$Lactobacillus$$jensenii$ YW-33이 생산하는 생물응집제의 활성본체를 규명하고자 응집물질을 분리, 정제하고 그 특성을 검토하고자 하였다. 생물응집제의 활성 본체를 조사하기 위하여 배양액을 원심분리하여 균체 자체와 균체를 제거한 상등액을 비교한 결과 균체를 제거한 상등액이 86%로 높은 응집활성을 나타냈다. 또한 pronase 처리와 periodate 산화를 행한 결과 pronase로 처리한 시료는 무처리군과 비교하여 차이가 없었던 반면 periodate로 산화시킨 시료는 응집활성이 크게 감소함에 따라 다당에 기인되는 것으로 추정되었다. 균체가 제거된 상등액을 감압, 농축하여 EtOH 60~80%의 농도로 분획한 결과 LJ-80을 얻었다. 분리된 LJ-80을 DEAE-Toyopearl 650C chromatography, Sepharose CL-6B chromatography을 이용하여 최종 정제된 LJ-80-II-1을 분리하였으며 HPLC 분석에 의해 순도를 확인했다. 정제된 LJ-80-II-1의 분자량은 약 800,000 이상이며 총당이 98.4%, 단백질이 0.6%으로 mannose : galactose : glucose가 1.61 : 0.25 : 1.00의 molecule ratio을 가지고 있었다.
ASW0 is a polysaccharide derived from the perennial herb Aster scaber Thunberg. We isolated ASW0, a fraction of crude polysaccharide, by means of ethanol precipitation and dialysis after hot water extraction to investigate its physicochemical properties and immunostimulatory effects. ASW0 contains neutral sugar (45.7%), acidic sugar (51.6%), protein (2.3%), and 2-keto-3-deoxy-D-manno-octonate (KDO) (0.4%). The neutral sugar in ASW0 (in mole percentage) was mainly composed of arabinose (34.5 mol%), glucose (31.1 mol%), galactose (14.9 mol%), and rhamnose (8.1 mol%), which are characteristic of pectic polysaccharides. ASW0 also contained small amounts of xylose, mannose, and fucose. The anti-complementary activity of ASW-0 was similar to that of polysaccharide K (used as positive control). ASW0 exhibited no cytotoxicity in RAW 264.7 macrophages and dramatically increased nitric oxide (NO) production in a dose dependent manner ($0.3{\sim}30{\mu}g/mL$). Also, macrophages stimulated with ASW0 showed enhanced production of immunostimulatory cytokines such as interleukin-6 (IL-6) and tumor necrosis factor alpha ($TNF-{\alpha}$) in a dose dependent manner. These results suggest that the ASW0 have a potent immunostimulatory effect and can be used as a natural immune health ingredient.
Antimutagenic activity of Saururus chinesis (Lour.) Bail was investigated for food-borne mutagens using S. typhimurium TA98. Methanol extract from Saururus Chinesis (Lour.) Bail was fractionated into hexane, chloroform, ethylacetate and butanol fractions, followed by determination of antimutagenic activity for food-borne mutagenic heterogenic amines (HCA). The hexane fraction exhibited a strong antimutagenic activity for 2-amino-3-methylimidazo[4,5-f]quinoline (IQ), 2-amino-3,8-dimethylimidazo[4,5-f] quinoxaline (MeIQ), 2-amino-3,4-dimethyl-3H-imidazo[4,5-f]quinoline (MeIQx), 2-amino-1-methyl-6-phenylimidazo[4,5-b]pyridine (PhIP), 3-amino-1-methyl-5H-pyroid[4,3-b]indole acetate (Trp-2-A); however its fraction rather enhanced the bacterial mutagenicity of 2-amino-3,4,8-trimethyl-3H-imidazo[4,5-f]quinozaline (4,8-diMeIQx) and 2-amino-3,7,8-trimethyl-3H-imidazo[4,5-f]quinoxline (7,8-diMeIQx). Active principle in the fraction was found to be two major compounds (${\gamma}$-crene B and epi-bicyclosesquiphellandrane) and 6 minor compounds (${\delta}$-caryophyllene, ${\gamma}$-elemene, ${\beta}$-cabebene, ${\delta}$-cadinene, ${\delta}$-selinene, and patchoulene). Modulation effect for the mutagenic activity of the food-borne mutagenic HCA by the fraction might be derived from a cumulative effect of each individual compounds. Hence, this hexane fraction might be use to reduce the production of mutagenic HCA during cooking process of protein-rich foods.
