A laboratory-scale submerged membrane bioreactor (MBR) was continuously operated for 100 d at an infinite sludge retention time (SRT) with the aim of identifying possible relation between the filterability of mixed liquor and sludge properties, such as extracellular polymeric substances (EPS), soluble microbial products (SMP), viscosity of mixed liquor, zeta potential of flocs and particle size distributions (PSD). Research results confirmed that MBR can operate with a complete sludge retention ensuring good treatment performances for COD and $NH_3-N$. However, the long term operation (about 40 d) of MBR with no sludge discharge had a negative influence on sludge filterability, and an increase in membrane fouling rates with the time was observed. There as a strong correlation between the sludge filterability and the fouling rate. Among the different sludge properties parameters, the concentration SMP and EPS had a more closely correlation with the sludge filterability. The concentrations of SMP, especially SMP with MW above 10 kDa, had a strong direct correlation to the filterability of mixed sludge. The protein fractions in EPS were biodegradable and available for microorganism metabolism after about 60 days, and the carbohydrates in EPS had a significantly negative effect on sludge filterability in MBR at an infinite SRT.
Objectives : This study was conducted to carry out Purification of Melittin and other peptide components from Bee Venom using gel filtration chromatography and propionic acid/urea polyacrylamide gel electrophoresis Methods : Melittin and other peptide components were separated from bee venom by using gel filtration chromatography on Sephadex G-50 column in 0.05M ammonium acetate buffer. Results : Melittin and other peptide components were separated from bee venom by using gel filtration chromatography on Sephadex G-50 column in 0.05M ammonium acetate buffer. The fractions obtained from gel filtration chromatography was analyzed by using SDS-PAGE and propionic acid/urea polyacrylamide gel electrophoresis. The melittin obtained from the gel filtration contained residual amount of phospholipase $A_2$ and a protein with molecular weight of 6,000. The contaminating proteins were removed by the second gel filtration chromatography. Conclusion : Gel filtration chromatography and propionic acid/urea polyacrylamide gel electrophoresis are useful to separate peptide components including melittin from bee venom.
Kim Sun-Hee;Yu Choon-Hie;Kim Jung Yun;Lee Sang Sun
Journal of Nutrition and Health
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v.38
no.7
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pp.561-569
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2005
This research was conducted to study the effect of milk consumption on blood lipid levels of Korean college women. According to milk intake from food frequency questionnaire (FFQ), top $20\%$ of subjects were classified as high group (HG) and bottom $20\%$ as low group (LG). Body weight, height and blood pressure were measured and BMI was calculated from the anthropometric data, but there was no significant difference between the groups. Blood samples were collected and analyzed for total cholesterol (TC), triglycerides (TG) and lipoprotein fractions. There was no significant difference in the blood level of albumin, total protein and hemoglobin between two groups, and all blood parameters were in the normal range. Blood lipid levels of two groups were not significantly different, but HDL-cholesterol level were higher in HG (p < 0.05). Therefore, according to the result of the research, it is considered that drinking a pack of milk (200 ml) everyday, the average intake of dairy products of HG, is advisable to promote good health without increasing of cardiovascular disease (CVD) risk.
𝛽-Patchoulene (𝛽-PAE) is a tricyclic sesquiterpene which performed many potential bioactivities and can be found in patchouli oil but in very low concentration. This study aimed to obtained 𝛽-PAE in high concentration by conversion of patchouli alcohol (PA) in patchouli oil under acid catalyzed reaction. Patchouli oil was fractinated by vacuum distillation at 96 kPa to get the fraction with the highest PA content. H2SO4 and ZnCl2 were used respectively as homogeneous and heterogeneous acid catalysts in the conversion reaction of the selected fraction. Patchouli oil, the fractions and the products were analysed by using GC-MS and FTIR instruments. Moreover, the interaction of 𝛽-PAE to COX-2 protein was studied to understand the antiinflammation activity of 𝛽-PAE. The results showed that patchouli oil contains 25.3% of PA. The selected fraction which has the highest PA content (70.3%) was distilled at 151 - 152 ℃. The application of ZnCl2 catalyst in conversion reaction did not succeed. In contrast, H2SO4 as a catalyst in acetic acid solvent succeeded in converting the overall fraction of PA to 𝛽-PAE. Furthermore, the molecular docking study of 𝛽-PAE against COX-2 enzyme showed van der Waals and alkyl-alkyl stacking interactions on ten amino acid residues.
