An efficient procedure was developed for adventitious shoot bud induction and plantlet regeneration from various explants of the ten genotypes of Pepper (Capsicum annuum L.) using Thidiazuron (TDZ). Among various treatments at 1.0-3.0 mg/L TDZ Induced maximum number of adventitious shoots depending upon the explant type and genotype compared to other treatments. Among the explants tested, leaf induced maximum number of adventitious shoots than the cotyledons. TDZ-mediated organo-genesis was possible in 10 pepper cultivars, the extent of the response being genotype-dependent. Of the ten genotypes tested, C. annuum cvs CA960, $G_4$ and X-235 were produced maximum number of adventitious shoots and Sell was the least, and all other genotypes gave moderate response. Elongation of multiple shoots was observed on medium supplemented with SA (0.05 mg/L) in combination of IAA (0.05 mg/L). Differences in ability for in vitro shoot regeneration and elongation depend upon the variety and explant type. The elongated shoots were success. Fully rooted on MS medium containing at 1.0 mG/L IAA. Plantlets regenerated from different explants of ten genotypes were found to be diploid (2n=24) and were devoid of any chromosomal aberrations. Regenerated plants were successfully established in soil where 85-90% of them developed into morphologically normal and fertile plants.
Plantlet regeneration from the shoot apex was studied in three different genotypes of the chinese yam (Dioscorea opposita Thunb) cv. Jnagma and Danma, Dunggunma. The effects of plant growth regulators and inorganic salts concentration of the culture medium on bud induction and shoot growth were examined. The combinations of 0.2 mg/L BAP + 0.2mg/L kinetin, 0.01mg/L NAA + 0.2 mg/L kinetin and a single treatment of 0.2mg/L BAP were equally effective for bud and shoot formation from the shoot apices in the three cultivars. Auxin (2,4-D, NAA) treatment enhanced calli formation from the cultured apices. Also, the shoot apices of the cv. Dunggunma produced more callus and buds on the culture medium (MS) containing 0.05mg/L NAA and 0.5-1.0mg/L SAP. Lower salt strength of medium inhibited shoot elongation but did not have much effect on the shoot and bud induction from the shoot apices. These results will be useful to obtain disease-free plants of the Chinese yam.
Kim, Young Jin;Park, Tae Il;Kim, Hyun Soon;Suh, Sug Kee;Kim, Hag Sin;Yun, Song Joong
Journal of Plant Biotechnology
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제6권2호
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pp.107-111
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2004
To establish an efficient acclimation system for regenerated plantlets of soybean, we used various media with hydroponic nutrient solutions before regenerants were transplanted into soil. The hydroponic nutrient solution was essential for the survival of the plantlets. The vermiculite with nutrient solution at pH 5.5 was found to be the best medium with 97-100% survival rate and better growth of regenerants plantlets. Regeneraed grew best in the following order of solutions: Yoshida solution, modified Yoshida solution, SoyI, Soy II, and MS medium. However, Soy I solution (EC 2.9 mS/cm), developed by the Honam Agricultural Research Institute proved to be the most effective for acclimation in terms of the time required for vigorous growth and economical use of chemicals.
The coat protein (CP) gene of Apple mosaic virus (ApMV), a member of the genus Ilarvirus, was selected for the design of virus-specific primers for amplification and molecular detection of the virus in cultivated apple. A combined assay of reverse transcription and polymerase chain reaction (RT-PCR) was performed with a single pair of ApMV-specific primers and crude nucleic acid extracts from virus-infected apple for rapid detection of the virus. The PCR product was verified by restriction mapping analysis and by sequence determination. The lowest concentration of template viral RNA required for detection was 100 fg. This indicates that the RT-PCR for detection of the virus is a 10$^3$times more sensitive, reproducible and time-saving method than the enzyme-linked immunosorbent assay. The specificity of the primers was verified using other unrelated viral RNAs. No PCR product was observed when Cucumber mosaic virus (Cucumovirus) or a crude extract of healthy apple was used as a template in RT-PCR with the same primers. The PCR product (669 bp) of the CP gene of the virus was cloned into the plasmid vector and result-ant recombinant (pAPCP1) was selected for molecule of apple transformation to breed virus-resistant transgenic apple plants as the next step. This method can be useful for early stage screening of in vitro plantlet and genetic resources of resistant cultivar of apple plants.