Kim, Ju Gyeong;Kim, Min Jeong;Lee, Ji Su;Sydara, Kongmany;Lee, Sangwoo;Byun, Sanguine;Jung, Sung Keun
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제30권6호
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pp.822-829
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2020
Nutraceutical treatments can reduce inflammation and prevent the development of inflammatory diseases. In this study, the anti-inflammatory effects of Smilax guianensis Vitman extract (SGE) were examined. SGE suppressed lipopolysaccharide (LPS)-mediated nitrite production in RAW 264.7 cells. SGE also prevented the LPS-induced expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS) but not cyclooxygenase (COX)-2. Western blot analysis showed that SGE attenuated LPS-induced phosphorylation of IκB kinase (IKK), inhibitor of kappa B (IκB), and p65. Additionally, SGE inhibited LPS-induced IκB degradation in RAW 264.7 cells. Western blot analysis of the cytosolic and nuclear fractions, as well as immunofluorescence assay results, revealed that SGE suppressed LPS-induced p65 nuclear translocation in RAW 264.7 cells. Moreover, SGE reduced LPS-induced interleukin (IL)-1β, IL-6, and tumor necrosis factor-α (TNF-α) mRNA expression and IL-1β and IL-6 protein expression in RAW 264.7 cells. Collectively, these results indicate that SGE suppresses the NF-κB signaling pathway and thereby inhibits the production of NO, IL-1β, and IL-6.
본 연구에서는 만형자 분획물의 항산화 및 주름개선 효과에 대하여 알아보고자 하였다. 만형자 ethyl acetate 분획물은 DPPH, ABTS에서 우수한 항산화 활성을 나타내었으며, 주름개선 효과를 검증하기 위하여 elastase 저해활성을 측정한 결과 $1,000{\mu}g/mL$에서 74% 저해활성을 나타내었다. 만형자 ethyl acetate 분획물의 세포생존율을 확인하기 위하여 섬유아세포로 MTT assay에 의해 확인 한 결과 5, 10, 15, 20, $25{\mu}g/mL$의 농도구간에서 100%에 가까운 세포 생존율을 확인하였다. 만형자 ethyl acetate 분획물의 MMP-1 저해활성을 측정 한 결과 $25{\mu}g/mL$에서 14%의 저해효과를 나타내었으며, 만형자 ethyl acetate 분획물의 MMP-1의 단백질 발현 억제 효과를 확인한 결과 $25{\mu}g/mL$의 농도에서 50% 감소하였다. 이러한 결과로 보아 만형자 ethyl acetate 분획물의 주름개선 효과를 확인할 수 있으며, 천연 기능성 화장품 소재로서의 가능성을 확인하였다.
The chemical properties and physiological activities of the freeze-dried stromata of Cordyceps militaris were examined. A proximate analysis exhibited that the stromata consisted mainly of crude carbohydrate (74.3%), crude protein (11.5%), and moisture content (8.7%), with a low content of crude ash (4.%) and fat (1.3%). The carbohydrate was mostly composed of glucose (88.6%). A large quantity of essential fatty acids, including linolenic acid (33.8%) was also observed. An analysis of the component amino acid showed a relatively high ratio of the essential amino acids, lysine (101.2 mg/g), methionine (62.7 mg/g), and acidic amino acids of glutamic aicd (57.5 mg/g) and aspartic acid (43.9 mg/g), whereas a low of tyrosine content (4.7 mg/g). An examination of the cordycepin content indicated tht the stromata and mycelium-embedded media (silkworm pupae) contained 0.2% and 0.5%, respectively. From the examination of the physiological activities, based on methanol extract (M), ethylacetate extract (EA), and hot-water extract (HW) fractions of the stromata, the hot-water extract (HW) fraction showed the most potent intestinal immune modulating activity, anticoagulant activity, and anticomplementary activity, whereas the ethylacetate extract (EA) fraction exhihited a radical scavenging activity. Therefore, the results from the present study indicate that the stromata of C. militaris contain various healthy chemical ingredients, and that especially boiled water extract of whole body would apprear to provide beneficial physiological activities.
Serra, A.B.;Serra, S.D.;Serra, F.B.;Domingo, I.J.;Cruz, L.C.;Fujihara, T.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제8권2호
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pp.163-169
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1995
This study was conducted 1) to compare the nutrient content and mineral composition of the Philoppine indigenous sheep and goats diets when grazed in common pasture during rainy season, 2) to determine the influence of sampling methods on nutrient content and mineral composition of upland (UP) and lowland (LP) native pastures, and 3) to compare these two pasture types in terms of nutrient and mineral composition. Experiment 1 used sis esophageally fistulated animals, three each for sheep and goats. Weekly extrusa collection was done for a period of three months. Experiment 2 was conducted in UP and LP; these were sampled thrice by three methods, plucking, clipping and use of three esophageally fistulated sheep. Results of Experiment 1 indicated that the diets of sheep were greater in crude protein(CP; p < 0.01) and ether extract(EE; p < 0.05) but lower in crude fiber (CF) and acid detergent lignin (ADL; p < 0.05) than that of goat diets. All other nutrient fractions including mineral composition were not significantly different from each other. Significant findings of Experiment 2 were: CP content of UP was in the order fistulated > plucked > clipped (p < 0.05); CP content of LP was greater (p <0 .05) in fistulated and plucked samples; and ash content was greater (p < 0.05) in fistulated samples of both pastures. The CP of UP was different (p < 0.05) from each sampling method but the CP of LP and ADL of both pastures were greater (p < 0.05) in clipped samples. Most minerals either macro or microminerals were greater in fistulated samples of both pastures. Pooled data of the two pastures showed that LP had better nutrient characteristics and greater mineral composition. Based from this study, there were few differences between the diets of indigenous sheep and goats when grazed in common pasture. Also, sampling methods influenced the nutrient composition of indigenous sheep diets.
