Superoxide dismutase (SOD)를 많이 생산하는 신기능성 오이(Cucumis sativus L.) 과실을 개발하기 위하여, 발아 7일째의 자엽절편에 완두콩(Pisum sativum) 유래 MnSOD 유전자를 Agrobacterium tumefeciens LBA4404의 매개로 형질 전환시켰다. 1mg/L zeatin, 0.1mg/L IAA, 300mg/L claforan, 100mg/L kanamycin이 포함된 선발배지에서 부정아를 유도한 후, 1주일 간격으로 계대배양하면서 kanamycin 저항성 형질전환체를 선발하였다. 선발배지 배양 6주 후 kanamycin 저항성을 가진 부정아만을 절단하여 0.2mg/L NAA가 함유된 발근배지에 옮겨 뿌리를 유도한 후, 화분에서 순화시켰다. 소식물체의 잎에서 DNA를 분리하여 PCR 로 분석한 결과, 3개의 식물체에서 선발마커유전자인 NPTII 유전자가 존재함을 확인하여 SOD 유전자가 오이에 도입됨을 확인할 수 있었다. 이중 한 개체의 과실에서 SOD 함량이 무처리개체에 비해 약 3.2배 높았으며 native gel 전기영동에서 도입한 SOD isoenzyme 밴드가 강하게 검출되었다.
Gang Deok Han;HanGyeol Lee;Jae-Hyeok Park;Young Jae Yun;Gee Woo Kim;Sangyun Jeong;So-Yeon Moon;Hye-Young Seo;Young-Cheon, Kim;Woo Duck Seo;Jeong Hwan Lee
Journal of Plant Biotechnology
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제50권
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pp.70-75
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2023
In legumes, soyasaponins, one of triterpenoid saponins, are major components of secondary metabolites with a more diverse array of bioactive chemicals. Although the biosynthetic pathway of soyasaponins has been largely studied in soybean, the study on the soyasaponin contents and biosynthesis-related gene expression in pea (Pisum sativum L.) is poorly understood. Here, we found the accumulation of only soyasaponin Bb component in the sprouts of two Korean domestic pea cultivars (Dachung and Sachul). This pattern was consistent with our observation that increased expression of PsUGT73P2 and PsUGT91H4 genes, but not PsCYP72A69, could be responsible for biosynthesis of only soyasaponin Bb in pea by examining their gene expression. However, gradual accumulation of soyasaponin Bb at developmental stages was not consistent with the expression of PsUGT73P2 and PsUGT91H4, suggesting that the changes of their protein activities may affect the accumulation patterns of soyasaponin Bb. We also revealed that the increased expression levels of PsUGT73P2 and PsUGT91H4 during light to dark transition led to increase of soyasaponin Bb contents. Collectively, our results provided a molecular basis of metabolic engineering for enhancing useful soyasaponin Bb metabolites in Korean domestic pea cultivars.
Five strains of the Genus Rhizobium were isolated from the nodules of five leguminous plants respectively. They were identified according to Bergey's Manual together with the results of Vincent. The flagella of each strains were observed by electron microscope using negative staining with PTA and metal shadowing with chromium. Five host plants and identified Rhizobium strains were as. follows. Pisum sativum.....R. leguminosarum Phaseolus vulgaris.....R. phaseoli Trifolium repens.....R. trifolii Glycine max.....R. japonicum Lupinus grandiflorus.....R. lupini Electron micrographs showed that R. leguminosarum and R. phaseoli had 4 peritrichous flagella, where as R. trifolii had 5 peritrichous flagella. On the other hand, R. japonicum and R. lupini had 1 subpolar flagellum.
