Phytoestrogens, especially Yak-kong or soybean-derived isoflavones have been traditionally used as a supplement of estrogen for preventing postmenopausal osteoporosis in oriental folk medicine. In a previous study, we demonstrated that as Yak-kong and soybean increased MG-63 human osteoblastic cell proliferation, the expression of estrogen receptor $\alpha\;and\;beta\;(ER\;\alpha:\;ER\;\beta$) both were increased. However, the increased level of ER $\alpha$ is much higher than that of ER$\beta$. To determine whether the altered level of ER $\alpha$ expression affects Yak-kong or soybean induced MG-63 cell proliferation, we established cell lines stably expressing either ER $\alpha$ or antisense ER $\alpha$ RNAs. Increased expression of ER a in MG- 63 cells (ER $\alpha$-MG63) enhanced Yak-kong or soybean induced proliferation which paralleled with the enhanced expression of IGF-I. Inhibition of ER $\alpha$ expression by antisense $ER\;\alpha\;RNAs\;(As-ER\;\alpha-MG63$) caused these cells to insensitize Yak- kong or soybean induced proliferation and IGF-I expression. Furthermore, the comparable effects between Yak-kong and the combined treatment of genistein and daidzein at $0.5\;{\times}\;10^{-8}M$, which is a concentration of these two isoflavones similar to Yak-kong at 0.001 mg/ml, on cell proliferation and IGF-I expression in $ER\;\alpha-MG63\;or\;As-ER\;\alpha-MG63$ cells demonstrate that ER $\alpha$ plays an important, active role in MG-63 cell proliferation induced by phytoestrogens, especially Yak-kong or soybean derived isoflavones.
We have already known, neural progenitor cells exist not only in the developing brain, but in certain spots in adult CNS in mammals, so it will be of great value to find out some compounds which can interfere these cells proliferation ability. In this research, we observed that ginsenoside $Rg_1$ can not only enhance neural progenitors' proliferation ability in vitro, but increase neurogenesis in adult mouse dentate gyrus in vivo. Firstly, we set up neural progenitor cells' culture system from embryonic rats' hippocampus and prove their feature through immunocytochemistry. Then by using MTT assay, we found that when growing with ginsenoside $Rg_1(0.5\~2.5{\mu}mol/l)$, the progenitor cells' survival rate nearly doubled, furthermore, we proved that this increase was due to the increment of cell proliferation through $^3H-thimidine$ incorporation assay, hence, we drew the first conclusion: ginsenoside Rg1 has the ability to stimulate neural progenitor cells' proliferation in vitro; in order to observe this compound's effect in vivo, we devised the following experiment: after administering ginsenoside Rg1 (5, 10 mg/kg, once a day) intraperitoneally for two weeks, we examine the number of BrdU positive cells in the dentate gyrus of mice, and found that Rg1 could increase the number of proliferation cells significantly in vivo. From these studies, we are quite sure about Rg1's effects on the proliferation ability of neural progenitor cells both in vitro and in vivo, certain targets of the compound and its underlying mechanisms are in progress.
Kim, Jung-Hyun;Han, Ik-Hwan;Shin, Su-Jin;Park, Sung-Yul;Chung, Hyo-Yeoung;Ryu, Jae-Sook
Parasites, Hosts and Diseases
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v.59
no.3
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pp.235-249
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2021
Leptin is a type of adipokine mainly produced by adipocytes and reported to be overproduced in prostate cancer. However, it is not known whether it stimulates the proliferation of prostate cells. In this study, we investigated whether benign prostatic hyperplasia epithelial cells (BPH-1 cells) infected with Trichomonas vaginalis induced the proliferation of prostate cells via a leptin signaling pathway. To investigate the effect of crosstalk between adipocyte leptin and inflamed epithelial cell in proliferation of prostate cells, adipocytes 3T3-L1 cells were incubated in conditioned medium of BPH-1 cells infected with T. vaginalis (T. vaginalis-conditioned medium, TCM), and then the adipocyte-conditioned medium (ATCM) was identified to cause proliferation of prostate cells. BPH-1 cells incubated with live T. vaginalis released pro-inflammatory cytokines, and conditioned medium of these cells caused migration of adipocytes. When prostate stromal cells and BPH-1 cells were incubated with adipocyte conditioned medium containing leptin, their growth rates increased as did expression of the leptin receptor (known as OBR) and signaling molecules such as JAK2/STAT3, Notch and survivin. Moreover, blocking the OBR reduced this proliferation and the expression of leptin signaling molecules in response to ATCM. In conclusion, our findings show that inflamed BPH-1 cells infected with T. vaginalis induce the proliferation of prostate cells through leptin-OBR signaling. Therefore, it is likely that T. vaginalis contributes to prostate enlargement in BPH via adipocyte leptin released as a result of inflammation of the prostate.
