Using mRNA differential display technique, we investigated differential gene expression in hybrids relative to their parents in a diallel cross involving four chicken breeds in order to provide an insight into the molecular basis of heterosis in chicken. The results indicated that there was extensive differential gene expression between chicken F1 hybrids and their parents which was classified into four kinds of patterns as following: (1) bands only detected in hybrid F1; (2) bands only absent in hybrid F1; (3) bands only detected in parent P1 or P2; (4) bands absent in parent P1 or P2. Forty-two differentially expressed cDNAs were cloned and sequenced, and their expression patterns were confirmed by Reverse-Northern dot blot. Sequence analysis and database searches revealed that genes showed differential expression between hybrid and parents were regulatory and functional genes involved in metabolism, mRNA splicing, transcriptional regulation, cell cycles and protein modification. These results indicated that hybridization between two parents can cause changes in expression of a variety of genes. In conclusion, that the altered pattern of gene expression in hybrids may be responsible for heterosis in chickens.
Odorant receptors (ORs), the largest subfamily of G protein-coupled receptors, detect odorants in the nose. In addition, ORs were recently shown to be expressed in many nonolfactory tissues and cells, indicating that these receptors have physiological and pathophysiological roles beyond olfaction. Many ORs are expressed by tumor cells and tissues, suggesting that they may be associated with cancer progression or may be cancer biomarkers. This review describes OR expression in various types of cancer and the association of these receptors with various types of signaling mechanisms. In addition, the clinical relevance and significance of the levels of OR expression were evaluated. Namely, levels of OR expression in cancer were analyzed based on RNA-sequencing data reported in the Cancer Genome Atlas; OR expression patterns were visualized using t-distributed stochastic neighbor embedding (t-SNE); and the associations between patient survival and levels of OR expression were analyzed. These analyses of the relationships between patient survival and expression patterns obtained from an open mRNA database in cancer patients indicate that ORs may be cancer biomarkers and therapeutic targets.
In multicellular organisms, including humans, understanding expression specificity at the tissue level is essential for interpreting protein function, such as tissue differentiation. We developed a prediction approach via generated sequence features from overrepresented patterns in housekeeping (HK) and tissue-specific (TS) genes to classify TS expression in humans. Using TS domains and transcriptional factor binding sites (TFBSs), sequence characteristics were used as indices of expressed tissues in a Random Forest algorithm by scoring exclusive patterns considering the biological intuition; TFBSs regulate gene expression, and the domains reflect the functional specificity of a TS gene. Our proposed approach displayed better performance than previous attempts and was validated using computational and experimental methods.
Brefeldin A (BFA), a lactone antibiotic isolated from the fungus Eupenicillium brefeldianum, inhibits the transport of secreted and membrane proteins from the endoplasmic reticulum (ER) to the Golgi apparatus. BFA disrupts Golgi function, the accumulation of unfolded proteins in ER, and the induction of ER stress. Prolonged ER stress induces apoptosis at least in part through the transcription factor C/EBP (CCAAT/enhancer binding protein) homologous protein (CHOP),which is activated by the unfolded protein response (UPR). In this paper, we demonstrate that BFA-induced endoplasmic reticulum stress leads to different CHOP expression in primary astrocyte cells and C6 glioma cells. BFA induced lower CHOP expression levels in primary astrocyte cells than in C6 glioma cells; however, other ER stress inducers (thapsigargin and tunicamycin) resulted in similar expression patterns in these two cell types. Interestingly, the three different ER stress inducers (BFA, thapsigargin, and tunicamycin) induced similar levels of CHOP mRNA expression in primary astrocyte cells. The ubiquitin-proteasome inhibitor MG132 also markedly up-regulated the BFA-mediated CHOP protein expression in primary astrocyte cells. BFA also induced higher proteasome activity in primary astrocyte cells than in C6 glioma cells. Taken together, our results suggest that higher proteasomal activity might down-regulate BFA-induced CHOP expression in primary astrocyte cells.
