO 생성량이 감소하였고, 이러한 염증 매개 인자 억제 효능은 복합추출물이 단독추출물보다 더 뛰어나게 억제하는 것을 확인하였다. 이러한 결과로 미루어볼 때 고욤잎, 감잎 및 뽕잎을 혼합한 복합추출물을 사용할 때 효능이 더 우수한 것을 확인하였고, 아토피 피부염 증상 개선 및 염증관련 질환 치료를 위한 기능성 천연물 소재 및 제품 개발에 응용이 가능할 것으로 생각한다.
패류 내에 오염되어 있는 바이러스의 검출에 있어서 정성 정량적 분석이 기능하며 신속하고 간편한 방법의 개발을 이루고자 하였다. 5g의 굴 중장선 조직을 Glycine buffer 및 PEG 8000 용액을 사용하여 제조한 농축 시료 (T5g-D)와 50mg의 굴 중장선 조직으로부터 직접적으로 제조한 시료(sT5Omg-D)를 대상으로 2-step PCR을 실시하여 검출감도를 비교하였다. 동일한 1 ${\mu}l$의 DNA template T5g-D와 sT50mg-D를 사용하였을 때, 35cycles의 1-step PCR에서 양성의 결과를 얻을 수 있었다. 인위적으로 sT50mg-D 혼합 시료를 사용하여 2-step PCR (35cycles)을 실시하였을 때 T5g-D를 사용한 것과 비교하여 뚜렷한 차이를 나타내지 않았다. 또한 megalocytivirus에 오염된 양성시료 0.5~50mg을 사용하여 조제한 각각 $50{\mu}l$의 template DNA 1 ${\mu}l$를 사용하여 qPCR을 하였을 때 6.14E+00~1.2E+02/${\mu}l$의 농도를 함유하고 있는 것으로 나타났다. 조제한 template DNA에 6.14E+00 copies/${\mu}l$ 이하의 농도가 있을 때는 qPCR에서 positive의 결과를 얻을 수 없었다. 결론적으로 패류 내 mega1ocytivirus의 오염 유무 판단을 위한 2-step PCR 및 qPCR에서 50mg의 중장선을 사용하는 것은 i) 굴의 조직으로부터 오염된 megalocytivirus의 정성 및 정량을 위한 최소 검출 한계에 벼하여 충분한 양이었으며 ii) 개체별 분석이 가능하다는 장점이 있었으며 iii) 이를 토대로 국내에서 서식하고 있는 굴에서 megalocytivirus의 오염을 확인할 수 있었다.
혈장분획제제 중 혈액응공인자제제와 일부 면역글로불린제제는 혈장에 존재하는 다양한 단백질로부터 유효한 단백성분만을 선택적으로 분리 정제하기 위해 크로마토그래피 방법을 사용하여 생산된다. 효율적인 세척(cleaning) 공정이 이루어지지 않는다면 크로마토그래피는 다양한 종류의 불순물뿐만 아니라 혈액 중 내재 또는 오염 가능성이 있는 위해인자가 오염될 가능성이 있다. 본 연구에서는 혈장분획제제 제조공정에 사용되는 크로마토그래피의 세척 공정에서 혈장유래 바이러스의 제거 및 불활화 공정의 검토 강화로 혈장분획제제의 안전성을 확보하기 위해 크로마토그래피 세척 검증 시스템을 구축하고자 하였다. 크로마토그래피 세척 공정 중 바이러스 제거 검증을 위해 혈장유래 바이러스 중 물리${\cdot}$화학적 처리에 가장 큰 저항성을 갖는 human parvovirus B19의 모델 바이러스의 porcine parvovirus(PPV)를 대상으로 real-time PCR 정량법을 확립하였다. PPV에 특이적인 primer를 선별하였으며 형광염료 SYBR Green I을 사용하여 PPV DNA를 정량하였다. 세포배양법에 의한 감염 역가와 비교한 결과 PCR 민감도는 1.5 $TCID_{50}/ml$이었다. 확립된 검증법의 신뢰성(reliability)을 보증하기 위해 실험법의 특이성(specificity), 재현성(reproducibility) 등을 검증하였다. 구축된 검증시스템을 thrombin 분리${\cdot}$정제를 위한 SP-Sepharose 양이온 크로마토그래피 공정과 factor VIII 분리${\cdot}$정제를 위한 Q-Sepharose 음이온 크로마토그래피 공정에 적용하여 크로마토그래피 세척 검증을 실시하고, 세척 검증 시스템의 적합성을 확인하였다.