Kim, Hyun Sik;Park, Young Han;Lee, Heui Seung;Kwon, Mi Jung;Song, Joon Ho;Chang, In Bok
Journal of Korean Neurosurgical Society
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v.64
no.5
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pp.716-725
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2021
Objective : The anti-tumor effect of the beta-adrenergic receptor antagonist propranolol in breast cancer is well known; however, its activity in glioblastoma is not well-evaluated. The Notch-Hes pathway is known to regulate cell differentiation, proliferation, and apoptosis. We investigated the effect of propranolol to human glioblastoma cell lines, and the role of Notch and Hes signaling in this process. Methods : We performed immunohistochemical staining on 31 surgically resected primary human glioblastoma tissues. We also used glioblastoma cell lines of U87-MG, LN229, and neuroblastoma cell line of SH-SY5Y in this study. The effect of propranolol and isoproterenol on cell proliferation was evaluated using the MTT assay (absorbance 570 nm). The impact of propranolol on gene expression (Notch and Hes) was evaluated using real-time polymerase chain reaction (RT-PCR, whereas protein levels of Notch1 and Hes1 were measured using Western blotting (WB), simultaneously. Small interfering RNA (siRNA) was used to suppress the Notch gene to investigate its role in the proliferation of glioblastoma. Results : Propranolol and isoproterenol caused a dose-dependent decrease in cell proliferation (MTT assay). RT-PCR showed an increase in Notch1 and Hes1 expression by propranolol, whereas WB demonstrated increase in Notch1 protein, but a decrease in Hes1 by propranolol. The proliferation of U87-MG and LN229 was not significantly suppressed after transfection with Notch siRNA. Conclusion : These results demonstrated that propranolol suppressed the proliferation of glioblastoma cell lines and neuroblastoma cell line, and Hes1 was more closely involved than Notch1 was in glioblastoma proliferation.
Extracellular matrix (ECM) proteins play a crucial role in culturing muscle stem cells (MuSCs). However, there is a lack of extensive research on how each of these proteins influences proliferation and differentiation of MuSCs from livestock animals. Therefore, we investigated the effects of various ECM coatings-collagen, fibronectin, gelatin, and laminin-on the proliferation, differentiation, and maturation of porcine MuSCs. Porcine MuSCs, isolated from 14-day-old Berkshire piglets, were cultured on ECM-coated plates, undergoing three days of proliferation followed by three days of differentiation. MuSCs on laminin showed higher proliferation rate than others (p<0.05). There was no significant difference in the mRNA expression levels of PAX7, MYF5, and MYOD among MuSCs on laminin, collagen, and fibronectin (p>0.05). During the differentiation period, MuSCs cultured on laminin exhibited a significantly higher differentiation rate, resulting in thicker myotubes compared to those on other ECMs (p<0.05). Also, MuSCs on laminin showed higher expression of mRNA related with maturated muscle fiber such as MYH1 and MYH4 corresponding to muscle fiber type IIx and muscle fiber type IIb, respectively, compared with MuSCs on other ECM coatings (p<0.05). In summary, our comparison of ECMs revealed that laminin significantly enhances MuSC proliferation and differentiation, outperforming other ECMs. Specifically, muscle fibers cultured on laminin exhibited a more mature phenotype. These findings underscore laminin's potential to advance in vitro muscle research and cultured meat production, highlighting its role in supporting rapid cell proliferation, higher differentiation rates, and the development of mature muscle fibers.