Ko, Taek Yong;Kim, Jong In;Park, Eok Sung;Mun, Jeong Min;Park, Sung Dal
Journal of Chest Surgery
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v.51
no.3
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pp.187-194
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2018
Background: Death domain-associated protein (DAXX), originally identified as a pro-apoptotic protein, is now understood to be either a pro-apoptotic or an anti-apoptotic factor with a chromatin remodeler, depending on the cell type and context. This study evaluated DAXX expression and its clinical implications in squamous cell carcinoma of the esophagus. Methods: Paraffin-embedded tissues from 60 cases of esophageal squamous carcinoma were analyzed immunohistochemically. An immune reaction with more than 10% of tumor cells was interpreted as positive. Positive reactions were sorted into 2 groups: reactions in 11%-50% of tumor cells and reactions in more than 51% of tumor cells, and the correlations between expression and survival and clinical prognosticators were analyzed. Results: Forty-three of the 60 cases (71.7%) showed strong nuclear DAXX expression, among which 19 cases showed a positive reaction (31.7%) in 11%-50% of tumor cells, and 24 cases (40.0%) showed a positive reaction in more than 51% of tumor cells. A negative reaction was found in 17 cases (28.3%). These patterns of immunostaining were significantly associated with the N stage (p=0.005) and American Joint Committee on Cancer stage (p=0.001), but overall survival showed no significant difference. There were no correlations of DAXX expression with age, gender, or T stage. However, in stage IIB (p=0.046) and stage IV (p=0.014) disease, DAXX expression was significantly correlated with survival. Conclusion: This investigation found upregulation of DAXX in esophageal cancer, with a 71.7% expression rate. DAXX immunostaining could be used in clinical practice to predict aggressive tumors with lymph node metastasis in advanced-stage disease, especially in stages IIB and IV.
Caffeoyl shikimate esterase (CSE) is a key enzyme in lignin synthesis in Arabidopsis thaliana. To determine the role of CSE in lignification of the endocarp in peach (Prunus persica L.) fruit, we cloned and characterized the P. persica CSE homolog, which we designated PpCSE. The 954 - bp PpCSE gene encoded a 317 - amino acid polypeptide. PpCSE expression patterns in the mesocarp and endocarp changed during peach fruit development. There was no significant difference between the expression levels of PpCSE in the mesocarp and endocarp at 39 and 44 days after full bloom (DAFB), but the expression level of PpCSE in the endocarp at 50 and 55 DAFB was 80.73 and 72.75 times higher, respectively, than that in the mesocarp. During peach fruit development, PpCSE expression in the endocarp increased rapidly; the relative PpCSE expression level at 50 DAFB was 122.70 times higher than that at 39 DAFB. At the protein level, CSE was detected in the peach fruit endocarp at 50 and 55 DAFB. Our study suggests that PpCSE expression during peach fruit development is closely related to the degree of endocarp lignification.
Jo, Pil-Gue;Choi, Yong-Ki;An, Kwang-Wook;Choi, Cheol-Young
Journal of Aquaculture
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v.20
no.4
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pp.205-211
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2007
Stress-inducible proteins may function in part as molecular chaperones, protecting cells from damage due to various stresses and helping to maintain homeostasis. We examined the mRNA expression patterns of a 68-kDa heat shock protein (HSP68) and 78-kDa glucose-regulated protein (GRP78) in relation to physiological changes in Pacific oyster Crassostrea gigas under osmotic stress. Expression of HSP68 and GRP78 mRNA in the gill significantly increased until 48 h in a hypersaline environment (HRE) and 72 h in a hyposaline environment (HOE), and then decreased. Osmolality and the concentrations of $Na^+$, $Cl^-$, and $Ca^{2+}$ in the hemolymph of HRE oysters significantly increased until 72 h (the highest value) and then gradually decreased; in HOE oysters, these values significantly decreased until 72 h (the lowest value), and then increased. These results suggest that osmolality and $Na^+$, $Cl^-$, and $Ca^{2+}$ concentrations were stabilized by HSP68 and GRP78, and indicate that these two stress-induced proteins play an important role in regulating the metabolism and protecting the cells of the Pacific oysters exposed to salinity changes.