The effects of Rhizobium inoculant, compost, and nitrogen on nodulation, growth, dry matter production, yield attributes, and yield of pea (Pisum sativum) var, IPSA Motorshuti-3 were assessed by a field experiment. Among the treatments Rhizobium inoculant alone performed best in recording number and dry weight of nodules/plant. The highest green seed yield of 8.38 ton/ha (36.9% increase over control) and mature seed yield of 2.97 ton/ha (73.7% increase over control) were obtained by the application of 90 kg N/ha. The effects of 60 kg N/ha, Rhizobium inoculant alone and Rhizobium inoculant along with 5 ton compost/ha were same as the effect of 90 kg N/ha in recording plant height, root length, dry weight of shoot, and root both at preflowering and pod filling stages, number of mature pods/plant, number of mature seeds/pod, 1000-seed weight, green, and mature seed yields of pea.
The optimal conditions for the protoplast isolation from the leaves of pea (Pisum sativum L. cv. Sparkle) and barley (Hordeum vulgare L. cv. Baecdong) were determined in order to achieve a somatic hybridization between two species. It was revealed that the use of 0.5M sorbitol as an osmoticum was appropriate for pea. The yield of intact protoplasts was the highest (40%) when pea leaves were incubated in the enzyme solution for 4 hours. In case of barley, the optimal concentrations of cellulase, pectinase and mannitol as the enzyme solution were 2%, 1% and 0.35M, respectively. And the yield of barley protoplasts was the highest(87%) when leaves were incubated in this enzyme solution for 3.5 hours. A fusion of protoplasts from pea and barley was induced by PEG treatment enriched with calcium salts within 60 minutes.
In order to investigate the host range of the mosaic disease of black locust in the Chunchon area, the sap of the mosaic-diseased leaves of black locust itself and the cowpea leaves infected with the above mentioned sap, were inoculated to 53 species of plants belong to 12 families. As to the result, no difference in infection was found as related to the virus sources, and the infection was recognized in 4 species of the family Chenopodiaceae and 8 species of the family Leguminosae. The plants recognized as hosts are as follows: the plants which showed local infection are Chenopodium album, Ch. ambrosioides, Ch. quinoa; the plants which showed systemic infection are Chenopodium amaranticolor, Phaseolus vulgaris, Robinia pseudo-acacia, Vigna sinensis; and Astragalus sinicus, Melilotus indicus, Phaseolus angularis, Pisum sativum and Vicia faba were recognized as carriers. Through investigating its host ranges and symptoms, this mosaic virus of black locust seems not to be regarded as the group of the black locust mosaic virus in southeastern Europe reported by Milinko et al (1961). And, too, it is thought hardly to exist in combination with the cowpea mosaic virus. It appears, therefore, that this mosaic virus was confined to that of black locust.
Treatment of microsomal vesicles isolated from etiolated Pisum sativum L cv. Alaska epicotyl tissue with agents inhibiting protein dephosphorylation, namely NaF and/or ATP, resulted in increased binding of the phytotropin NPA to the putative auxin efflux carriers localized on the plasma membrane. The phytotropin effect was especially conspicuous if the vesicles were simultaneously treated with Triton X-100. Kinetic analysis of the binding indicated the existance of two distinct sites for NPA, each having different affinities. Increased binding of the phytotropin to the membrane where protein dephosphorylation was inhibited was attributable to the increased ligand affinity of both sites. Treatment of tissue segments with flubride was found to enhance in vivo auxin transport. Implications of covalent modification of the auxin efflux carrier complex for the regulation of membrane transport of auxin molecules are discussed.
An efficient shoot regeneration condition for pea cv. 'Sparkle' was developed by using optimum explant, plant growth regulator concentrations, and pretreatment of BA onto explant. The average shoot number per explant showed the highest on two kinds of shoot induction media (MSB5 media containing 2 mg/L BA and a combination of 2 mg/L BA and 1 mg/L TDZ) when cotyledonary node explants were cultured. Moreover, the pretreatment of explant in 200 mg/L BA solution was found to be more effective in shoot induction than that of non-pretreatment. By histological study, cell division and proto-meristem were formed near the surface of the sub-epidermal and epidermal cell layers of cotyledonary node in earlier than 3 days after culture. The analysis of genetic stability of regenerants by using thirteen ISSR markers showed that in vitro regenerated plants showed polymorphism with 8.3% compared with their mother plants.
