Tricholoma matsutake is a traditional favorite food in East Asia, cultivated in fairy rings called "shiro," which are found near Pinus densiflora. For effective artificial cultivation of Tri. matsutake, microorganisms from symbiotic fairy rings are co-cultivated. In this study, one bacterial isolate (Y22_B35) and two fungal isolates (Y22_F64 and Y22_F68) displayed growth-promoting effects on Tri. matsutake mycelium (158.47, 125.00, and 122.26% enhanced growth, respectively). For identification, 16S rRNA or ITS regions from the microorganisms¡¯ genomes were sequenced. Other sequences, including BenA, CaM, and RPB2 were sequenced in the fungal isolates. The bacterial isolate Y22_B35 was identified as Bacillus cereus. Y22_F64 and Y22_F68 were identified as Umbelopsis nana and Aspergillus parvulus, respectively. To identify the effects of the dominant microorganisms on Tri. Matsutake cultivation, metagenomic analyses were performed. Discovery of these Tri. matsutake mycelium growth-promoting microorganisms and metagenomics analyses are expected to contribute to our understanding of Tri. matsutake fruiting body growth and construction of biomimicry.
Yang, Kiwoung;Yi, Go-eun;Robin, Arif Hasan Khan;Jeong, Namhee;Lee, Yong-Hyuk;Park, Jongin;Kim, Hoyteak;Chung, Mi-Young;Nou, Ill-Sup
Horticultural Science & Technology
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v.34
no.2
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pp.305-313
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2016
Brassica juncea (2n = 4x = 36, AABB genome, 1,068 Mb) is a U's triangle species and an amphidiploid derivative of B. rapa and B. nigra. Fifteen varieties were used to study the ITS (internal transcribed spacer) regions of ribosomal DNA and MITEs (miniature inverted-repeat transposable elements) with a view of developing specific molecular markers. ITSs and MITEs are an excellent resource for developing DNA markers for genomics and evolutionary studies because most of them are stably inherited and present in high copy numbers. The ITS (ITS1 and ITS2) sequence was compared with the consensus sequence of B. rapa and B. nigra. Variation in ITS1 created two separate groups among 15 varieties, with 10 varieties in one group and 5 in the other. Phylogenetic analysis revealed two major clusters for those 10 and 5 varieties. Among the 160 different MITE primers used to evaluate the selected 15 varieties of B. juncea, 70 were related to the Stowaway, 79 to the Tourist, 6 to the hAT, and 5 to the Mutator super-families of MITEs. Of 160 markers examined, 32 were found to be polymorphic when fifteen different varieties of B. juncea were evaluated. The variety 'Blackgat' was different from the other mustard varieties with respect to both phenotype and genotype. The diversity of 47 additional accessions could be verified using eight selected molecular markers derived from MITE family sequences. The polymorphic markers identified in this study can be used for varietal classification, variety protection, and other breeding purposes.
Seven populations of 586 Hanwoo have been characterized by using 10 microsatellite DNA markers. Size of microsatellite markers decided using GeneMapper Software (v.4.0) after analyze in kinds of ABI machine of name of 3130. Frequencies of microsatellites markers were used to estimate heterozygosities and genetic distances. Genetic distancesbetween populations were obtained using Ne's DA distance method. Expected heterozygosity between each population was estimated very analogously. Genetic distances (0.0413) between Kangwan (KW) and Gyonggi (GG), Jeonpuk (JP) were nearest than distances between other populations by 0.021. Genetic distances between Gyonggi (GG) and Kyongpuk (KP) showed far distance than other populations by 0.032. In the UPGMA tree that is made based on DA distance matrix. Each individuals were not ramified to different group and were spread evenly in phylogenetic dendrogram about all Hanwoo of each regional area populations. But Hanwoo proven population was ramified to different group.
A comprehensive analysis of the genetic diversity and relationship of the cold-water fishery walleye pollock (Theragra chalcogramma), the most abundant economically important fishery resource in the East sea of Korea, has not been carried out, despite its importance in Korea. The present study assessed the genetic diversity and relationship between five walleye pollock populations (Korean population, Russian population, USA population, and Japanese populations) of T. chalcogramma using eight microsatellite DNA (msDNA) markers to provide the scientific data for the preservation and management of the Pollock fishery resource. The results of the analysis of 186 individuals of the Pollock revealed a range of 7.13-10.63 numbers of alleles (mean number of alleles=9.05). The means of observed heterozygosity ($H_O$), expected heterozygosity ($H_E$) were 0.732 and 0.698, respectively. The results of genetic distance, Pairwise $F_{ST}$, UPGMA (UPGMA: un-weighted pair-group method with an arithmetical average) (the phylogenetic tree), PCA (PCA: Principal Coordinate analysis) analysis pointed to significant differences between the Korean population, Russian population, USA population, and Japanese populations, although small (p<0.05). These results shed light on the genetic diversity and relationships of T. chalcogramma and can be utilized for research on the evaluation and conservation of Korean T. chalcogramma as genetic resources.
