Oriental fruit moth, Grapholita molesta, is a serious pest on apples. To control this pest in an environmentally friendly method, mating disruption strategy using sex pheromone has been developed. Area-wide application of mating disruption has been needed to be effective, with little understanding on how much size of apple cultivating area should be treated in one time application of the mating disruption technique. On this matter, we needed to determine a minimal mating active zone of G. molesta that should be applied with mating disrupters to be effective. Molecular markers to discriminate a specific population should be developed to trace population migration for reproductive behaviors. Here we developed two effective molecular markers using random amplified polymorphic DNA (RAPD) technique. Different field populations of G. molesta, based on locations and seasons, were analyzed with these markers. In a specific location, G. molesta populations varied in genetic composition with different seasons. Different local populations showed differential variation according to their relative distances among apple orchards. In overall, genetic variation among different populations became lessen with progression of seasons.
Watermelon production is often limited by powdery mildew in areas with a large daily temperature range. Development of resistant watermelon cultivars can protect against powdery mildew; however, little is known about the characteristics of its causal agents. Here, we identified the genus and race of a causal pathogen of powdery mildew in Ansung province of South Korea, and developed molecular markers for the generation of resistant watermelon cultivars. The causal pathogen was determined to be Podosphaera xanthii based on multiple sequence alignments of internal transcribed spacers (ITS) of rDNA. The physiological race was identified as 1W, and the Ansung isolate was named P. xanthii 1W-AN. Following inoculation with the identified P. xanthii 1W-AN, we found inheritance of the resistant gene fitting a single dominant Mendelian model in a segregated population ('SBA' ${\times}$ PI 254744). To develop molecular markers linked to fungus-resistant loci, random amplified polymorphic DNA (RAPD) was accomplished between DNA pooled from eight near-isogenic lines (NILs; $BC_4F_6$), originated from PI 254744 and susceptible 'SBB' watermelon. After sequencing bands from RAPD were identified in all eight NILs and PI254744, 42 sequence-characterized amplifiedregion (SCAR) markers were developed. Overall, 107 $F_2$ plants derived from $BC_4F_6$ NIL-1 ${\times}$ 'SBB' were tested, and one SCAR marker was selected. Sequence comparison between the SCAR marker and the reference watermelon genome identified three Nco I restriction enzyme sites harboring a single nucleotide polymorphism, and codominant cleavage-amplified polymorphic site markers were subsequently developed. A CAPS marker was converted to a high-resolution melt (HRM) marker, which can discriminate C/T SNP (254PMR-HRM3). The 254PMR-HRM3 marker was evaluated in 138 $F_{2:3}$ plants of a segregating population ('SBA' ${\times}$ PI254744) and was presumed to be 4.3 cM from the resistance locus. These results could ensure P. xanthii 1W-AN resistance in watermelon germplasm and aid watermelon cultivar development in marker-assist breeding programs.
This study was carried out to develop the breed-specific DNA markers for breed identification of Korean native goat meat using amplified fragment length polymorphism (AFLP)-PCR techniques. The genomic DNAs of Korean native goat, imported black goat and four dairy goat breeds(Saanen, Alpine, Nubian and Toggenburg) were extracted from muscle tissues or blood. Genomic DNA was digested with a particular combination of two restriction enzymes with 4 base(Mse I and Taq I) and 6 base(EcoR I and Hind III) recognition sites, ligated to restriction specific adapters and amplified using the selective primer combinations. In AFLP profiles of polyacrylamide gels, the number of scorable bands produced per primer combination varied from 36 to 74, with an average of 55.5. A total of 555 bands were produced, 149(26.8%) bands of which were polymorphic. Among the ten primer combinations, two bands with 2.01 and 1.26 kb in M13/H13 primer and one band with 1.65 kb in E35/H14 primer were found to be breed-specific AFLP markers in Korean native goat when DNA bands were compared among the goat breeds. In the E35/H14 primer combination, 2.19, 2.03, 0.96 and 0.87 kb bands detected in imported black goat, 2.13 kb band in Saanen breed and 2.08 kb band in Nubian breed were observed as breed-specific bands showing differences between goat breeds, respectively. The E35/H14 primer combination produced four DNA bands distinguished between Korean native goat and Saanen breed. The is study suggested that the breed specific AFLP bands could be used as DNA markers for the identification of Korean native goat meat from imported black goat and dairy goat meats.
