Objective: An experiment was conducted to identify and characterize the circular RNA expression and metabolic characteristics in the liver of Jinhua pigs and Landrace pigs. Methods: Three Jinhua pigs and three Landrace pigs respectively at 70-day were slaughtered to collect the liver tissue samples. Immediately after slaughter, blood samples were taken to detect serum biochemical indicators. Total RNA extracted from liver tissue samples were used to prepare the library and then sequence on HiSeq 2500. Bioinformatic methods were employed to analyze sequence data to identify the circRNAs and predict the potential roles of differentially expressed circRNAs between the two breeds. Results: Significant differences in physiological and biochemical traits were observed between growing Jinhua and Landrace pigs. We identified 84,864 circRNA candidates in two breeds and 366 circRNAs were detected as significantly differentially expressed. Their host genes are involved in lipid biosynthetic and metabolic processes according to the gene ontology analysis and associated with metabolic pathways. Conclusion: Our research represents the first description of circRNA profiles in the porcine liver from two divergent phenotype pigs. The predicted miRNA-circRNA interaction provides important basis for miRNA-circRNA relationships in the porcine liver. These data expand the repertories of porcine circRNA and are conducive to understanding the possible molecular mechanisms involved in miRNA and circRNA. Our study provides basic data for further research of the biological functions of circRNAs in the porcine liver.
Park, Joo-Hee;Kwon, Dae-JinK;Lee, Beom-Ki;Hwang, In-Sun;Park, Choon-Keun;Yang, Boo-Keun;Cheong, Hee-Tae
Reproductive and Developmental Biology
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v.33
no.1
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pp.13-18
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2009
The aim of this study was to examine the microtubule distributions of somatic cell nuclear transfer (SCNT) and parthenogenetic porcine embryos. Porcine SCNT embryos were produced by fusion of serum-starved fetal fibroblast cells with enucleated oocytes. Reconstituted and mature oocytes were activated by electric pulses combined with 6-dimethlyaminopurine treatment. SCNT and parthenogenetic embryos were cultured in vitro for 6 days. Microtubule assembly of embryos was examined by confocal microscopy 1 hr and 20 hr after fusion or activation, respectively. The proportions of embryos developed to the blastocyst stage were 25.7% and 30.4% in SCNT and parthenogenetic embryos, respectively. The frequency of embryos showing $\beta$-tubulins was 81.8% in parthenogenetic embryos, whereas 31.3% in SCNT embryos 1 hr after activation or fusion. The frequency of the embryos underwent normal mitotic phase was low in SCNT embryos (40.6%) compared to that of parthenogenetic ones (59.7%) 20 hr after fusion or activation (p<0.05). The rate of SCNT embryos with an abnormal mitosis pattern is about twice compared to that of parthenogenetic ones. The spindle assembly and its distribution of SCNT embryos in the first mitotic phase were not different from those of parthenogenetic ones. The result shows that although microtubule distribution of porcine SCNT embryos shortly after fusion is different from parthenogenetic embryos, and the frequency of abnormal mitosis 20 hr after fusion or activation is slightly increased in SCNT embryos, microtubule distributions at the first mitotic phase are similar in both SCNT and parthenogenetic embryos.
The purpose of this study was to evaluate the effect of a subsequent infection of porcine reproductive and respiratory syndrome(PRRS) virus to pigs with A pleuropneumonia. Twenty three 7-week-old commercial pigs were infected intratracheally with PRRS virus and/or A pleuropneumoniae serotype 5. Serum antibody titers were examined by an enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) and proportion of porcine leukocyte subpopulations in peripheral blood was examined by flow cytometry. In this experiment, antibodies against PRRS virus and A pleuropneumoniae were detected at 2 weeks and 1 week postinfection and the number of antibody positive pigs were gradually increased. And in proportion to leukocyte subpopulations in peripheral blood of pigs infected with A pleuropneumoniae compared with pigs administrated with saline, the proportion of PoCD4 and N cells were increased(P<0.1). Furthermore, in proportion to leukocyte subpopulations in peripheral blood of pigs infected with PRRS virus followed by A pleuropneumoniae compared with pigs administrated with saline, the proportion of MHC class II, PoCD4 and B cells were significantly increased(P<0.1). The results indicated that dual infection with PRRS virus and A pleuropneumoniae induced the stronger immune responses associated with macrophages and Th cells in pigs than single infection with PRRS virus or A pleuropneumoniae.
