For the purpose of the methodological development to convert the food wastes into resources, we have attempted to culture the mushroom hypha, Pleurotus ostreatus. The food-wastes were mixed with distilled water, and the mixture was autoclaved to produce fluid, which was centrifugated and used as the growth media. Concentrations of the food wastes extracts were prepared with 10, 20, 30, 40, and 50%(W/V), and the initial pH were set variously with 4, 5, 6, and 7. These were cultured for 9 days at the temperature of $25^{\circ}C$ and the rotation rate of 120 rpm. The result is that the fluid form of the mushroom hypha have been grown best at the concentration of 30% and the optimal pH was 5 and 6.
To assess the effects of a proton beam on oyster mushrooms (Pleurotus ostreatus), the genetic diversity and phylogenetic relationships among strains induced by a proton beam were investigated based on a clustering analysis. According to an AFLP DNA polymorphism analysis, the induced strains were divided into four groups that coincided with the dose. When applying proton-beam radiation, the dissimilarity among the induced strains increased when increasing the dose. When using more than 400 Gy, the genetic dissimilarity of the irradiated strains was 46-58%. Thus, evaluating the induced strains using the AFLP technique was effective in revealing the mutation effect of the proton beam.
Double-stranded RNA (dsRNA) viruses and single-stranded RNA(ssRNA) viruses were detected in a strain of Pleurotus mushroom cultivated in a farm. Those fungal virsus were purified in the pH 6.0 or pH 7.2 using CsCI or Cs$_{2}$SO$_{4}$ buoyant density centrifugation. Each viral particles were not completely separated at any trials. However, mushroom bacili-form virus contains a single major nucleic acid with 0.7 Kb ssRNA, which might code for 20 Kd viral capsid protein. The dsRNAs are encapsidatred into spherical-form viruses, whereas ssRNA viral genomes are encapsidated into two different sizes of bacili-form particles. A healthy-looking mushroom also contained some spherical-form viruses with dsRNAs. Laboratory strains of Pleurotus ostreatus and a cultivated strain of P. sajor-caju did not show any viral particles. Mushrooms with specific disease symptoms. however, contained at least four different sizes of spherical-form viruses. Thus, we concluded that a bacilli-form virus case a severe disease symptoms of adnormal on mushroom development.
한국산 느타리버섯 균주의 균사, Primordia, 갓, 줄기의 전피영동 isozyme 패턴을 비교한 결과 자실체중 Primordia, 갓, 줄기의 패턴은 모두 아주 유사하였으나 균사의 패턴은 자실체의 것과 많은 차이가 있었다. 자생지역이 다른 한국산 Pleurotus ostreatus의 전기영동 isozyme 패턴중 Malate Dehydrogenase, Acid phosphatase는 유사하였으나 Esterase, Peroxidase, Leucine amino peptidase, Superoxide Dismutase의 패턴은 차이가 있었다. Pleurotus osteatus, P. cornucopiac, P. florida의 종간 Esterase 밴드 패턴은 많은 차이가 있어 전기영동에 의한 느타리버섯 종의 가능하였다.
느타리 Pleurotus ostreatus와 여름느타리 Pleurotus sajor-caju의 영양요구주로부터 분리한 원형질체를 polyethylene glycol로 융합하여 종간 이질핵체 heterokaryon를 획득하였다. 불화합 균주간에는 9 융합조합에서 70개 융합주를 획득하여 7 융합주의 자실체를 유도하였으며 화합 균주간에는 1조합에서 모두 자실체를 형성하였다. 화합 균주간 융합주를 제외하고는 불화합성간 융합체는 꺽쇠연결체 clamp connections가 없었고 한천배지나 액체배지에서는 자실체를 형성하지 않았다. 그러나 활엽수톱밥과 미강이 혼합된 배지에서 균사가 완전히 성장한후 일정한 광과 온도를 처리한 결과 꺽쇠연결체 있는 균사가 다시 성장하였으며 이들 균사에서 버섯자실체가 형성되었다. 버섯자실체는 양친의 중간형태로 갓 색깔도 양친이 혼합된 orange grey-brownish grey로 나타났다. 그러나 다소의 자실체 형질인 자실층 hymenium, 버섯대, 생장습성은 느타리를 닮았는데 특히 여름느타리가 단생 closely scattered인데 비해 느타리는 속생 caespitose으로 느타리와 유사하였다. 자실체는 모두 꺽쇠연결체를 가졌으며 조직배앙한 결과 균사가 모두 꺽쇠연결체를 가져 본래 융합주와는 다른 형태로 변하였다. 6융합조합 8균주의 $F^2$에서의 유전형질 분리와 유전자 재조합을 분석한 결과 원영양형 prototroph이 양친 느타리형, 여름느타리형, 영양요구성 유전자 재조합형에 비해 많이 분리되었으며 3개조합에서 양친에 없는 유전자좌가 나타났다. 자실체가 형성되지 않는 융합주 P188과 사철느타리 ASI 2-3-rib와 균사접합 한 후 임성을 유도하여 유전분석한 결과 원영양형이 적게 분리되었고 여름느타리 양친형이 분리되지 않았으며 3친주 형질이 모두 유전자 재조합형으로 분리되었다.