This study was conducted to establish the individual identification system and to estimate the genetic characteristic of Jeju native horse (JNH) using 13 microsatellite markers located on different horse autosomes. The markers were genotyped on 191 animals from five horse breeds including Jeju native horse (JNH). In total, 138 alleles were detected from the genotypes of 13 microsatellite markers. The average heterozygosities ranged from 0.317 to 0.902 and the polymorphic information content (PIC) ranged from 0.498 to 0.799 in JNH. We found that there were significant differences in allele frequencies in JNH when compared with other horse breeds. In ATH4 marker, there were specific allele frequence pattern that some of allele only found in JNH, Mongolian horse (MONG) and Jeju racing horse (JRH). The calculated cumulative power of discrimination (CPD) was 99.9% when nine microsatellite loci were used for analysis in the individual identification system. Also, the matching probability that two unrelated animals would show the same genotypes, was estimated to be $0.60{\times}10^{-10}$. Therefore, in the nine markers used in this study can be used for individual identification in the Jeju native horse population.
Chung, Sung Jin;Park, Su Jeong;Kim, Hun Joong;Yang, Geun-Mo;Choi, Joon-Soo;Oh, Chan-Jin;Jang, Deok-Hwan;Song, In-Ja;Lee, Geung-Joo
Weed & Turfgrass Science
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v.2
no.2
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pp.191-197
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2013
Two medium-leaf ecotypes (CY6069, CY6097) belonging to one species (Zoysia japonica) of Korean lawngrasses were selected in sod production fields in Jang Seong, Korea. They were reported to have distinct morphological and growth rate characteristics different from the preferred medium-leaf type zoysiagrass in Korea. This study was conducted to define further the genotypic difference at the molecular level and to develop DNA marker based on the specific DNA fragment. Polymorphic DNA fragments were first explored by using randomly amplified polymorphic DNA (RAPD) primers, which were then converted into PCR-based sequence characterized amplified region (SCAR) markers. The CY6069-specific primer set amplified about 550 bp successfully, while the CY6097 marker produced the expected 690 bp band, by which those markers were nominated by CY6069_550 and CY6069_690 SCARs, respectively. Together with the reported morphological and other phenotypic features, the SCAR markers confirmed in this study will be useful to identify those medium-leaf zoysiagrass genotypes when they are cultivated with other vegetatively propagated warm-season turfgrasses in sod farms.
This study was carried out to evaluate the suitability of microsatellite markers for varietal identification and genetic relationship of 170 commercial pepper cultivars. The relationship between marker genotypes and 11 pepper cultivars with different morphological traits was also analyzed. Of the 302 pairs of microsatellite primers screened against 11 pepper cultivars, 24 pairs were highly polymorphic in terms of number of alleles. These markers were applied for the construction of DNA profile data base for 170 commercial pepper cultivars. A total of 164 polymorphic amplified fragments were obtained from 24 microsatellite primers. The average polymorphism information content was 0.673 ranging from 0.324 to 0.824. One hundred and sixty four microsatellite alleles were used to calculate Jaccard's distance coefficients using unweighted pair group method. A clustering group of varieties, based on the results of microsatellite analysis, were categorized into 3 major groups corresponding to morphological traits. The phenogram discriminated all varieties by markers genotypes. These microsatellite markers will be useful as a tool for protection of plant breeders' intellectual property rights through variety identification in distinctness, uniformity and stability test.