Kim, Do Hyun;Ahn, Bok Ju;Ahn, Hee Jung;Ahn, Young Sup;Kim, Young Guk;Park, Chun Geun;Park, Chung Beom;Cha, Seon Woo;Song, Beom Heon
Korean Journal of Medicinal Crop Science
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v.23
no.1
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pp.13-19
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2015
This study was conducted to improve the postharvest storage techniques of managing and storing seeds, to test qualities and viabilities of the seeds and to examine the germination rate and the protein expression of Achyranthes japonica Nakai. The seeds collected from different areas of Je-Cheon and Gwang-Ju were stored with different temperatures and durations. Two plant growth regulators and two seed priming were treated to investigate their effect on the germination rates and the days required for germination. The weight of one hundred seed collected in Gwang-Ju was heavier than those in Je-Cheon. Seed length collected in Gwang-Ju was also longer about 5.12 mm than those in Je-Cheon about 4.90 mm and seed width was longer in Gwang-Ju than those in Je-Cheon. The rates of seed germination in two different collection areas were higher about 2.9 to 13.0% in Gwang-Ju compared to those in Je-Cheon. Comparing its rates with the storing temperatures and durations, they were not clearly different in between $4^{\circ}C$ and $25^{\circ}C$ and they also were gradually decreased with getting longer storing durations. The germination rates treated by plant growth regulators were higher with $GA_3$ than those with Kinetin. The highest seed germination rate was appeared at 50 ppm of $GA_3$. Comparing its rates with different seed priming, they were relatively higher with $KNO_3$ than those with PEG6000. In protein expression patterns between before the germinating and after the germinating of seeds, more and clear bands were appeared in the seed after the germination compared to those before the germination of seeds, especially 10 ~ 20 kDa. These results showing more and clear bands were more clearly appeared in Gwang-Ju compared to Je-Cheon. Comparing the protein expression with plant growth regulators and seed primings, $GA_3$ was better expression than those with Kinetin and $KNO_3$ was better than those with PEG6000. More and clear bands were closely related to the germination rates of seeds and more detailed studies would be required.
Purpose: To study the expression of angiogenin-2 (Ang-2) and its receptor Tie-2 in colorectal cancer and discuss the possible mechanisms behind this process. Materials and Methods: Using the streptavidin-peroxidase (SP) immunohistochemical method, paraffin sections from 100 colorectal cancer samples and 10 samples from tumor-adjacent normal tissue (> 2 cm from the edge of the gross tumor) were tested for protein expression of Ang-2, Tie-2, PI3K, and AKT. Reverse transcription-polymerase chain reaction and Western blots were further used to measure expression of the 4 genes and proteins in 20 freshly-resected colorectal cancer samples and tumor-adjacent normal tissues. Results: In colorectal cancer tissues, the expression of the Ang-2, Tie-2, PI3K, and AKT genes and their proteins was significantly higher than in tumor-adjacent normal tissues. Protein expression in poorly-differentiated adenocarcinoma was higher than that in well and moderately differentiated adenocarcinoma. According to Duke's classification, the protein expression in Stages C and D was significantly higher than that in Stages A and B. In the group with lymphatic metastasis, the protein expression was higher than that without lymphatic metastasis. Conclusions: In colorectal cancer, the expression of the Ang-2, Tie-2, PI3K, and AKT genes and their proteins is markedly higher than those in tumor-adjacent normal tissues. No correlation was observed between protein expression and gender, location, or histologic type. Correlations did exist between protein expression and differentiation level, stage of Duke's classification, and lymphatic metastasis; in colorectal cancer tissues with lower differentiation levels, higher stages of Duke's classification, and lymphatic metastasis, the expression of all 4 proteins was higher. The study of their expression patterns and relationships with aggression and metastasis will provide a valuable experimental foundation for assessing prognosis and targeted therapy of colorectal cancer.
In situ detection of RNAs is becoming increasingly important for analysis of gene expression within and between intact cells in tissues. International genomics efforts are now cataloging patterns of RNA transcription that play roles in cell function, differentiation, and disease formation, and they are demon-strating the importance of coding and noncoding RNA transcripts in these processes. However, these techniques typically provide ensemble averages of transcription across many cells. In situ hybridization-based analysis methods complement these studies by providing information about how expression levels change between cells within normal and diseased tissues, and they provide information about the localization of transcripts within cells, which is important in understanding mechanisms of gene regulation. Multi-color, single-molecule fluorescence in situ hybridization (smFISH) is particularly useful since it enables analysis of several different transcripts simultaneously. Combining smFISH with immunofluorescent protein detection provides additional information about the association between transcription level, cellular localization, and protein expression in individual cells.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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