본 연구는 완두나물로 활용 가능한 유전자원을 선발하고, 그에 적합한 재배조건을 설정하고자 재배 온도 및 기간에 따른 완두나물의 재배특성 및 항산화 활성을 분석하여 완두를 이용한 채소용 나물 최적 재배 조건을 구명하고자 실시하였다. 1. 완두 유전자원 38점 중 완두 나물로 이용 가능한 자원으로 PI269803, PI343278, PI343283, PI343300와 PI343307을 1차적으로 선발하였다. 2. 1차 선발된 완두자원을 대상으로 완두나물 재배 조건을 설정하기 위하여 $20^{\circ}C$, $23^{\circ}C$와 $25^{\circ}C$에서 각각 7일간 재배하였다. 그 결과 전장과 배축장은 $20^{\circ}C$와 $25^{\circ}C$에 비해 $23^{\circ}C$에서 가장 높게 증가하였다. 3. 재배온도별 나물수율은 $23^{\circ}C$에서 가장 높게 나타났으며, 유전자원 PI269803와 PI343300이 다른 자원에 비해 높은 나물수율을 나타내었다. 4. 재배온도별 완두나물의 조단백질 함량을 분석한 결과 온도에 따른 조단백질 변화는 나타나지 않았다. 5. 재배 온도별 완두나물의 폴리페놀 함량과 자유 라디칼 소거능을 측정함으로써 항산화 특성을 조사하였다. 그 결과 PI343278와 PI343283에서는 재배 온도가 증가함에 따라 폴리페놀 함량과 자유 라디칼 소거능이 감소하는 경향을 나타내었다. 그러나 PI269803와 PI343300에서는 $20^{\circ}C$와 $25^{\circ}C$에 비해 $23^{\circ}C$에서 높은 폴리페놀 함량과 항산화 활성을 나타내었다. 6. 높은 나물수율과 항산화 특성을 보이는 PI269803과 PI343300은 완두나물 이용에 적합한 자원으로 예상된다.
본 시험은 우선 논에서 여름철 사료작물과 연계할 수 있는 겨울철 재배에 적합한 월년생 두과작물로 이듬해의 개화를 통한 경관효과와 수량이 우수한 초종의 선발을 목적으로 충남 천안시 성환읍에 위치한 벼재배 농가포장에서 2006년 9월부터 2007년 5월까지 수행되었다. 월년생 두과 사료작물로서 Hairy vetch(Vicia villsa), Crimsom clover(Trifolium incarnatum), Berseem clover(Trifolium alexandrinum), Persian clover(Trifolium resupinatum), Balansa clover(Trifolium michelianum), Sweet clover(Melilotus officinalis) 및 Forage pea(Pisum sativum) 각 1품종을 공시하였다. 파종 45일후 출현율은 Crimsom clover, Hairy vetch, Forage pea 및 Berseem clover가 90%이상으로 높았으며 월동율은 Hairy vetch와 Crimsom clover가 각각 98%와 95%로 가장 높았다. 경관과 관계되는 개화율은 수확시(5월 10일)에 Crimson clover가 100%로 조사되었다. 생초수량과 건물수량은 Crimson clover가 각각 72,556 kg/ha과 16,062 kg/ha으로 가장 높았다. 조단백질 수량은 Hairy vetch가 2,929 kg/ha으로 가장 높았지만 Crimson clover(2,169 kg/ha)와는 차이가 없었다(p<0.05). TDN 수량은 Crimson clover가 9,007 kg/ha으로 가장 높았지만 Hairy vetch(7,366 kg/ha)와는 차이가 없었다(p<0.05). 이상의 결과로부터 월동율, 수량 그리고 경관 등을 고려할 때 Crimson clover가 가장 적합한 것으로 사료되지만 추후 보완 연구가 필요하다고 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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