The $\beta$-lactamase gene was cloned into E. coli DH5$\alpha$ from Bacillus sp. J105 with strong resistance against $\beta$-lactam antibiotics. The chromosomal DNA was partially digested with Sau3AI and ligated to BamHI digested pLAFR3. $\beta$-Lactamase positive clones were obtained by using in vitro packaging kit. The pKL11-${\Delta}4.6$ with $\beta$-lactamase activity was obtained by subcloning of the recombinant plasmid ($\beta$-lac +). The 6.5 kb fragment in the subcloned plasmid was sequenced. The DNA fragment that contains the $\beta$-lactamase gene encodes 309 amino acids. The 0.17 kb upstream region was similar to those of B. thuringinesis and B. cereus with 97% identity. The deduced amino acids sequence was also similar to those of $\beta$-lactamase from B. thuringinesis and B. cereus with 97% and 94% identity, respectively. The phylogenetic tree also showed the relationships of the $\beta$-lactamase gene of Bacillus sp. J105 to genetically related that of other Bacillus strains. Analysis of expression pattern of the pKL11-${\Delta}4.6$ in E. coli, revealed that the secretion efficiency of $\beta$-lactamase was $4{\sim}5%$ and the molecular weight was as same as that of original $\beta$-lactamase (31 kDa) from Bacillus sp. J105.
Purpose: Transfusion transmitted virus (TTV) is a newly discovered virus and to date the contribution of TTV to liver disease remains unclear. Little is known about the frequency of TTV infection in children in Korea. The purpose of this study was to investigate the prevalence and genotypic distribution of TTV carried by healthy children and patients with hepatitis in Korea. Methods: Eighty eight of healthy children and three groups of patients with hepatitis-14 patients with chronic hepatitis B, 12 patients with chronic hepatitis C and 25 patients with hepatitis of unknown etiology-were tested. TTV DNA was detected by semi-nested PCR using primer sets generated from N-22 region and from 5' noncoding region (NCR) of the viral genome. PCR products derived from 8 patients with hepatitis and from 11 healthy children were sequenced and a phylogenetic tree was constructed. Results: TTV was found by PCR with N22 primer in 11.3% of healthy children, 28.5% of children with hepatitis B, 25% of children with hepatitis C, 24% of children with hepatitis of unknown etiology. TTV DNA was found by PCR with 5'NCR primer in 32.9% of healthy children, 71.4% of patients with chronic hepatitis B, in 50% of patients with hepatitis C and in 48% of patients with hepatitis of unknown etiology. TLMV DNA was found in 48.9% of healthy children, 21.4% of patients with hepatitis B, 16.6% of patients with hepatitis C, 40% of patients with hepatitis of unknown etiology. Among the sequenced isolates, 10(52%) belonged to genotype 1 (G1) and others belonged to genotype 2 (G2) or genotype 3 (G3). Among the G1 sequences, 7 were grouped as G1a. Conclusion: TTV infection was common in healthy children and in patients with hepatitis. But, the prevalence of TTV DNA by 5'NCR primer was relatively high in patients with hepatitis B and there may be some association between TTV and hepatitis B virus infection. G1 was the major genotype of the studied population.