본 연구는, BIS 자기자본규제가 신용위험과 시장위험 뿐만 아니라 운영위험을 감안하는 제도로 점차 강화되고 있는 시점에 자본규제가 우리나라 은행들의 자산운용행태와 여신건전성에 어떠한 영향을 미치는가를 분석하기 위한 것이다. 이 목적에 부합되는 은행경영지표와 거시경제지표를 실증모형의 변수로 선정함과 아울러 이에 상응하도록 구성한 은행별 횡단면자료와 분기별 시계열자료(2000년1분기~2009년 1분기)의 통합자료(pooled data)를 SUR 기법으로써 실증분석하였다. 실증을 통해 분석한 자본규제정책의 효과성, 자본규제제도의 발전 방향을 위한 시사점은 다음과 같다. 첫째, BIS 자기자본규제가 수정협약단계로 강화되기 전의 2001년 말 이전의 표본기간에는 BIS 비율이 하락에 대응하여 국채투자비중을 늘려온 현상이 현저하였다. 그러나 2002년 말 이후에는 수익성이 낮은 국채비중을 늘려 위험가중자산을 조정하는 현상이 줄어들고 BIS 비율을 유지 또는 개선하기 위해 이익잉여금 창출, 신종자본증권 발행, 후순위채 발행 등에 의한 자본 확충이 선호되는 경향이 나타나고 있다. 둘째, BIS자기자본 규제가 더욱 강화된 2002년 이후의 표본기간에는 자기자본의 증감에 따라 대출금비중의 증감이 일어나는 동조화 현상이 현저하였으며, BIS 자기자본규제가 금융시장의 신용경색에 일정부분 영향을 미쳐 온 것으로 나타났다. 셋째, BIS 자기자본규제의 강화에 따라 은행들이 차주의 신용도를 보다 정교하게 평가하여 차주를 선택함으로써 여신건전성 제고에 노력을 기울이려는 유인을 갖게 되었으며 BIS 자기자본규제가 여신건전성 향상에 매우 긍정적인 영향을 미쳐온 것으로 나타났다. 넷째, 은행의 건전성 강화를 위한 BIS 자기자본규제가 긍정적 효과를 발휘하도록 함과 동시에 경기침체를 유발하는 신용경색 같은 부작용을 최소화 하려면, 은행의 자본확충경로가 활성화 된자본시장의 환경 조성, 은행의 건전성 강화를 위한 시장규율, BIS 자기자본규제의 효율적인 감독이 뒷받침되어야 한다.
기본 조성 $Mn_{0.631}Zn_{0.316}Fe_{2.053}O_{4}$와 $Mn_{0.584}Zn_{0.312}Fe_{2.104}O_{4}$ 및 $Mn_{0.538}Zn_{0.308}Fe_{2.154}O_{4}$에 입계의 고저항층을 형성하고 소결을 촉진시키기 위해서 0.1 mol%의 $CaCo_{3}$와 입자의 성장을 촉진시키고 높은 투자율을 얻을 목적으로 $V_{2}O_{5}$를 0.04 mol% 첨가하였다. 이들 원료들을 혼합한 후 $950^{\circ}C$에서 3시간 가소 과정을 거친후 ball mill 해서 toroid 시편을 만들고 $1250^{\circ}C$, $1300^{\circ}C$ 및 $1350^{\circ}C$에서 2시간 동안 질소 분위기에서 소결 시켰다. Raw material의 조성비 변화 및 소결 온도 변화에 따른 여러 가지 물리적 특성들을 조사하였다. X-선 회절 분석 결과 이들 시편들이 spinel 구조를 이루고 있음을 확인하였고 SEM 사진으로 측정한 결정 입자의 크기는 $18\;\mu\textrm{m}~23\;\mu\textrm{m}$이었다. 초투자율, 자기 유도는 소결 온도가 $1250^{\circ}C$에서 $1350^{\circ}C$로 증가함에 따라 증가하였고 Q factor와 보자력은 감소하였다. 보자력과 큐리온도는 각각 0.45 Oe 및 $200^{\circ}C$ 근처로 모든 시편들에서 거의 일치하였다. 본 시편의 사용 주파수 범위는 200 kHz~2 MHz로 확인되었으며, 소결 온도 $1300^{\circ}C$와 기본 조성 $Mn_{0.584}Zn_{0.312}Fe_{2.104}O_{4}$에서 다른 시편들 보다 더욱 더 우수한 자기유도값($B_{r},\;B_{m}$)을 얻을 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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