Inula helenium L. is rich source of eudesmane-type sesquiterpene lactones, mainly alantolactone and isoalantolactone, which have the various pharmacological functions. In this study, we examined the inhibitory effects of nitric oxide (NO) production of hexane, methylene chloride, ethyl acetate, butanol, and water fractions from I. helenium and investigated the anti-inflammatory effect of hexane fraction of I. helenium (HFIH) in LPS-induced RAW 264.7 cells. Quantification of alantolactone and isoalantolactone from HFIH was carried out for the standardization by multiple reaction monitoring using triple quadrupole mass spectrometer. HFIH significantly inhibited inducible NO synthase (iNOS) and cyclooxygenase-2 (COX-2) protein as well as their downstream products NO and prostaglandin $E_2$ ($PGE_2$) in LPS-stimulated RAW 264.7 cells. Moreover, HFIH suppressed $NF-{\kappa}B$ transcriptional activity by decreasing the translocation of p65 to the nucleus. The in vivo study further confirmed that HFIH attenuated the paw edema induced by carrageenan in an acute inflammation model. These findings suggest that HFIH may be useful as a promising phytomedicine for inflammatory-associated diseases.
Tomato (Lycopersicon esculentum) is widely known for its beneficial effects on human health. To investigate the beneficial effects of polysaccharides from cherry tomato, cherry tomato polysaccharides (CTP) were prepared, the component sugars were analyzed, and the immunomodulatory activities in RAW 264.7 macrophages were assessed. CTP mainly contained arabinose (Ara) and galactose (Gal), suggesting that CTP might be enriched with an arabinogalactan (AG) moiety. The Ara and Gal present in CTP are likely components of AG-II (35.4%), namely $arabino-{\beta}-(3,6)-galactan$. To investigate the immunomodulatory activity of CTP, cytokine levels and iNOS2, COX-2, and $NF-{\kappa}B$ protein levels were analyzed, and $NF-{\kappa}B$ nuclear translocation and phagocytosis were observed by immunofluorescence. CTP significantly increased the levels of $TNF-{\alpha}$, MCP-1, and IL-6. CTP also increased iNOS2 and COX-2 expression as well as $NF-{\kappa}B$ nuclear translocation in RAW 264.7 cells. CTP significantly stimulated phagocytosis activity. These results showed that CTP stimulates macrophage activity, which can boost the innate immune response. CTP with high AG-II content could be used as a prebiotic to strengthen immunity.
Peptides are naturally occurring biological molecules that are found in all living organisms. These biologically active peptides play a key role in various biological processes. The aim of this study is the extraction and the purification of bioactive materials that induce relaxation of an apical muscle from the pyloric caeca of Patiria pectinifera. The acidified pyloric caeca extract was partially separated by the solid phase extraction using a stepwise gradient on Sep-Pak C18 cartridge. Among the fractions, materials eluted with 60% methanol/0.1% trifluoroacetic acid was put a thorough of a series of high performance liquid chromatography (HPLC) steps to isolate a neuropeptide with relaxation activity. The purified compound was eluted at 28% acetonitrile in 0.1% trifluoroacetic acid with retention time of 25.8 min on the CAPCELL-PAK C18 reversed-phase column. To determine the molecular weight and the amino acid sequence of the purified peptide, LC-MS and Edman degradation method were used, respectively. The primary structure of the peptide was determined to be FGMGGAYDPLSAGFTD which corresponded to the amino acid sequence of a starfish myorelaxant peptide (SMP) isotype (SMPb) found in the cDNA sequence encoding SMPa and its isotypes. In this study, a muscle relaxant neuropeptide (SMPb) has been isolated from pyloric caeca of starfish P. pectinifera. This is the first report of SMPb isolation on the protein level from P. pectinifera.
Yu Ri Kwon;Ji-Hyun Kim;Sanghyun Lee;Hyun Young Kim;Eun Ju Cho
Journal of Applied Biological Chemistry
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v.66
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pp.408-415
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2023
Alzheimer's disease constitutes a large proportion of all neurodegenerative diseases and is mainly caused by excess aggregation of amyloid beta (Aβ), which results in oxidative stress, inflammation, and apoptosis in the neurons. Populus tomentiglandulosa belongs to the Salicaceae family and is widely distributed in Korea; the antioxidant activities of the extract and fractions from P. tomentiglandulosa have been demonstrated in previous studies. Specifically, the ethyl acetate (EtOAc) fraction of P. tomentiglandulosa (EtOAc-PT) shows the most powerful antioxidative activity. Therefore, the present study investigates the protective effects of EtOAc-PT against neuronal damage in Aβ25-35-stimulated SH-SY5Y cells. EtOAc-PT restored cell viability significantly as well as inhibited the levels of reactive oxygen species and lactate dehydrogenase release compared to the Aβ25-35-induced control group. Furthermore, the inflammation- and apoptosis-related protein expressions were investigated to demonstrate its neuroprotective mechanism. EtOAc-PT downmodulated the expressions of inducible nitric oxide synthase, cyclooxygenase-2, B-cell lymphoma 2 associated X, and B-cell lymphoma 2. Thus, the findings show that EtOAc-PT has protective effects against Aβ25-35 by suppressing oxidative stress, inflammation, and apoptosis.
