Using in silico approaches and RACE we cloned a full length trinucleotide (CAG) repeat-containing cDNA (cag-3). The cDNA is 2478 bp long and the deduced polypeptide consists of 140 amino acids of which 73 are glutamines. The genomic sequence spans approximately 79 kb on mouse chromosome 7 and the gene is composed of four exons. Standard and real-time PCR analyses of several mouse tissues showed that the gene is exclusively expressed in the brain and is not detected in embryonic stages. Within the brain, it is expressed throughout the forebrain region with predominant expression in the hypothalamus and olfactory bulb and very low levels in the mid- and hindbrain.
The last step in L-carnitine biosynthesis in eukaryotic organisms is mediated by ${\gamma}$-butyrobetaine hydroxylase (EC1.14.11.1), a dioxygenase that converts ${\gamma}$-butyrobetaine to L-carnitine. This enzyme was previously identified from rat liver and humans, and the peptide sequence of human ${\gamma}$-butyrobetaine hydroxylase was used to search the Neurospora crassa genome database, which led to an identification of an open reading frame (ORF) consisting of 1,407 bp encoding a polypeptide of 468 amino acids. When this protein was expressed in Saccharomyces cerevisiae, the crude cell-free extract exhibited ${\gamma}$-butyrobetaine hydroxylase activity.
To elucidate the effect of gamma-irradiation on the molecular properties of hemoglobin, the secondary, tertiary structure, and the molecular weight size of the protein were examined after irradiation at 0.5, 1, 5, and 10 kGy. Gamma-irradiation of hemoglobin solutions caused the disruption of the ordered structure of the protein molecules, as well as degradation, cross-linking, and aggregation of the polypeptide chains. A SDS-PAGE study indicated that irradiation caused initial fragmentation of the proteins and subsequent aggregation due to cross-linking of the protein molecules. The effect of irradiation on the protein was more significant at lower protein concentrations. Ascorbic acid decreased the degradation and aggregation of proteins by scavenging oxygen radicals that were produced by irradiation. A circular dichroism study showed that irradiation decreased the helical content of hemoglobin with a concurrent increase of the aperiodic structure content. Fluorescence spectroscopy indicated that irradiation decreased the emission intensity that was excited at 280 nm.
고려인삼학회 1998년도 Advances in Ginseng Research - Proceedings of the 7th International Symposium on Ginseng -
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pp.160-167
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1998
Chemical studies of nitrogen compounds of Panax ginseng seem relatively rare, Probably due to the isolation difficulties, subsequently the investigations of biological activities are little. The experimental conditions were established for highly complete extraction of peptides (basic, acidic and neutral) from Panax ginseng. This task was achieved by applying the follow isolation procedure: 1 , the sequential extraction with water, 0.1% TFA in 20% acetonitril and buffer pH 6.5 (water-pyridine-acetic acid 100:3:900) : 2, fractionation by ultrafiltration : 3, n-butanol extraction 4, cation- and anion-exchange chromatography : 5, chromato-electrophoresis. The comparison of red ginseng (xylem Sl pith part) and red ginseng inside white (xylem Sc pith part) was also provided. To analyze the peptide mixture the chromato-electrophoresis method of separation was applied. Optimal conditions for peptides mapping of sample were explored. Our experiments revealed the quantitative difference of peptide between xylem & pith and phloem & cortex part. We have also found the qualitative difference in the composition of polypeptides between normal red ginseng (xylem Sc pith part) and red ginseng inside-white (xylem St pith part)
Two initial models of cold-adapted lipase PsLip1 have been constructed, based on homology with the bacterial lipases Chromobacterium viscosum (CvLip) and Pseudomonas cepacia (PcLip), whose X-ray structures have been solved and refined to high resolution. The mature polypeptide chains of these lipases have 84% similarity. The models of Mod1 and Mod2 have been compared with the tertiary structures of CvLip and PcLip, respectively, and analyzed in terms of stabilizing interactions. Several structural aspects that are believed to contribute to protein stability have been compared: the number of conserved salt bridges, aromatic interactions, hydrogen bonds, helix capping, and disulfide bridges. The 3-dimensional structural model of PsLip1 has been constructed in order to elucidate the structural reasons for the decreased thermostability of the enzyme in comparison with its mesophilic counterparts.