Seo, Bo Yoon;Jung, Jin Kyo;Lee, Gwan-Seok;Yang, Chang Yeol;Cho, Jumrae;Kim, Yang Pyo
Korean journal of applied entomology
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v.59
no.3
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pp.217-231
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2020
In 2019, the sex pheromones of Spodoptera frugiperda were used to examine moth trapping in cornfields in Gochang, Korea. Four types of traps were prepared, two funnel-types and two delta-types, each baited with 300 or 1000 ㎍ of a two-component (2C) blend of synthetic sex pheromones [100% (Z)-9-tetradecenyl acetate (Z9-14Ac) and 2% (Z)-7-dodecenyl acetate (Z7-12Ac)]. The greatest number of S. frugiperda were captured in the 300 ㎍ funnel-type trap (first catch: August 6). Large numbers of Mythimna loreyi (a non-target) were also caught in the funnel-type traps. Two wing-type traps were baited with 1000 ㎍ of the 2C blend or a four-component (4C) blend [100% (Z)-9-tetradecenyl acetate, 8% (Z)-11-hexadecenyl acetate (Z11-16Ac), 2% (Z)-7-dodecenyl acetate, and 1% (Z)-9-dodecenyl acetate (Z9-12Ac)] and the capture efficiency was assessed. Low numbers of S. frugiperda were captured regardless of the blend, and more M. loreyi were captured using the 4C blend. The two intraspecies groups clustered separately in a phylogenetic tree constructed using partial sequences (1004 bp) of cytochrome c oxidase subunit 1 (CO1). Of the 70 S. frugiperda captured in the pheromone traps, 66 belonged to CO1-RS (CO1 rice-strain) and 4 to CO1-CS (CO1 corn-strain). Twelve consistent single nucleotide polymorphisms (SNPs) were identified in CO1 between the CO1-RS and CO1-CS groups of S. frugiperda. Of the 73 S. frugiperda, 4 had the same SNP pattern as the CO1-CS group (including the corn strain) and 69 had the same SNP pattern as the CO1-RS group (including the rice strain).
Kim, Yi-Joon;Cao, Wa;Lee, Yu-Jeong;Lee, Sang-Un;Jeong, Jeong-Han;Lee, Jin-Woo
Journal of Life Science
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v.22
no.10
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pp.1295-1306
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2012
A microorganism producing carboxymethylcellulase (CMCase) was isolated from seawater and identified as Bacillus atrophaeus. This species was designated as B. atrophaeus LBH-18 based on its evolutionary distance and the phylogenetic tree resulting from 16S rDNA sequencing and the neighbor-joining method. The optimal conditions for rice bran (68.1 g/l), peptone (9.1 g/l), and initial pH (7.0) of the medium for cell growth was determined by Design Expert Software based on the response surface method; conditions for production of CMCase were 55.2 g/l, 6.6 g/l, and 7.1, respectively. The optimal temperature for cell growth and the production of CMCase by B. atrophaeus LBH-18 was $30^{\circ}C$. The optimal conditions of agitation speed and aeration rate for cell growth in a 7-l bioreactor were 324 rpm and 0.9 vvm, respectively, whereas those for production of CMCase were 343 rpm and 0.6 vvm, respectively. The optimal inner pressure for cell growth and production of CMCase in a 100-l bioreactor was 0.06 MPa. Maximal production of CMCase under optimal conditions in a 100-l bioreactor was 127.5 U/ml, which was 1.32 times higher than that without an inner pressure. In this study, rice bran was developed as a carbon source for industrial scale production of CMCase by B. atrophaeus LBH-18. Reduced time for the production of CMCase from 7 to 10 days to 3 days by using a bacterial strain with submerged fermentation also resulted in increased productivity of CMCase and a decrease in its production cost.
An intensive interaction between yeasts and insects has highlighted their relevance for attraction to food and for the insect's development and behavior. Yeast associated in the gut of insects secretes cellulase which aided in the food digestion (cellulose degradation). Three strains of cellulose-degrading yeast were isolated from the gut of adult grasshoppers collected in Gyeonggi Province, South Korea. The strains $ON22^T$, $G10^T$, and $G15^T$, showed positive cellulolytic activity in the carboxymethyl cellulose (CMC)-plate assay. The phylogenetic tree based on sequence analysis of D1/D2 domains of the large subunit rRNA gene and the internal transcribed spacer (ITS) regions revealed that the strains $ON22^T$ (100 and 98.4% sequence similarities in D1/D2 domains and ITS) and $G10^T$ (99.8 and 99.5% in D1/D2 domain and ITS region) were most closely related to the species Moesziomyces aphidis JCM $10318^T$; $G15^T$ (100% in D1/D2 domains and ITS) belongs to the species Moesziomyces antarcticus JCM $10317^T$, respectively. Morphology and biochemical test results are provided in the species description. Cellulase with its massive applicability has been used in various industrial processes such as biofuels like bioethanol productions. Therefore, this is the first report of the cellulolytic yeast strains $ON22^T$, $G10^T$, and $G15^T$ related to the genus Moesziomyces in the family Ustilaginaceae (Ustilaginales), in Korea.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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