To produce PHA(polyhydroxyalkanoic acid) from microbr, dozens of microorganism have been screened from sewage sludge. Selected a strain HJ out of 50 strains of PHA producing bacteria has a capability of accumulating large amounts of PHB/HV copolymer when grown in batch culture with a single carbon source (glucose) that was not generally considered as precursor of hydroxyvalerate monomer unit. The strain HJ was identified as the genus Pseudomonas with respect to morphological, cultural, and biochemical characteristics. The optimal temperature and pH for cell growth were $37^{\circ}C$ and 7.0. The optimal medium compositions for cell growth were glucose 1% as a carbon source, (NH4) 2SO4 0.2% as a nitrogen source, K2HPO4 0.3%, and KH2PO4 0.45%. TO investigate she optimal condition for PHA production two-step cultivation method was employed. PHA production was inducted by deficiency of NH4+, SO4-2, Mg+2. Besides carbon source, deficiency of all nutrients stimulated PHA productivity but deficiency of NH4+ stimulated the most HV monomer content. The highest PHA production was C/N molar ratio 95.2. Pseudomonas sp. HJ was also able to pyoduc PHB/HV copolymer when cultivated on alkane, alkanoate, alcohol as carbon sources. The contents of PHA and she proportions of hydroxyvalerate monomer units varied depending on the carbon sources. Especially Pseudomonas sp. HJ was able to incorporate hydroxyvalerate into PHB/HV to level as high as from 49 to 74 mol% when grown in a medium containing hexadecane and propionate. The purified PHA was identified PHB/HV copolymer by HNMR analysis.
A bacterium producing exo-inulinase was isolated from soil and identified Pseudomonas sp. and named as Pseudomonas sp. NO5. The optimal culture conditions for the efficient production of exo-inulinase from Pseudomonas sp. NO5 were obtained by cultivating with the medium 1$\%$ sucrose, 0.5$\%$ yeast extract, 0.5$\%$$(NH_4)_2$$HPO_4$, 0.05$\%$$MgSO_4$ㆍ$7H_2$0, 0.001$\%$ and $FeSO_4$ㆍ$7H_2$0 at $37^{\circ}C$ in initial pH 7.0 for 20 hours. The enzyme was induced maximally in the presence of sucrose or inulin at early stationary phase about 20 hour after cultivation.
Environmental Sciences Bulletin of The Korean Environmental Sciences Society
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v.4
no.4
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pp.221-225
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2000
Pseudomonas sp. EL-G527 was grown to produce a biosurfactant on 2% n-hexadecane as the energy and carbon source. This biosurfactant significantly reduced the surface tension of water from 72 to 28 dyne/cm at a critical micelle concentration(CMC) of 140 mg/l at pH 2.0. As the pH value decreased, the reduction in the surface tension due to the biosurfactant increased. The surface activity of the biosurfactant was unaffected when the NaCl concentration was increased to 5% and the calcium ion concentration increased to 100 mM, plus it remained stable at 10$0^{\circ}C$ for 180 min.
This study was conducted to investigate optimum conditions for mass production of ntagonistic microbes Alcaligenes sp. HC12. Alcaligenes sp. HC12 had a potent biological control agent to control browning disease caused by Pseudomonas agarici. Alcaligenes sp. HC12 markedly showed the antagonistic activity against Pseudomonas agarici, the most destructive pathogen of cultivated mushrooms. To define the optimum conditions for the mass production of the Alcaligenes sp. HC12, we have investigated optimum culture conditions and effects of various nutrient source on the bacterial growth. The optimum initial pH and temperature were determined as pH 9.0 and $30^{\circ}$, respectively. The optimal concentration of medium elements for the growth of pathogen inhibitor bacterium(Alcaligenes sp. HC12) was determined as follows: 0.5% dextrine, 1.5% yest extract, 1.0% $NaNO_3$, 0.5% $KH_2PO_4$, and 1.5% asparagine.
Phosphate-solubilizing microorganisms were isolated from agricultural area in Korea, and the solubilizing potential of microorganisms was evaluated in vitro. Of the several microorganisms Pseudomonas putida, Penicillium sp., and Aspergillus niger showed solubilization in all phosphatic compounds such as hydroxyapatite, tricalcium phosphate, aluminium phosphate and rock phosphate tested. Inorganic P solubilization was directly related to the pH drop by each microorganisms. Aspergillus niger was found to be more active in solubilizing phosphate than Pseudomonas putida and Penicillium sp.. The maximum concentration of phosphorus released from each of aluminium phosphate, hydroxyapatite and tri-calcium phosphate by Aspergillus niger in liquid culture was 776ppm, 665ppm and 593ppm, respectively when $KNO_3$ was added as nitrogen source. For rock phosphate, it was 411ppm with ammonium sulfate as nitrogen source.
Fifteen microbes have been isolated from Jangja pond in Kuri-Si, Kyeonggi-Do. Among them, two strains showed excellent COD removal from wastewater, which were named Pseudomonas sp. BLP2052 and Flavobacterium sp. BLP20515, respectively. Optimal pH and temperature for the cell growth were 7.0 and $30^{\circ}C$ for both strains. Pseudomonas sp. BLP2052 and Flavobacterium sp. BLP20515 was applied to the reactor to treat wastewater and 66.0% and 65.7% COD (chemical oxygen demand) removal was achieved, respectively. Comparing these results to the case of applying mixed microbes present in Jangja pond, COD removal rate was 15% less. But when adding the selected microbes to the wastewater containing mixed microbes, COD removal rate increased by 5%. After 84 hour operation, we achieved 85.6% COD removal. When inhibitors were added less than 100 ppm, during the microbial wastewater treatment, Fe, Zn, Al, phenol and Cr influenced microbial activity more deterioratively in order. In the case of over 300 pm, Cr, Fe, Zn, Al and phenol showed severe deteriorative effect in order.