Nam, Sun-Young;Kang, Sang Woo;Kim, Jongbae;Lee, Won Kyung
CELLMED
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v.7
no.4
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pp.20.1-20.6
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2017
Inflammation has been linked to various diseases. Especially, fatigue is a frequent symptom in several inflammatory disorders. Therefore, blocking inflammatory process is effective in fatigue. We investigated whether Denmark porcine placenta (DPP) alleviates fatigue by inhibiting inflammatory reaction using forced swimming test (FST) animal model and RAW264.7 cells. In FST-induced fatigue animal model, the mice which received the DPP for 21 days showed decreases of interleukin $(IL)-1{\beta}$ and IL-6 serum levels. Furthermore, our data revealed that lipopolysaccharide (LPS)-induced $IL-1{\beta}$, IL-6, and tumor necrosis $factor-{\alpha}$ secretion were markedly inhibited by DPP in RAW264.7 cells without inducing cytotoxicity. LPS-enhanced nitric oxide secretion and inducible nitric oxide synthase expression were inhibited by DPP. The present study also figured out that these effects of DPP were mediated by blockade of caspase-1 and nuclear $factor-{\kappa}B$ activation. Taken together, our results indicated that DPP could be alleviating fatigue as candidate of anti-inflammatory agent.
These experiments were undertaken as a basic study to develop immunocontraceptive vaccine and to understand the role of zona pellucidae in early fertilization process by identifying the monoclonal and polyclonal antibody to porcine zona pellucidae and polyclonal antibody to mouse zona pellucidae by indirect ELISA and indirect immunofluorescence test. The results obtained in these experiments were summarized as follows : 1. The titer of the antibodies to zona was determined by indirect ELISA using solubilized porcine zona coated plates. Both monoclonal and rabbit polyclonal antibodies showed very high titers ; O.D at 1 : 12,800 dilution of antibodies was still significantly higher than that of non-immunized control serum. Rabbit anti-mouse zona pellucidae sera also reacted with porcine zona pellucidae. 2. By indirect immunofluorescence test strong fluorescences were observed on the egg treated with homologous and heterologous rabbit polyclonal antibodies and FITC lablled 2nd antibodies and found to crossreact strongly with the eggs from the pig and mouse. While weaken fluorescences were observed on the eggs treated with monoclonal antibodies.
Park, Chul;Kim, Bum-Seok;Kim, Yong-Hwan;Cho, Ho-Seong
Korean Journal of Veterinary Service
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v.34
no.1
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pp.1-4
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2011
A surface plasmon resonance imaging (SPRI) assay was developed for measuring porcine circovirus type 2 (PCV2) antibody using a recombinant capsid protein as an antigen. The diagnostic potential of SPRI for detecting antibodies to the PCV2 capsid protein was compared with that of a conventional enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) using 70 pig serum samples taken from 6 pig farms. There was a strong positive correlation between the SPRI and ELISA (n = 70, r = 0.911, P<0.01). Therefore, this recombinant capsid protein can be used as an antigen for serological studies, and the SPRI, a label-free and high-throughput method, is expected to be a valuable tool in the serodiagnosis of PCV2 infection.
This experiment was carried out to establish an effective technique of in vitro maturation of porcine follicular oocytes. Porcine ovaries were collected from an abbatoir and delivered to the laboratory in phosphate buffered saline in an hour. Immatured follicular oocytes were collected from the ovaries and divided into groups by the size of follicles and by the attachment of granulosa cells. The follicular oocytes were cultured in m-KRB solution supplemented with FCS(10%), follicular fluid(10%) or hormones of PMSG(10IU/ml), hCG(10IU/ml ) and $estradiol-17{\beta}(1{\mu}g/ml)$ for 48 hours at $39^{\circ}C$ under an atmosphere of 5% $CO_2$ in air. The results are as follows ; 1. The mean recoveration rate of follicular oocytes was 61.8%. 2. The maturation rate was significantly(p<0.05) higher when the oocytes were collected from large-sized follicles and under good state of granulosa cell attachment. 3. The maturation rate was significantly(p<0.01) promoted when the follicular oocytes were cultured in m-KRB solution supplemented with follicular fluid(74.8%) or hormones and fetal calf serum(70.6%).
Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor (GM-CSF) is a multifunctional cytokine that has been implicated in the regulation of pre-implantation embryo development across several species. The aim of this study was to determine the effects of mouse granulocyte-macrophage colony-stimulating factor (mGM-CSF) on development of porcine parthenotes and nuclear transferred embryos, and on their expression of implantation-related genes. In the presence of bovine serum albumin, mGM-CSF did not increase the percentage of oocytes that developed to the blastocyst stage and at day 7 did not increase oocyte cell number. Addition of 10 mM GM-CSF to protein-free culture medium significantly increased the compaction and blastocoel formation of 1- to 2-cell parthenotes and cloned embryos developing in vitro. However, cell number was not increased when they were cultured in the presence of GM-CSF. Semi-quantitative reverse transcripts polymerase chain reaction (RT-PCR) revealed that mGM-CSF enhances mRNA expression of the leukemia inhibitory factor receptor, but does not influence interleukin-6 or sodium/glucose co-transporter protein gene expression in blastocyst stage parthenotes. These results suggest that mGM-CSF may enhance viability of porcine embryos developing in vitro in a defined culture medium.
The present experiment was conducted to study the effects of partial replacement of spray-dried porcine protein (SDPP) or fish meal with soybean and shrimp protein hydrolysate (SSPH) on growth performance, nutrient digestibility and serum biochemical parameters in weaned pigs. Two hundred and forty 21${\pm}$2 d old pigs ((Pietrain${\times}$Duroc)${\times}$(Landrace${\times}$Large Yorkshire)) with initial weight of 6.9${\pm}$0.5 kg were randomly allocated to five dietary treatments with six replicates per treatment and eight piglets per replicate. The control diet (T1) contained 2% SDPP and 6% fishmeal, and SDPP for experimental diets T2 and T3 was replaced with 1% and 2% SSPH, respectively, on an iso-nitrogenous basis. The fishmeal for experimental diets T4 and T5 was replaced with 1% and 2% SSPH, respectively, also on an iso-nitrogenous basis. The experimental period was 21 days. The results showed that weaned piglets fed the diets containing 1% and 2% SSPH as a replacement for SDPP had similar average daily gain (ADG), average daily feed intake (ADFI), feed/gain (F/G), diarrhea rate and serum biochemical indices e.g. blood urea nitrogen (BUN), total serum protein (TP), albumin to globulin ratio (A/G), globulin (GLO), serum glucose (GLU), and immunoglobulin G (IgG) to those fed the control diet during 0-10 d and 0-21 d of the experiment. The substitution of 1% SSPH on an iso-nitrogenous basis for fish meal appeared to be beneficial for ADG (p = 0.59) and ADFI (p = 0.23) of piglets during the overall period. The digestibility of calcium was higher (p<0.01) in pigs fed diets containing SSPH than on the control diet. Addition of 1% SSPH on an iso-nitrogenous basis for fish meal could increase the digestibilities of dry matter and energy of the diet. Dietary replacement of fish meal with 1% and 2% SSPH had no effect on the concentrations of BUN, TP, A/G, GLO, GLU, and IgG. In conclusion, dietary SDPP or fish meal could partially replace SSPH without any adverse effect on growth performance, nutrient digestibility and serum biochemical parameters in weaned piglets.
The objective of this study was to evaluate the usefulness of detection of PRRSV and PRRSV-specific antibodies in oral fluids for monitoring of PRRSV infection in endemic farms. The level of PRRSV and anti-PRRSV antibodies in serum and oral fluids was evaluated in five age groups of pigs (6, 9, 12, 16 weeks of age and gilts). The samples (25 serums and 5 oral fluids/per a farm) were collected from 5 different farms endemically infected by PRRSV. Both serum and oral fluid samples were tested for PRRSV by quantitative reverse-transcription polymerase chain reaction (qRT-PCR) and for anti-PRRSV antibodies by two commercial PRRSV ELISA kits. ELISA mean s/p ratios (2.98 vs 1.63) and positive rate (84.0% vs 68.8%) of the oral fluid samples showed significantly higher levels but had similar patterns to the seroprofile of the blood samples. The PRRSV positive rate of oral fluid and serum samples was 40.0% and 44.0% respectively. In conclusion, the use of oral fluids for PRRS monitoring in endemic farms is strongly recommended.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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