Rahimi, G.;Nejati-Javaremi, A.;Saneei, D.;Olek, K.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.19
no.4
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pp.463-467
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2006
Genetic profiles of Iranian Holstein young bulls at the national artificial insemination station were determined on the basis of individual genotypes at 13 ISAG's recommended microsatellites, the most useful markers of choice for parentage identification. In the present study a total of 119 individuals were genotyped at 13 microsatellite loci and for possible parent-offspring combinations. A high level of genetic variation was evident within the investigated individuals as assessed from various genetic diversity measures. The mean number of observed alleles per microsatellite marker was 9.15 and the number of effective alleles as usual was less than the observed values (4.03). The average observed and expected heterozygosity values were 0.612 and 0.898, respectively. The mean polymorphic information content (PIC) value (0.694) further reflected a high level of genetic variability. The average exclusion of probability (PE) of the 13 markers was 0.520, ranging from 0.389 to 0.788. The combined exclusion of probability was 0.999, when 13 microsatellite loci were used for analysis in the individual identification system. Inbreeding was calculated as the difference between observed and expected heterozygosity. Observed homozygosity was less than expected which reflects inbreeding of -3.7% indicating that there are genetic differences between bull-sires and bull-dams used to produce young bulls. The results obtained from this study demonstrate that the microsatellite DNA markers used in the present DNA typing are useful and sufficient for individual identification and parentage verification without accurate pedigree information.
Kim, Min Sung;Kwak, Ju Ri;Kim, Tae Hwan;Han, Jae Yong;Park, Ji Been;Jo, Hyeon Kyeong;Suh, Jong-pyo;Lee, Woo-jai
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.53
no.4
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pp.492-498
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2020
Despite its economic importance, olive flounder Paralichthys olivaceus aquaculture industry is facing a crisis with a continuous production decline. There have been many solutions to overcome the complicate predicament proposed. Increasing genetic diversity and discovering new commercial value through selective breeding are among them. The aims of the present study are to increase the selection power of the golden flounders. We examined the genetic diversity of the breeder population of golden flounders and developed selective markers for the golden flounder population. The 6 microsatellite (MS) markers were selected from melanogenesis-related genes, which are believed to be involved in the pigmentation of fish. All markers were polymorphic (except PO4) and 5 of them had PIC value of 0.6 or above. All makers had distinctive alleles indicating either normal or golden individuals. For examples, from PO4 marker, the frequency of an allele (316) in the golden population was 100% and in normal population was 0% (P<0.001). Although some more studies with more samples at the later generations should be performed to confirm this result, the 316 allele from PO4 marker could be a distinctive tool for decision of the colors in olive flounders at an early stage of the life cycle.
Two different types of molecular markers, simple sequence repeat (SSR) and single nucleotide polymorphism (SNP), were used to measure genetic diversity among five Korean, eight Thai, and three wild soybeans. For SSR analysis, a total of 20 markers were surveyed to detect polymorphisms. For SNP analysis, four primers were designed from consensus sequence regions on disease resistance protein homolog genes, and used to amplify the genomic region. The PCR products were sequenced. A number of polymorphic SSR and SNP bands were scored on all genotypes and their genetic similarity was measured. Clustering analysis was performed independently on both types of markers. Clustering based on SSR markers separated the genotypes into three main groups originated from Korea, Thailand, and wild soybeans. On the other hand, two main groups were classified using SNP analysis. It seemed that SSR was more informative than SNP in this study. This may be due to the fact that SNP was surveyed on the smaller genomic region than SSR. Grouping based on the combined data of both markers revealed similar results to that of SNP rather than that of SSR. This might be due to the fact that more loci from SNP were considered to measure genetic relatedness than those from the SSR.
This study was carried out to assess the potential of SSR markers for variety identification by comparing SSR markers and morphological traits in tests of distinctiveness, uniformity, and stability (DUS) of pepper (Capsicum annuum L.) varieties. Twenty-seven SSR markers were polymorphic in 66 pepper varieties, revealing a total of 89 alleles. Average polymorphism information content (PIC) value was 0.529, ranging from 0.03 to 0.877. Cluster analysis of the band patterns separated the varieties into three groups corresponding to varietal types. Morphological trait-based clustering showed some degree of similarity to dendrogram topologies based on the SSR index. However, no significance correlation was found between the SSR and morphological data. SSR markers could be used to complement a DUS test of a candidate variety and to select complimentary varieties by pre-screening existing varieties in the context of protecting new varieties of pepper.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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