Aberrant expression of the polypeptide N-acetyl-galactosaminyltransferase (GALNTs) has been associated with cancer, but their function(s) in metastasis remains elusive. We have recently identified GALNT14, one of the O-GalNAc glycosylation-initiating enzymes, as a prognostic marker for pulmonary relapse in breast cancer patients. Furthermore, we showed that GALNT14 promotes lung metastasis by the following novel mechanisms: 1) enhancing metastasis initiation by inhibiting the anti-metastatic effect of BMP produced from the lung stroma, 2) exploiting growth signals (e.g. FGF) supplied by macrophages, for their growth into macrometastases in the lung environment. These multi-faceted roles of GALNT14 in lung metastasis are achieved by GALNT14-mediated inhibition and activation of the BMP and FGF signaling pathways, respectively. The link among GALNT14, its downstream pathways and lung metastasis, provides us with an opportunity to develop effective therapeutic intervention for breast cancer.
발현 Vector인 pKK223-3를 이용하여 효모 Thiol-Specific Antioxidant단백질 유전자를 대장균에 도입시켜 이 단백질을 발현시켰다. 이 단백질은 대장균 단백질의 약 1% 정도로 발현되었으며, 물리 및 화학적 특성은 효모의 것과 동일한 특성을 보였다.
임신 26주, 27주의 생명력이 없는 한국인 태아 2예를 대상으로 십이지장 점막에서의 장내분비세포군집(일부 일본인 학자들이 명명한 "Segi's cap")의 출현, 형태 및 구조를 관찰하고. 이들 세포군집에서 내분비세포들의 존재 및 면역조직 화학적 특징들을 관찰하고자, 파라핀조직절편과 냉동박절 후 hematoxvlin과 eosin염색. Azan염색, Comori법, 그리고 면역조직화학염색 표본을 제작, 관찰하여 다음과 같은 결과들을 얻었다 세포들의 군집 형태는 장 내강을 향해서는 오목한 형태였고, 기저막을 향해서는 볼록한 형태였다. 군집을 이룬 세포들은 중층을 이루었고. 술잔세포도 장 내캉목에서 관찰되었다 또한. 내강쪽에 위치한 세포들의 경우 미세융모들의 줄무의가장자리는 관찰되지 않았다 Leuenkephalin, somatostatin, substance p, vasoactive intestinal polypeptide 및 5-HT 항혈청을 이용하여 면역조직염색한 결과 somatostatin 양성반응세포와 5-HT 양성반응세포만이 관찰되었다. 이들 somatostatin 양성반응 세포와 5-HT 양성반응세포들은 대개가 원추형의 세포들로서 개구형을 이루고 있음을 관찰한 수 있었다.관찰한 수 있었다.
Ginseng proteins have been extracted and partially purified by the methods of ammonium sulfate fractionation, heat inactivation and Sephadex G-75 column chromatography. The final three fractions obtained (GI, GII and GIII) were subjected to paper chromatography and SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. Molecular weights of polypeptide chains from each fraction were est-mated by the standard line obtained from the plot of electrophoretic mobilities against the logarithm of molecular weights of standard proteins. Results are as follows: 1) GI showed three protein spots and four polypeptides of which M.W. were 63,000, 60,000, 56,000, 51,000 and 34,200. 2) GII showed four protein spots and five polypeptides with their M.W. of 64,600, 56,000, 45,400, 35,800, end 25,200, 3) GIII showed three protein spots and four polypeptides with their M.W. of 66,000, 63,000, 56,000 and 22,000.
Kim, Bae-Hoon;Lee, Ho-Jeong;Lee, In-Soo;Bang, Sung-Ho;Kim, Joon;Park, Yong-Keun
Journal of Microbiology
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제39권2호
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pp.109-115
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2001
Salmonella typhimurium possesses a cad operon, which contributes to an adaptive response against an acidifying environment. In Escherichia coli, the activation of the cad operon is dependent on cadC, which is located upstream of the operon. However, the activator of cad operon in S. typhimurium has not been known until now. In this study, we selected a putative cadC mutant by trasposon mutagenesis and cloned the cadc of S. typhimurium. Moreover, the cadC mutant was complemented by cadC clone. The cadC gene from S. typhimurium LT-2 consists of 1539 bp encoding a polypeptide ob 512 amino acids, and shows sequence similarity to cadC of E. coli with 53% identity and 67% similarity. The hydrophobicity profile of th S. typhimurim CadC sequence is very similar to E. coli CadC.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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