Agaricus brasiliensis, one of edible mushroom belonging to Basidiomycota, has been used for curing gastric ulcer and stomach cancer of human beings and also known to have good inhibitory effects on sarcoma 180 and Ehrlich carcinoma of mice. Neutral saline soluble (0.9% NaCl), hot water soluble and methanol soluble substances (hereinafter referred to Fr. NaCl, Fr. HW and Fr. MeOH, respectively) were prepared from fruiting body of the mushroom. ${\beta}$-glucan and total protein contents were identify from fractions of edible mushrooms extract. The ${\beta}$-glucan and protein contents of all fractions of the mushrooms ranged from 21.54~32.31% and 0.16~9.34%, respectively. In vitro cytotoxicity tests, crude polysaccharides were not cytotoxic against cancer cell lines such as Sarcoma 180, HT-29, NIH3T3 and RAW 264.7 at the concentration of 10~2000 ${\mu}g/ml$. Intraperitoneal injection with crude polysaccharides exhibited life prolongation effect of 18.8~50.6% in mice previously inoculated with Sarcoma 180. Fr. HW increased the numbers of spleen cell by 1.2 fold at the concentration of 200 ${\mu}g/ml$ compared with control. Fr. MeOH and Na improved the immuno-potentiating activity of B lymphocyte by increasing the alkaline phosphatase activity by 1.6 fold compared with control at the concentration of 50~500 ${\mu}g/ml$. Fr. Na generated 15.9 ${\mu}M$ of nitric oxide (NO) when cultured with RAW 264.7 at the concentration of 200 ${\mu}g/ml$, while lipopolysaccharide, a positive control, produced 3.7 ${\mu}M$. The Fr. NaCl, Fr. HW and Fr. MeOH increased the secretion of TNF-${\alpha}$, IL-$1{\beta}$, Il-2 and IL-6 by 2.2 times compared with the control group. Fr. Na increased the numbers of peritoneal exudate cells by 4 folds at the concentration of 50mg/kg compared with control. Circulating leukocytes increased by 2.7 folds when Fr. HW from A. brasiliensis was inoculated at the concentration of 50 mg/kg body weight. The hematological and blood chemical analysis of the 3 fractions did not show any difference in blood compositions and enzyme activities compared with the control group (p<0.05). Therefore, the experimental results suggested that crude polysaccharides extracted from A. brasiliensis contain antitumor and immuno-potentiating activities against Sarcoma 180 in ICR mice.
Park, Jung Ae;Jin, Kyong-Suk;Oh, You Na;Hyun, Sook Kyung;Choi, Yung Hyun;Kwon, Hyun Ju;Kim, Byung Woo
Journal of Life Science
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v.23
no.1
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pp.69-78
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2013
Vitis amurensis Rupreche, a sort of grape, grows naturally in Asian countries. It is known for important biological effects such as antioxidation, anti-inflammation, neuroprotection, and angiogenesis inhibition. Although its root is used as a traditional folk medicine in Korea, the root's biological activities are poorly studied. In the present study, the effects of V. amurensis root methanol extract (VARM) and its solvent fractions on adipocyte differentiation and adipogenesis in 3T3-L1 preadipocytes were investigated. The VARM significantly suppressed adipocyte differentiation, lipid accumulation, and the triglyceride (TG) content of 3T3-L1 preadipocytes in a dose-dependent manner, without cytotoxicity. To identify active molecules, the VARM was fractionated with a series of organic solvents including dichloromethane ($CH_2Cl_2$), ethyl acetate (EtOAc), and n-butanol (n-BuOH). All the fractions also showed inhibition of lipid accumulation in the 3T3-L1 preadipocytes. The $CH_2Cl_2$ fraction showed the most powerful anti-obesity effect through the modulation of cytidine-cytidine-adenosine-adenosinethymidine (CCAAT)/enhancer binding protein ${\alpha}$ ($C/EBP{\alpha}$), $C/EBP{\beta}$, peroxisome proliferator-activated receptor ${\gamma}$ ($PPAR{\gamma}$) gene and protein expression. Oleanolic acid was one of the main active compounds involved in the anti-obesity activity of the V. amurensis root. These results provide important new insight into the potential potent anti-adipogenic effect of the V. amurensis root and illustrate that one of the main compounds involved in this effect is oleanolic acid.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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