Plant growth-promoting (PGP) bacteria can be used as bioresources to enhance phytoremediation through their PGP traits and pollutant removal capacity. In this study, 49 rhizobacteria were primarily isolated from the rhizosphere of tall fescue grown in diesel- and heavy metal-contaminated soil. Their biosurfactant production, phosphate (P) solubilization, and siderophore production were qualitatively and quantitatively evaluated to identify superior PGP bacteria. The optimal conditions for the growth of PGP bacteria and the stability of their PGP traits were a temperature of 35℃, a pH of 7, and 2 days of cultivation time. Four superior PGP bacteria (Pseudomonas sp. NL3, Bacillus sp. NL6, Bacillus sp. LBY14, and Priestia sp. TSY6) were finally selected. Pseudomonas sp. NL3 exhibited superior biosurfactant production and P solubilization. Bacillus sp. NL6 showed the highest P solubilization and superior production of biosurfactants and siderophores. Bacillus sp. LBY14 offered the best siderophore production and impressive P solubilization. Priestia sp. TSY6 had superior capacity for all three PGP traits. Through their secretion of beneficial PGP metabolites, the four bacteria isolated in this study have the potential for use in the phytoremediation of contaminated soil.
The cellular responses of soil-borne bacterium, Pseudomonas sp. HK-6 to explosive 2,4,6-trinitrotoluene (TNT) were examined. Two stress shock proteins (SSPs), approximately 70-kDa DnaK and a 60-kDa GroEL were found in HK-6 cells in response to TNT. Analyses of SDS-PAGE and Western blot using anti-DnaK and GroEL revealed that SSPs were induced in HK-6 cells exposed to 0.5 M of TNT far 6-12 hrs. The maximum induction of proteins was achieved at 8-hr incubation point after HK-6 cells'exposure to TNT. Similar SSPs were found to be induced in HK-6 cells by heat shock (shift of temperature, from $30^{\circ}C$ to $42^{\circ}C$) or cold shock (shift of temperature,$30^{\circ}C$ to $4^{\circ}C$).2D-PAGE of soluble protein tractions from the culture of Pseudomonas sp. HX-6 exposed to TNT demonstrated that approximately 450 spots were observed on the silver stained gels ranging from pH 3 to pH 10. Among them, 12 spots significantly induced and expressed in response to TNT were selected and analyzed. Approximately 60-kDa protein, which was assumed highly expressed on the gel, was used for amino acid sequencing. N-terminal microsequencing with in-gel digestion showed that N-terminal sequence of the TNT-induced protein, <$^1XXAKDVKFGDSARKKML^17$, shared extensive similarity with $^1XXAKDVKFGDSARKKML^17$, N-terminal sequence of (P48216) GroEL of Pseudomonas putida.
A strain producing a high amount of chitinase was isolated from soil, identified as Pseudomonas sp., and tentatively named Pseudomonas sp. YHS-A2. An extracellular chitinase of Pseudomonas sp. YHS-A2 was purified according to the procedure of ammonium sulfate saturation, affinity adsorption, Sephadex G-100 gel filtration and Phenyl-sepharose CL-4B hydrophobic interaction column chromatography. The molecular weight of the purified enzyme was estimated to be 55 kDa on SDS-PAGE was confirmed by active staining. Optimal pH and temperature of the enzyme are pH 7.0 and $50^{\circ}C$, respectively, and the enzyme is stable between pH 5.0 and 8.0 and below $50^{\circ}C$. The main products of colloidal chitin by the chitinase were N-acetyl-D-glucosamine and N,N'-diacetylchitobiose both of which were detected by HPLC analysis. The enzyme is supposed to be a random-type endochitinase which can degrade any position of ${\beta}$-l,4-linkages of chitin and chitooligosaccharides. The chitinase inhibited the growth of some phytopathogenic fungi, Fusarium oxysporum, Botrytis cineria, and Mucor rouxii and these antifungal effects were thought to be due to the characteristics of endochitinase.
Using Pseudomonas sp. CH-414, the optimum culture conditions were investigated for the cell growth and the phospholipid production in batch culture by varying pH and aeration rate. With starting the cultivation under the conditions of pH 7.0 and 1vvm, pH was controlled to 6 or 8 at 30 hours of culture time. In the case of changing into pH 6.0, the phospholipid production was increased by ca. 20% with comparison to the case of pH 7.0. However, the biomass and the phospholipld concentration were rapidly decreased after 30 hours of culture time when pH was controlled to 8.0. As the aeration rate was increased, the biomass was increased while the phospholipid concentration was considerably varied and unstable. Especially, the concentration of phospholipid was rapidly decreased with 3vvm of aeration rate. Finally, under the culture conditions of pH 7.0 and 3vvm until 30 hours for the cell growth, which were controlled to pH 6.0 and 1vvm for the stable production of phospholipid beyond that time, the dry cell weight was $18.5g/\ell$ and the phospholipid concentration was $\0.83g/ell$ (45mg/g cell).
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[게시일 2004년 10월 1일]
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