The effects of five lupane-triterpenoids from leaves of two Acanthopanax spp., chiisanogenin, chisanoside and $22{\alpha}-hydroxychiisanogenin$, acakoreoside A and acantrifoside A on the mitogen-induced proliferation were investigated in vitro. T cell proliferation (TCP) to concanavalin A (Con A) and the B cell proliferation (BCP) to lipopolysaccharide (LPS) were increased by chiisanogenin. TCP to Con A was significantly increased by chiisanoside and acankoreoside A, but not affected by chiisanogenin, $22{\alpha}-hydroxychiisanogenin$ and acantrifoside A, BCP to LPS was significantly increased by acankoreoside A and acantrifoside A, and slightly increased by chiisanoside, chiisanogenin and $22{\alpha}-hydroxychiisanogenin$.
Periodontal regeneration requires the migration and proliferation of gingival fibroblasts and periodontal ligament cells. These cellular events are influenced and regulated by growth factors and some drugs. The purpose of this study is to examine the effect of Rhizoma coptidis and Centella asiatica extracts on human gingival fibroblasts. Gingival fibroblasts were primarily cultured from extracted premolar with non-periodontal diseases. Cells were cultured with ${\alpha}-MEM$ at $37^{\circ}C$, 5% $CO_2$, 100% humidity incubator for 2 or 3 days, as a measure of cell proliferation potential, it was examined that the DNA synthesis using $[^3H]-thyrnidine$ incorporation, the cell numbers (with or without dye), and cell viabilities. Rhizoma coptidis is increased the proliferation of gingival fibroblasts at concentration of $10^{-9}g/ml$, but Centella asiatica is decreased the proliferation at all concentrations. This study demonstrated that Rhizoma coptidis is a potential mitogen for human gingival fibroblasts in vitro, and we can expect the usefulness of this drug in periodontal regeneration.
Cornis fructus have various biological effects and major chemical components have been tannins, saponins, ursolic acids, gallic acids, linoleic acids, morronisides, cornins and loganins. The main aim of the present study is measurment the effect of chloroform extract from Cornis fructus on proliferation inhibition and Cell death. Cells were cultured in the presence of chloroform extracts from Cornis fructus for 48 h. after 48h treatment of B16/F10 melanoma cells with chloroform extracts, the cells were observed a dose-dependent inhibitions of cell viability with cell death in their proliferation. the cells were estimated cell viability, cell number, total DNA fragmentation and chromatin condensation in a dose-dependent manner. It also caused cell death as measured by cell morphology, DNA fragmentation and nucleus chromatin condensation. therefore, these results suggest that chloroform extracts from C. fructus is inhibitory proliferation and is related to cell death in this cells.
Immunosuppressive potential of 65 kDa buffalo placental protein (bPP65) on B-cell proliferation in vitro and antibody response in vivo was evaluated. B-cell proliferation was estimated by measuring incorporation of tritiated thymidine in buffalo lymphocytes while primary antibody responses against phytohaemagglutinin (PHA) or keyhole limpet haemocyanin (KLH) were evaluated in mice. bPP65 suppressed proliferation of lipopolysaccharide (a B-cell specific mitogen)-stimulated buffalo lymphocytes in vitro indicating suppression of B-cells. This suppression was dose dependent over the protein concentration range $25-100 {\mu}g/ml$. Primary antibody responses in mice against PHA and KLH in presence of bPP65 were lower as compared to in its absence but these were not statistically significant. Amino acid composition data of bPP65 and BSA suggested that bPP65 is different from BSA.
MicroRNAs have been demonstrated to regulate proliferation and apoptosis in many types of cancers, but biological functions in osteosarcomas remain relatively unknown. Here, we found expression of miR-802 to be up-regulated in osteosarcoma tissues in comparison with adjacent normal tissues. Enforced expression of miR-802 was able to promote cell proliferation in U2OS and MG63 cells, while miR-802 antisense oligonucleotides (antisense miR-802) inhibited cell proliferation. At the molecular level, our results further revealed that expression of p27, a negative cell-cycle regulator, was negatively regulated by miR-802. Therefore, the data reported here indicate that miR-802 is an important regulator in osteosarcoma, our findings contributing to a better understanding of important mis-regulated miRNAs in this tumour type.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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