The effect of auxin transport inhibitor (TIBA and PCIB) or auxin synergist (phloroglucinol) on somatic embryo maturation and germination in Japanese larch (Larix leptolepis) was examined. The addition of 15.8 mg/L ABA+5.0 mg/L PCIB showed most promoted the maturation of cotyledon -staged somatic embryos (177.7/90 mg ESM). In contrast, with treatment of 5.0 mg/L PCIB or 5.0 mg/L TIBA, no somatic embryos were obtained. Considering from this result, PCIB or TIBA alone could not substitute for exogenously supplied ABA for maturation of somatic embryos. In the test of below concentration of 5.0 mg/L PCIB, the highest results were recorded in 15.8 mg/L ABA+2.0 mg/L PCIB (109.3/90 mg ESM) or 15.8 mg/L ABA+5.0 mg/L PCIB (103.7/90 mg ESM). However, 5.0 mg/L phloroglucinol (0/90 mg ESM) or no ABA addition (3/90 mg ESM) had little influence on somatic embryos maturation. In germination study, the highest frequency of plantlet regeneration obtained from the somatic embryos which had matured on 15.8 mg/L ABA+5.0 mg/L PCIB (67.9%). However, either 5.0 mg/L PCIB nor 5.0 mg/L TIBA resulted in obtained from plantlets.
식물생장조절제의 종류와 농도를 모색하여 할미꽃의 발근 최적 조건을 조사하여 정상적인 재분화체를 획득하고자 하였다. 지금까지의 선행연구를 토대로 최적조건에서 shoot를 유도시킨 후 발근 유도 생장조절제에 바로 옮기면 shoot가 너무 작아 재분화체가 성장하지 못하고 고사되었다. 1/2 MS에서 키운 shoot를 3.0 mg/L NAA를 첨가한 배지에서 3일간 생장시킨 후, 1/3 MS로 옮겨 치상 한 경우, 약 10일 전후에 뿌리의 유도가 관찰되었다. 이렇게 뿌리가 유도된 재분화체는 염의 농도와 설탕의 농도를 동시에 순차적으로 낮추어 순화처리되었다.
배지내 생장억제제의 첨가는 투명화 방지에 효과가 없었다. 기내에서 생산된 건전묘와 투명화묘에 있어서 잎과 기공의 구조적 및 형태적 특징을 조사해본 결과 기내건전묘나 포장활착묘는 책상 및 해면세포의 발달이 양호하고 세포간극이 차지하는 면적이 적었으나 기내 투명화묘는 책상세포의 발달이 불량하고 세포간극이 차지하는 면적이 현저히 많았다. 기공의 특성을 조사해본 결과 기내 건전묘는 포장활착묘에 비해 기공의 크기가 작았으며 둥근형태를 띄고 있었으나 투명화묘에 비해 공변세포와 부세포의 구별이 명확하였다. 또한 투명화묘에서는 기공의 형태가 비정상적이었고 표피 왁스의 발달이 전혀 관찰되지 않았다.
Comparative studies on medium supply in bioreactors (raft, immersion and ebb and flood) have revealed that multiplication and growth of Alocasia Amazonica were greatest in the raft system, while lowest in ebb and flood system. In the raft system, the basal part of the shoots was continuously in contact with medium, which enabled a constant uptake of nutrients as well as aeration to the explants. The number and the size of leaf stomata were higher in the raft system compared with immersion and ebb&flood system. In the immersion system, plantlets were deformed and epidermal cells in leaves were irregular with a large intercellular space. The results suggested that the medium supply should be controlled properly to maintain normal and healthy plantlets during liquid cultures in bioreactors Which affects morphology and physiology Of the plantlets.
Transformed rice plantlet were recovered from protoplasts by electroporation with the plasmld pB 1121, which contain the plant expressible NPT-II and GUS genes. Embryonic cell suspension culture was established with embryonic callus induced from mature seeds of rice (Oryza sativa L. cv. Dong-jin) on the MS medium supplemented with 2.0 mg/l 2,4-D, 0.5 mg/l kinetin, 3% sucrose. Protoplasts isolated from embryonic cell suspensions were electroplated and then poterltialty-transformed tissues were selected by growth on the medium containing 200 mg/l kanamycin sulfate. When subjected to GUS assay, they stained blue, indicating the expression of the inserted GUS genes. Plantlets were regenerated from electroplated protoplasts on the hormone free MS medium. Transferred foreign genes in the plants were confirmed by southern hybridization. These results support use of electroporation for transformation of these important cereal plants.
황칠나무의 선발된 우량개체군의 집단재배시 우량해체간의 교잡에 의해서 형성된 종자를 증식하기 위한 기내배양체계를 확립하기 위해서 기내 발아, 증식, 발근에 적합한 식물생장조절제를 구명하기 위하여 본 실험을 실시한 결과는 다음과 같다. 황칠나무 종자의 무균발아에 적합한 배지로는 MS(Murasinge Skook)기본배지가 발아율이 높고 유식물체(plantlet)의 생장이 양호하여 알맞는 배지로 판단 된다. 기내에서 신초의 증식과 생육에 효과적인 식물생장조절제는 사이토키닌(BAP 0.1~l.0 mg/l)과 오옥신(NAA 0.5~1.0 mg/l)의 혼용처리가 효과적이었다. 또한 기내의 발근은 오옥신의 첨가에서 쉽게 유도되었으며, 그 중에서 NAA1.0 mg/l첨가에서 가장 양호하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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