Cimetidine이 theophylline의 약동학적 특성과 대사과정에 미치는 효과를 검토코자 6마리의 개를 대상으로 일주일간 정맥내 cimetidine(30mg/kg/day)투여 전후에 단일 용량의 정맥투여에 따른 theophylline의 약동학적 parameter 및 뇨중 theophylline 대사물 배설의 변화를 교차 실험을 통하여 관찰하였다. 대조실험에 비해 cimetidine투여후 theophylline의 청소율은 평균 31%(P<0.05)감소하였고 혈장반감기는 29%(P<0.01)연장되었다. 그러나 steady-state의 분포용적 및 혈장 단백 결합의 변화는 관찰할 수 없었다. Theophylline의 주 대사물인 3-methylxanthine, 1-methyluric acid 및 1,3-dimethyluric acid의 24시간 뇨증 배설량은 cimetidine투여후 모두 감소 하였으나 통계적으로 유의한 변화는 아니었으며 개별대사물의 배설 분획은 변화가 없었다. 이상의 결과로 부터 cimetidine이 theophylline의 demethylation과 8-hydroxylation대사과정 모두를 비선택적으로 억제함으로써 청소율을 감소시키고 반감기를 증가시킬 것으로 추정되었다.
Competitive direct ELISA was developed to detect gentamicin residues. Mice immunized with gentamicin-keyhole limpet hemocyanin (KLH) conjugate developed good antiserum titers, which gradually increased with booster injections, indicating immunization was successfully processed. Monoclonal antibody against gentamicin was prepared using hybridoma cells cloned by limit dilution of fused cells. IgG was purified from ascites fluid of hybridoma cell-injected mice through ammonium sulfate precipitation and Sephadex G-25 gel filtration. After the gel filtration, fractions of high antibody titer were further purified through affinity chromatography on protein A/G column. Monoclonal antibody against gentamicin was confirmed as IgG1, which has kappa light chain. Cross-reactivities ($CR_{50}$) of gentamicin monoclonal antibody to other aminoglycosides (kanamycin, neomycin, and streptomycin) were less than 0.005%, indicating the monoclonal antibody was highly specific for gentamicin. Standard curve constructed through competitive direct ELISA showed measurement range (from 80 to 20% of B/$B_0$ ratio) of gentamicin was between 1 and 40 ng/ml, and 50% of B/$B_0$ ratio was about 4 ng/ml. The gentamicin concentration rapidly increased to 1,300 ng/ml after the intramuscular administration up to 2 h, then sharply decreased to less than 300 ng/ml after 4 h of withdrawal, during which the elimination half-life ($t_{1/2}$) of gentamicin in the rabbit plasma was estimated to be 1.8 h. Competitive direct ELISA method developed in this study using the prepared monoclonal antibody is highly sensitive for gentamicin, and could be useful for detecting gentamicin residues in plasma of live animals.
About 7.7 million tons of straw dry matter are being rotten during the monsoon. The objective of this trial was to develop a technique to preserve straw under wet condition. To simulate the moisture content of wet straw, a dry straw was deeped overnight in water. After draining the excess water, the wet straw(668 g moisture $kg^{-1}$) was divided into twenty fractions and preserved with 0, 30, 50 ro 70 g urea $kg^{-1}$ dry matter for either of 30, 60, 90, 120 or 180 days in sealed plastic container. Considering the colour, smell, fungal infestation and pH, the wert straw was preserved excellently up to 180 days when 50 or 70 g of urea per kg DM was used. Urea preservation increased the crude protein contents of straw by 3.6 to 6.4 times (174 to $364g{\cdot}kg^{-1}$) over that of the dry straw ($48g{\cdot}kg^{-1}$). Although the NDF content of straw was not effected by the level of urea or by the length of the preservation period, but the ADF content increased (p > 0.05) by 0.086 to $0.889g{\cdot}kg^{-1}$ straw DM for each g increase in the urea level. At 48 hours, the DM degradability of dry straw was $350g{\cdot}kg^{-1}$, which increased to $633g{\cdot}kg^{-1}$ when preserved with 50 g urea $kg^{-1}$ for 180 days. For the same straw, both the rate(0.0388 vs. 0.0136 fraction $h^{-1}$), the extent(717 vs. $631g{\cdot}kg^{-1}$) of straw degradation and the estimated ME(9.55 vs. $6.51MJ{\cdot}kg^{-1}$ straw DM) were higher in the preserved than the dry straw.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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