맛느타리버섯(P. sapidus)의 균사체로부터 핵을 직접 분리하여 느타리버섯(P. ostreatus)의 원형질체에 전이시켜 다음과 같은 결과를 얻었다. 맛느타리버섯의 핵을 느타리버섯의 Arginine 영양요구성 균주 원형질체에 전이하여 얻은 균주의 균총 형태는 3종류로 구분되었으며, 형태 1은 균총이 두모균주의 모양으로 명확히 분리되었고, 형태 2는 균총은 분리되나 모균주와 다른 형태, 형태 3은 균총의 분리현상이 없이 안정하고 균일하게 생장하였다. 등전점 전기영동으로 핵 전이균주와 모균주의 Esterase, Malate dehydrogenase, Superoxide dismutase의 동질효소 pattern을 비교한 결과 핵 전이균주들은 모균주와 차이가 있었으며, 특히 형태 3의 두 균주는 모균주에서 볼 수 없는 새로운 band가 발견되었다.
We developed and characterized 36 polymorphic microsatellite markers for the oyster mushroom (Pleurotus ostreatus). In total, 169 alleles were identified with an average of 4.7 alleles per locus. Values for observed ($H_o$) and expected ($H_E$) heterozygosities ranged from 0.027 to 0.946 and from 0.027 to 0.810, respectively. Nineteen loci deviated from Hardy-Weinberg equilibrium. Significant (P<0.05) excess heterozygosity was observed at nine loci. Linkage disequilibrium (LD) was significant (P<0.05) between pairs of locus alleles. Cluster analysis revealed that five species of genus Pleurotus made a distinct group, and the individual cultivars were grouped into major five groups from G-1 to G-5. The diverse cultivars of P. ostreatus were discriminated and the other four species revealed a different section in the UPGMA tree. These microsatellite markers proved to be very useful tools for genetic studies, including assessment of the diversity and population structure of P. ostreatus.
현재 70개 이상의 느타리 품종이 유통되어 재배되고 있다. 본 연구에서는 81개 품종을 수집하여 핵산지문법으로 분석하였다. 이중 수한과 그 유사품종에서 특이하게 나타나는 밴드를 이용하여 수한 품종에 특이적인 SCAR marker로 개발하였다. 수한 품종 특이 band에 대한 clone을 기존에 알려진 유전자 염기서열과 유사성이 있는지를 확인한 결과 POMFBO1 Pleurotus ostreatus cDNA clone MFB02-A05, mRNA sequence와 92%의 homology를 나타냈고, 등록된 아미노산 서열과의 유사성을 확인한 결과 큰졸각버섯인 Laccaria bicolor의 predicted protein과 가장 높은 sequence homology (BlastX score = 73.9, E value = $5e^{-25}$)를 보였다. 본 연구를 통하여 개발된 수한특이 마커는 정확한 품종구분이 요구되는 종균유통 과정에서 수한계통 품종을 구분하는 유용한 마커로 이용될 것으로 기대된다.
Kim, Eun-Kyoung;Youn, Hye-Sook;Koo, Yong-Bom;Roe, Jung-Hye
Journal of Microbiology
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제35권4호
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pp.264-270
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1997
The structure of plasmid mlp1, a linear 10.2kb mitochondrial plasmid of Pleurotus ostreatus NFF A2 was determined by restriction enzyme mapping and partial sequencing. The plasmid encodes at least two proteins; a putative RNA polymerase showing homology to yeast mitochondrial RNA polymerase and to viral-encoded RNA polymerases, and a putative DNA polymerase showing significant homology to the family B thpe DNA polymerases. It also contains terminal inverted repeat sequences at both ends which are longer than 274 bp. A 1.6 kb EcoRI restriction fragment of m1p1 containing the putative RNA polymerase gene did not hybridize to the nuclear or motochondrial genomes from P. ostreatus, suggesting that it may encode plasmidspecific RNA polymerase. The gene fragment also did not hybridize with the RNA polymerase gene (RPO41) from Saccaromyces cerevisiae. The relationship between genes in m1p1 and those in another linear plasmid pC1K1 of Claviceps purpurea was examined by DNA hybridization. The result indicates that the genes for DNA and RNA polymerases are not closely related with those in C. purpurea.
갈반병이 유발된 느티리버섯과 비섯 재배장 주변 토양에서 채집한 균주로부터 갈반병 원인균주 4개와 갈항균주 3개를 선발하였다- 선발된 균주를 API 2DE kit에 의해 동정한 결과 갈반병 원인 균주 P-24, P-28은 Pseudomonas putida로 P-27, P-33은 P.tolaasii로 동정되었으며, 길형균주 중 A-ll, A-20은 Pseudomonas fluorescence로 A-29는 Pseudοmonas sp.로 동정되었으며, 그 중 A-ll 균주가 버섯 균사 및 자실체에 해를 주지 않으면서 길항성이 우수한 균주로 선발되었다. 길항성은 갈반병 원인균 대 길항균의 농도비를 1:1로 처리하였을 때 길항성이 양호하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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